小檗碱对兔颈动脉血管成形术后再狭窄的影响
作者：张焕鑫, 张宏考, 王家宁, 曾凡龙, 郭凌郧, 唐慕湘。
[摘 要] 目的:通过观察小檗碱对球囊损伤后兔颈动脉内膜增生与血管重塑的影响，为血管成形术后再狭窄的防治寻找新的治疗策略。方法:日本大耳白兔40只，随机分为假手术组、模型组、小檗碱组和辛伐他汀组，除假手术组外各组均以球囊导管扩张损伤颈动脉内膜，并分别给予生理盐水、小檗碱和辛伐他汀各2.5 mg /（kg・d）腹腔注射，假手术组仅普食喂养。术后15 d取损伤颈动脉段切片，作形态学观察，利用图像分析系统测量血管新生内膜厚度（IT）、管腔面积(LA)、新生内膜面积(IA)、内弹力板围绕面积(IEL)、中膜面积(MA)、外弹力板围绕面积(EEL)。结果:血管球囊损伤后, 小檗碱组和辛伐他汀组IT、IA、IA/MA均显著小于模型组（P0.01）。与模型组相比，小檗碱组和辛伐他汀组LA、IEL、EEL均显著增大（P0.01）, MA则无显著性差异。结论:小檗碱可通过抑制兔颈动脉新生内膜增生与不良的血管重塑, 从而为小檗碱防治血管成形术后再狭窄提供了实验基础。
[关键词] 球囊损伤；内膜增生；血管重塑；再狭窄；小檗碱；兔。
Abstract:Objective To investigate the effect of berberine on intima hyperplasia and vascular remodeling after balloon withdrawal injury of Rabbit Carotid Artery and explore a novel therapeutic strategy for the prevention of restenosis after percutaneous transluminal angioplasty.Methods Fourty Japanese rabbits were allocated randomly into 4 groups: sham operation group(n=7), model group(n=11)，berberine group (n=11)and simvastatin group(n=11), which were administered respectively with Sodium chloride, Berberine and Simvastatin (2.5mg／kg.d) . Intimal Thickness（IT）, Luminal Area (LA), Intimal Area（IA）,Internal Elastic Lamina (IEL), medial area (MA) and external elastic lamina (EEL) were measured after 15 days following carotid balloon injury. Results There was a significant decrease in IT, IA, IA/MA and a significant increase in LA, IEL,EEL compared berberine group and simvastatin group with model group.Conclusion Berberine may inhibit intimal hyperplasia and detrimental vascular remodeling.
Key words：balloon withdrawal injury; intimal hyperplasia; vascular remodeling; restenosis; berberine; rabbit。
经皮腔内冠状动脉成形术(Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty,PTCA)后3~6个月的再狭窄率高达30%~50%[1]，尽管支架植入可降低再狭窄的发生，但仍有15%~30%的病例发生支架内再狭窄[2]。损伤血管在术后发生内膜增生与血管重塑不良是再狭窄形成中的主要病理过程[3~4]。最近研究表明，小檗碱不仅具有抗菌作用，还是一种新型降脂药物, 对血小板聚集有明显抑制作用[5]，还有细胞学研究认为小檗碱可抑制血管平滑肌细胞的增生，但对其抗再狭窄的在体研究却未见相关报道。本实验拟通过在体观察小檗碱对球囊损伤后兔颈动脉内膜增生与血管重塑的影响，初步探讨其对兔颈动脉血管成形术后再狭窄的防治作用。
1 材料与方法。
1.1 动物分组。
选取健康SPF日本大耳白兔40只[武汉大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK（鄂）2003—0004；实验动物技术上岗证：鄂动资字第421792号]，体重2.3~2.8 kg，平均（2.6±0.2）kg，雌雄不拘，分笼喂养，自由饮水。一周后随机分为假手术组（n=7）、模型组（n=11）、小檗碱组（n=11）和辛伐他汀组（n=11）。
1.2 模型制作与分组处理。
25%乌拉坦（1 g/kg）麻醉，肝素钠（200 U/kg）抗凝。暴露并游离右侧颈总、颈内和颈外动脉。于右颈总动脉近心侧距颈内、外动脉分叉4～5 cm处及右颈内动脉起始处用动脉夹夹闭，在右颈外动脉远心侧，距颈内、外动脉分叉约1 cm处结扎。于右颈外动脉结扎处近侧穿一细线备用，并剪一"V"型小口（约为管周1/3），血管钩拉起切口，直视下逆行插入球囊导管（美国Crodis公司，球囊为2.5 mm×20 mm）至动脉夹处，连接压力泵（爱尔兰Merit医疗有限公司），以5～6 atm注入肝素生理盐水扩张球囊，重复3次，每次30 s，缓慢回拉导管，逐段扩张动脉至切口处，抽空球囊，退出导管，在切口近侧结扎右颈外动脉。假手术组不行球囊扩张，余步骤同上。术后肌注青霉素80万 u/d，连续3 d，预防感染。小檗碱组予2.5 mg/（kg・d）黄连素注射液（安徽蚌埠制药厂，10 mg/支）腹腔注射，辛伐他汀组给2.5 mg/（kg・d）辛伐他汀（美国默克公司惠赠，批号FR—047）腹腔注射，模型组腹腔注射与小檗碱组等量生理盐水，假手术组仅给予普通饮食，至术后15 d实验结束。
1.3 切片制备及指标观测。
术后15 d处死全部家兔，暴露并游离右侧颈总动脉，取自颈内、颈外动脉分叉以下1 cm处至4～5 cm处约2～3 cm损伤段，生理盐水冲洗后放入10%中性甲醛固定，逐级乙醇脱水，石蜡包埋，间断均匀切片(每片厚4μm)。光镜下观察受损血管组织形态学改变，采用德国Leica Q500IW型图象分析系统测定血管新生内膜厚度(Intimal Thickness，IT)、管腔面积(Luminal Area，LA)、新生内膜面积(Intimal Area，IA)、内弹力板围绕面积(Internal Elastic Lamina，IEL)、中膜面积(Medial Area，MA)和外弹力板围绕面积(External Elastic Lamina，EEL)。
1.4 统计学处理。
应用SPSS11.0软件包，各组实验数据以均数±标准差（x±s）表示。各组间比较用方差分析，两组间比较用q检验。P＜0.05为有统计学意义。
2 结果。
2.1 实验动物情况。
本实验共用日本大耳白兔40只，其中1只（辛伐他汀组）手术过程中死亡，3只（包括模型组2只，辛伐他汀组1只）行颈动脉球囊剥脱术后死亡而退出实验，剩余36只完成全部实验。