【蔡氏扶正消症汤对胃癌血管生成影响的实验研究】扶正散结合剂能抗癌吗
摘要 目通蔡氏扶正消症汤生药对胃癌血管皮生长因子表达影响探究蔡氏扶正消症汤抑制胃癌血管生成机制研究。
方法用免疫组化法检测对肿瘤血管皮细胞生成因子(VG)表达影响。
结蔡氏扶正消症汤浓g／l其平吸光分别0096±000与空白对照组平吸光05±005相比有非常显著性差异(＜00)并且VG平吸光随蔡氏扶正消症汤浓增加而降低。
关键词 蔡氏扶正消症汤 胃癌 血管皮细胞生长因子 实验研究。
肿瘤血管是肿瘤生长、移重要因素肿瘤血管不仅肿瘤身提供充足营养而且可以提供肿瘤向远处播散导致肿瘤恶性生长和复发、移。
近几年针对肿瘤复发移研究焦逐渐集肿瘤血管生成方面抑制肿瘤血管生成成临床急问题。
蔡氏扶正消症汤是全国老医药专学术验继承指导老师蔡慎初教授数十年临床治疗肿瘤验方它能够提高患者生活质量延长患者生存期。
探究其抗癌机制我们通体外实验观察该方对胃癌血管皮细胞生长因子(VG)表达影响研究药物抑制胃癌生长、移、复发机制。
材。
细胞株和细胞培养胃癌细胞G790购国科学院上海生化和细胞生物研究所。
将G790细胞接种0％胎牛血清、00／l青霉素和00／l链霉素R60培养液37℃、5％、饱和湿培养箱培养每～3换液次长满常规胰蛋白酶消化法传代培养［］。
药物及其制备蔡氏扶正消症汤主要由黄芪、人参、莪术、藤梨根、露蜂房、八月札、白毛藤、徐长卿、全蝎等药组成。
三蒸水漂洗3次烧杯煎煮30分钟渣8层纱布滤60~80℃隔水蒸浓缩成生药g／l调值70~7℃保存备用。
用前再3000 r×5 离心渣。
3 主要试剂R60购美国GB公司；胎牛血清天津市正江高科技有限公司产品；青霉素石庄制药集团有限公司产品；链霉素华北制药股份有限公司产品；3(5二甲基噻唑)5二苯基氮唑溴盐()购华美生物工程公司；二甲亚砜江苏鸿声化工厂生产分析纯试剂；胰蛋白酶使用g公司产品；VG和VG免疫组化试剂盒迈新生物技术开发公司生产。
主要仪器设备倒置相差显微镜；德国L；酶标仪lx800美国；光学显微镜(0l)纯水仪(llr)；二氧化碳培养箱(llr)；烤箱(r)；显微摄像系统(0)。
实验方法。
免疫组化法［］检测对VG表达影响。
细胞爬片制备六孔板放入盖玻片G790细胞以8×05数接种六孔板培养待细胞盖玻片铺满约50％分别加入0、、、33、、55g／l 蔡氏扶正消症汤给予处理取出盖玻片80％乙醇室温下固定5B清洗3次×5。
实验步骤按试剂盒要进行。
①每张切片加滴或50μl氧化酶阻断溶液(试剂)以阻断性氧化物酶活性室温下孵育0；B冲洗3×3’。
②甩B液每张切片加滴或50μl非免疫性动物血清(试剂B)室温下孵育0；甩血清每张切片加滴或50μl抗体(用户选)阴性对照组加B室温下孵育60或℃夜；B冲洗3×5’。
③甩B液每张切片加滴或50μl生物素标记二抗体(试剂)室温下孵育0；B冲洗3×3’。
④甩B液每张切片加滴或50μl链霉菌抗生物素氧化物酶溶液(试剂)室温下孵育0；B冲洗3×3’。
⑤甩B液每张切片加滴或00μl新鲜配制B或溶液显微镜下观察0阳性显色棕色或红色；水冲洗苏木素复染B冲洗返蓝；玻片梯酒精脱水干燥(二甲苯透明)性树胶封固。
3 统计学处理不药物浓组比较采用完全随机设计方差分析各药物浓组与对照组比较采用检验以005检验水准采用00数据分析系统。
3 结。
蔡氏扶正消症汤对血管皮细胞生长因子(VG)平吸光影响免疫组化VG阳性细胞胞浆棕褐色；平吸光测量软件分析结如表所示空白对照组平吸光分别05±005而蔡氏扶正消症汤浓g／l平吸光0080±00(＜005)gl0053±0007和55g／l003±000(＜00)与对照组比较有显著性差异VG平吸光随蔡氏扶正消症汤浓增加而降低说明蔡氏扶正消症汤能抑制VG表达。
讨论。
蔡氏扶正消症汤是根据胃癌虚、瘀、毒病因病机而遣方用药认虚、瘀、毒贯穿胃癌病程始末。
“虚”是指人体正气相对不足；“毒”既是外侵毒邪作用结又是存体有毒邪耗伤人体气血使人体正虚而邪实；至“瘀”因胃癌多与情志失调有关肝郁气滞日久血行不畅挟毒邪积胃部而成癌该方含有益气扶正药人参、黄芪相配伍不仅抗肿瘤免疫方面具有独特疗效还可以提高机体非特异性免疫功能和特异性免疫功能很地改善肿瘤患者免疫功能低下状态从而抑制肿瘤生长作用［3］破血祛瘀、行气散结莪术、八月札、徐长卿现代药物研究莪术对癌细胞有快而强直接破坏作用并能增强瘤细胞免疫原性促进机体对肿瘤免疫排斥反应；另外还有清热毒、消坚散结白毛藤、藤梨根攻毒散结露蜂房、全蝎等全方共起到扶正消症效［59］。
胃癌生长、浸润和移要量新生血管且血管生成增效强和肿瘤移能力呈正相关。
VG是种特异性作用皮细胞多功能因子对诱导和调节肿瘤血管形成有重要作用。
VG是种选择性促血管皮细胞有丝分裂原［］直接刺激皮细胞增殖并产生纤维蛋白原激活剂和胶原酶。
这不仅可促进皮细胞活动有利血管生成而且还有利肿瘤细胞脱落进入血管或向邻近组织扩散肿瘤浸润移创造条件。
结显示VG平吸光随着蔡氏扶正消症汤浓增加而降低说明蔡氏扶正消症汤能抑制VG表达终可能抑制肿瘤血管生成作用。
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