腺垂体不同细胞染色法的改良和应用

【摘要】 目的 探讨腺垂体不同细胞的染色方法，提高显示效果。方法 选择不同动物的脑垂体，进行染色比较，确定最佳动物供体和染色方法。结果 六种细胞以不同的颜色清晰地显示在一张切片上，色彩艳丽。结论 该染色方法稳定可靠，有利于对不同细胞的鉴别，适用于教学和科学研究。

【关键词】 腺垂体 特殊染色 改良。

Improvement and application of the histological stain method in adenohypophysis　　Abstract：Objective: To study the special stain method of different cells in the adenohypophysis. Methods: The hypophysis from several kinds animals was used in the experiment. In order to determine suitable animal sample and the best stain method, the slices of the hypophysises were stained with the special stain method that was improved. Results: Six kinds of cells within the adenohypophysis were demonstrated in different colors in the same slice. Conclusion: The good method is reliable and can easily distinguishing various kinds cells. 　　Key words：adenohypophysis; special stain；improve 　　脑垂体是人体内重要的内分泌器官，其结构复杂，特别是腺垂体的细胞种类多，用常规染色方法不能显示各种细胞的形态，故很难对各种细胞的组织学结构和病理变化进行观察和研究，为教学和科研带来很大困难。虽然免疫组织化学的方法能区别某种细胞，但不能做到六种细胞同时显示，且操作复杂，要求条件高，试剂昂贵，限制了应用。为此，我们经过反复试验改进，成功地使六种细胞在同一张切片上清晰的显示出来，色彩艳丽，对比明显，为教学和科研提供了有效的方法，现将此法介绍如下。

1 材料和方法。

1.1 材料 　　　　取健康成年猪的脑垂体（由山东农业大学畜牧专业实验室提供），雌雄不限，将猪处死后放血，立即开颅，找到颅底的垂体窝后将垂体取出，取材时操作轻柔，共取材6个；同时取大白鼠和兔子的脑垂体各六个，取材方法同上。取材后立即10%福尔马林固定12h。

1.2 方法。

1.2.1 切片 脑垂体固定后常规处理，石蜡包埋切片，切片厚5μm，顺利做连续切片，无断裂破碎现象。将切片贴裱到载玻片上，40℃温箱内烘干备用。

1.2.2 染色 切片常规脱蜡到水，蒸馏水洗入过甲酸液5min：88%甲酸40ml、双氧水4ml、浓硫酸0.5ml。自来水冲洗10 min。蒸馏水洗入阿利新兰液，室温下过夜：阿利新兰2g、2N硫酸100ml，加热溶解过滤。自来水冲洗10 min，蒸馏水洗。PAS染色，入1%过碘酸（新配）5 min，蒸馏水洗数次，Schiff试剂10 min，（Schiff试剂配法：蒸馏水200ml煮沸，停火后加碱性品红1g，不停搅拌溶解，溶液冷却至50℃时，加入1N盐酸20ml，冷却至室温，加偏重亚硫酸钾1g溶解混匀，置暗处过夜，再加活性炭2g，充分摇荡混匀过滤，滤液呈无色或淡黄色，装入有色瓶中，放4℃冰箱内保存备用。）自来水冲洗20 min，蒸馏水洗。0.5%偶氮卡红液30s，（56—60℃）：偶氮卡红0.5g、蒸馏水100ml，蒸馏水洗。2%橘黄G染液30～40 min：橘黄G 2g、磷钨酸1g、蒸馏水100ml。0.1%苯胺酒精分化数秒钟，蒸馏水洗。常规脱水、二甲苯透明，中性树胶封固。