复方黄连涂膜剂中盐酸小檗碱经皮吸收研究
作者：施薇 ，刘志强，王淑敏 ，皮子凤。
【摘要】 目的研究氮酮对盐酸小檗碱的体外透皮吸收的影响，为黄连复方涂膜剂透膜吸收促进剂的选择和生产质量控制提供依据。方法以裸鼠皮肤为试验屏障，利用ZTY智能透皮实验仪和高效液相色谱（HPLC）检测法，研究氮酮与冰片联合使用时对盐酸小檗碱透皮吸收的影响。结果当一定量的冰片与浓度分别为0%，2%，5%的氮酮联合使用时，盐酸小檗碱的透皮吸收速率常数分别为62.591，52.927，60.622 μg·cm—2·h—1。结论 冰片与不同浓度的氮酮联合使用时，氮酮与冰片有一定的相互抑制作用，氮酮浓度为0%时，有最大的透皮吸收速率常数。
【关键词】 涂膜剂； 透皮吸收； 高效液相色谱； 盐酸小檗碱。
Abstract：ObjectiveTo study the effects of azone on the percutaneous of berberine hydrochloride in vitro so as to provide experimental basis for complex prescription Coptis chinensis plastics to choose absorb promoter and control production quality. MethodsWith the skin of nude mice as the barrier, ZTY intelligence permeation skin tester and detection of HPLC were used to study the effects of coalition utilization of azone and borneol for percutaneous absorption of berberine hydrochloride in vitro. ResultsThe rate constants of berberine hydrochloride were 62.591，52.927 and 60.622 μg·cm—2·h—1 respectively when azone and borned of 0,2%,5% were used together.ConclusionAzone with different concentration and bornel inhibit each other when they are combinedly used.The absorption rate is maximum when azone is 0%.
Key words： Plastics; Percutaneous absorption ; HPLC ; Berberine hydrochloride 黄连为毛茛科（Ranunculaceae）植物黄连Coptis chinensis Franch，三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao 或云连 Coptis teeta Wall.的干燥根茎。药材依次习称为“味连”“雅连”“云连”［1］。黄连性寒，味苦，归心、脾、胃、肝、胆、大肠经，具有清热燥湿,泻火解毒之功效。黄连中主要成分为盐酸小檗碱，具有抗腹泻、抗炎、免疫促进、降血压、抗心律失常、降血糖等作用。本文以裸鼠皮肤为实验屏障，利用ZTY智能透皮吸收试验仪对盐酸小檗碱的透皮吸收进行研究［2～4］，并且利用高效液相色谱法［5～7］对盐酸小檗碱的含量进行测定，优选出最佳经皮吸收促进剂，为复方黄连涂膜剂的实验研究提供实验基础。
1 仪器与材料。
1.1 仪器Waters2690 高效液相色谱仪，2996 UV diode detector 检测器（美国Waters 公司产品）；SanoriusBS110S十万分之一分析天平（北京赛多利斯有限公司产品）；KQ－500DE型医用数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司产品），ZTY智能透皮试验仪(巩义市予华仪器有限责任公司)。
1.2 药物和试剂复方黄连涂膜剂，盐酸小檗碱对照品（供含量测定，批号：110713—200208，中国药品生物制品检定所），氯化钠，聚乙烯醇（PVA—124）(SCRC国药集团化学试剂有限公司),氮酮，吐温－80，甘油；乙醇，甲醇均为分析纯；磷酸，乙腈均为色谱纯，超纯水。
1.3 动物Wistar大鼠（由吉林大学实验动物中心提供）。
2 方法与结果。
2.1.1 色谱条件色谱柱：Diamonsil C18（5 μm, 4.6 mm×250 mm），柱温35℃；流动相：乙腈—0.1%磷酸（20∶80）；流速：1 ml·min—1；检测波长：228 nm。
2.1.2 样品溶液的制备 按“2.2.4”项下制得样品溶液。
2.1.3 标准曲线的制备 精密称取盐酸小檗碱5.00 mg置于5 ml容量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得浓度为1.00 mg·ml—1盐酸小檗碱对照品溶液，再分别精密量取一定体积的对照品溶液，配制成浓度为0.003 ，0.01 ，0.04，0.1，0.16 mg·ml—1的对照品溶液。在上述色谱条件下，进样体积为5 μl，以盐酸小檗碱浓度X（mg·ml—1）对吸收峰面积Y回归，得回归方程：Y＝3.268 7X—0.048 9，r=0.999 9,在0.015～0.8 μg 范围内线性关系良好。
2.1.4 精密度实验 精密吸取对照品溶液10 μl，重复进样5次，测定结果的RSD=0.19％，表明仪器的精密度良好。
2.1.5 稳定性实验按“2.2.4”项下操作制得供试液，分别在2 ,4,8,12 ,24 h进样10 μl,在上述色谱条件下进行测定，测定结果的RSD=0.72％，(n=5)，表明供试品液在24 h内稳定。
2.1.6 加样回收率实验按“2.2.4”项下操作，取A组药液3 h接收液，烘干后甲醇定容至1 ml，过滤后得样品液，分别精密量取一定体积样品液5份，精密加入对照品适量，依法测定，计算加样回收率，平均回收率为X=98.862％，RSD=1.120％，表明本法准确性较好，方法可行。