培养条件对两性霉素B抑制白色念珠菌作用的影响

作者:刘丽英,董小青,王丹敏。

【摘要】 目的 综合考察各种因素(不同的培养基培养基的pH值、真菌接种浓度等)对AmB抑制白色念珠菌作用的 影响 ,为临床合理用药提供 理论 依据。 方法 液体稀释法。结果 在不同的培养基中,AmB对白色念珠菌的MIC值不同,随着pH的增高及真菌接种菌液浓度增加,其MIC值增加。结论 AmB对白色念珠菌的MIC值会受到多种因素的影响,所以,进行药物的抗菌活性 研究 时应制定并严格执行统一的标准。

代写论文。

【关键词】 两性霉素B;白色念珠菌;抑制 论文网

【Abstract】 Objective To investigate the effects of various factors, such as the type of medium, Ph of medium, size of inoculum on the activity of amphotericin B (AMB) against Candida albicans, so as to provide evidences for rational use of the drug. Methods The broth dilution test was examined.Results The activity of AmB against Candida albicans was influenced by the type of medium.The minimum inhibition concentrations (MIC) increased with the increase of pH and inoculum concentration. Conclusion The study of antifungal activity must establish and strictly implement unified standard. 论文网

【Key words】 amphotericin B; Candida albicans; inhibition 毕业论文

药物的抗真菌活性受到多种因素的影响,例如,不同的培养基培养基的pH值、培养时间、培养温度、真菌接种浓度真菌形态、血清、有氧与厌氧环境等。两性霉素B是 目前 临床上 应用 的抗真菌药物,本研究是综合考察各种因素对其抑制白色念珠菌作用的影响,为临床合理用药及进一步药用价值的开发奠定基础。 毕业论文

1 实验材料。

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1.1 菌株 白色念珠菌Cla,购于 中国 医学真菌保藏中心。

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1.2 药品 两性霉素B(amphotericin B,AmB),上海先锋药业公司,上海第二制药厂生产。AmB溶于蒸馏水中制备成浓度为1280μg/ml的药物原液,过滤除菌。临用时用灭菌蒸馏水稀释为128μg/ml最高浓度药液。

1.3 培养基 改良沙氏液体培养基(1%蛋白脉,4%葡萄糖);YEPD培养基(2%蛋胨,2%葡萄糖,1%酵母浸粉)。

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1.4 其他 HZQ—X100A型恒温振荡培养箱(上海一恒 科学 仪器有限公司产品);5000μl、1000μl加样枪(法国GILSON产品);SN—CS—2D单人净化工作台(苏州净化设备厂);改良沙堡氏液体培养基(北京奥博星生物技术责任有限公司)。血球计数板、显微镜、滤器(水质滤膜)等。 论文代写。

2 实验方法 论文网

2.1 不同的培养基对MIC值的影响 取活化2次并处于对数生长期的白色念珠菌,用血球计数板计数菌浓度使约为105cfu/ml,以液体稀释法[1]测定改良沙氏液体培养基和YEPD培养基对最低抑菌浓度的影响:(1)2~10管加1ml培养基;(2)1管加1ml药液(128μg/ml),2管加1ml药液(128μg/ml),然后用枪尖吹打混匀,吸取1ml到第3管,依次倍比稀释至第8管后弃去;(3)取上述浓度为105cfu/ml的0.1ml菌液按9→1的顺序加入上述9管中,28℃培养24h,不搅动情况下,以培养基清晰的试管为菌株100%受抑制,此管的药物浓度即为最低抑菌浓度(MIC)。 毕业论文

2.2 培养基pH值对MIC值的影响 用0.1mol/L甘氨酸—盐酸缓冲液(pH 3~5)和磷酸盐缓冲液(pH 6~8)调整沙氏培养基的pH分别为3、5和8,然后按上述方法测定MIC值。 论文代写。

2.3 接种真菌浓度对MIC值的影响 将浓度为102cfu/ml,103cfu/ml,104cfu/ml,105cfu/ml,106cfu/ml的菌液接种于改良沙氏液体培养基,其余步骤与上法同,测定其MIC值。 论文网

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