胆胃宁对乙醇性胃黏膜损伤保护作用的实验研究
作者：刘永霞 顾庆华 倪润洲 肖明兵 魏群 江枫。
【摘要】 目的：研究中药胆胃宁对无水乙醇所致胃黏膜损伤的保护作用及作用机制。方法：40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和胆胃宁低、中、高剂量组共5组。正常对照组和模型组均以1 ml生理盐水灌胃，胆胃宁组分别予胆胃宁1 ml、2 ml、4 ml 灌胃，2 h后除正常对照组外均予无水乙醇灌胃。再过2 h后处死大鼠，观察胃黏膜改变并测定溃疡指数及溃疡抑制率以及胃黏膜病理组织学改变，检测胃黏膜丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、前列腺素E2（PGE2）等指标。结果：胆胃宁能减轻乙醇所致胃黏膜损伤，抑制溃疡形成，改善胃黏膜组织学损害。胆胃宁尚可有效抑制乙醇损伤胃黏膜所致的SOD和PGE2降低以及MDA升高，且具有剂量依赖性。结论：胆胃宁可有效预防乙醇所致胃黏膜损伤，其机制可能与减轻脂质过氧化，提高抗氧化活力和PGE2水平有关。
[Abstract] Objective: To study the protective effect and the mechanism of Chinese herbal medicine Dan—Wei—Ning（DWN） on alcohol—induced gastric mucosal damage. Methods: Forty SD rats were randomly divided into five groups: control group， model group and three DWN—treated groups. The rats in three treated groups were given 1 ml， 2 ml and 4 ml of DWN respectively by intragastric administration， while the rats in control group and model group were given 1 ml of normal saline. Two hours later all rats except those in the control group were given 1 ml of absolute alcohol intragastrically. After another two hours， the rats were sacrificed and their stomachs were taken out to observe the mucous injury and determine the ulcer index and inhibition rate. Pathological changes were observed under microscope. Maleic dialdehyde （MDA）， superoxide dismutase （SOD）， and prostaglandin E2 （PGE2） were determined in the gastric homogenate. Results: DWN could lessen gastric mucous injury， inhibit ulcerous formation and improve pathological changes of damaged gastric mucosa induced by alcohol. DWN potently inhibited both decrease of SOD and PGE2 and increase of MDA in damaged gastric mucosa induced by ethanol in a dose—dependent manner. Conclusion: DWN has a potent protective effect on ethanol—induced gastric mucosal injury by the reduction in lipid peroxidation， augmentation in the antioxidant activity and increase in PGE2.
[Key words] Gastric mucosal damage；Dan—Wei—Ning；Absolute alcohol；Animal model；Rat。
胆胃宁是在古方大柴胡汤基础上加减而成的经验方，具有活血化瘀、理气止痛、收敛制酸、健胃消食的作用。经临床观察发现，胆胃宁对胃炎、胃溃疡具有较好疗效[1]。为客观评价此作用，并为临床推广和应用胆胃宁提供科学依据，我们建立了胃黏膜损伤动物模型，研究胆胃宁对胃黏膜的保护作用及其机制。
1 材料与方法。
1.1 实验动物 健康近交系Sprague Dawley（SD）大鼠共40只，雌雄各半，体重180~200 g，由南通大学实验动物中心提供。
1.2 实验药品及试剂 胆胃宁：由炒柴胡、炒黄芩、炒枳壳、法半夏、制军、杭白芍、炒白术、广郁金、广木香、川厚朴、粉甘草等中药组成的中药方剂，南通市中医院制剂室提供，含生药1 g/ml，密封储存于4 ℃冰箱内备用；微量蛋白测定试剂盒、一氧化氮试剂盒、微量丙二醛（MDA）测定试剂盒、谷胱甘肽测定试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）测试盒均购自南京建成生物工程研究所，前列腺素E2（PGE2）测定试剂盒购自泛邦化工技术开发有限公司，并按说明书操作。
1.3 主要仪器设备 JD801D图像分析系统、低温离心机、酶标仪、半自动生化分析仪、匀浆机等。
1.4 动物分组与给药及大鼠胃黏膜损伤模型的建立 SD大鼠40只随机分为正常对照组，模型组，胆胃宁低、中、高剂量组共五组，每组8只，雌雄各半。实验前所有大鼠均禁食24 h，禁水2 h，胆胃宁低、中、高剂量组分别予胆胃宁1 ml、2 ml、4 ml 灌胃，正常对照组和模型组均以1 ml生理盐水灌胃，2 h后除正常对照组以1 ml生理盐水灌胃外，其余各组均予1 ml无水乙醇灌胃，再过2 h，将所有大鼠轻度乙醚麻醉后剖腹取胃标本，肉眼观察胃黏膜改变并测定溃疡指数及溃疡抑制率。并在腺胃区的相同部位切取组织块0.5 cm×1.0 cm，10％甲醛固定，常规脱水、石蜡包埋、4 μm厚度连续切片，HE染色，观察胃黏膜组织的病理变化。最后制备胃组织匀浆，检测MDA、SOD、一氧化氮（NO）、PGE2等指标。
1.5 溃疡指数和溃疡抑制率的计算 溃疡指数：使用捷达JD801D图像分析系统进行分析，分别勾画出全胃面积和溃疡面积，利用计算机进行处理计算出溃疡面积占全胃面积的百分比即溃疡指数。
溃疡抑制率（100%）=［（模型组溃疡指数—治疗组溃疡指数）/模型组溃疡指数］×100%。
1.6 统计学方法 以Stata8.0统计软件进行统计分析，数据采用x±s表示，采用单因素方差分析，P0.05示差异有统计学意义。