血小板活化与冠心病的相关性

CD62P、CD42b能反映血小板活化程度,是血小板活化最敏感的指标[1]。而流式细胞术为评价血小板在体内的活化程度提供了准确的特异性指标[2]。

1材料与方法。

1. 1一般资料。

CHD患者93例,所有患者均曾作冠状动脉造影确诊,同时符合WHO的冠心病诊断标准。其中男60例,女33例;年龄41~78岁,平均59.3岁;心绞痛(AP)患者69例、急性心肌梗死(AMI)患者24例。健康对照组107例,其中男71例,女36例;年龄38~73岁,平均57.5岁;均为健康体检者,无心脏病史,无冠心病危险因素,心电图正常。以上各组间在年龄,性别及其他一般情况均无显著差异。试剂及流式细胞仪FACSvantage均为美国BD公司产品。

1. 2检测方法(1)样品处理:

取静脉血1.8ml,置于含0.2 ml 3.8%枸橡酸钠抗凝剂试管中混匀。离心(800r/min,5min)分离得到富血小板血浆。加入等量2%多聚甲醛(终浓度为1%)固定15 min,用PBS—EDTA缓冲液悬浮血小板并洗涤2次(1000r/min ,15min),然后血小板悬浮于PBS—EDTA缓冲液中,并调节血小板浓度至1×1010/L;(2)荧光染色:取两支试管,各加入患者血小板悬液100μl,再加入异硫氰酸荧光素(FITC)标记的鼠抗人CD42b单克隆抗体20μl及藻红蛋白(PE)标记的鼠抗人CD62P单克隆抗体20μl混匀。室温下避光30min,PBS洗涤2次(1000r/ min,15 min),用0.5ml PBS悬浮并转移至流式上样管,上机检测;(3)流式细胞仪检测和数据分析:前向角和侧向角均采用对数放大,设门选取血小板,每份样品收集20000个血小板,Cellquest软件分析计算CD62P、CD42b的阳性表达率(%)。

1. 3统计学处理。

计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用t检验。

2结果。

2. 1与对照组相比,CHD患者CD62P活性显著增高(P0.01),而CD42b活性显著降低(P0.01)。

2. 2CHD患者中急性心肌梗死CD62P活性比心绞痛(AP)显著增高(P0.01),而CD42b活性显著降低(P0.01)。见表1。表1冠心病各组与健康人血小板CD62P、CD42b的表达(略)注:与对照组相比,*P0.01;与A组相比,△P0.01。

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