维吾尔族肥胖患者脂肪和血清内脂素、脂联素的改变及相关因素

作者：关亚群 焦谊 王延蛟 孙丽丽 艾克拜尔·艾力 赵学信。

【摘要】 　　目的 探讨维吾尔族肥胖患者内脂素、脂联素(APN)在腹部网膜、皮下脂肪组织的表达和血清水平改变及其与体重指数（BMI）、腰臀围比（WHR）和血脂的关系。方法 用半定量RTPCR方法检测41例肥胖患者和20例非肥胖对照脂肪组织内脂素和APN mRNA表达水平,ELISA法检测血清内脂素和APN浓度，并测量腰围（WC）、臀围（HC）、血压（BP）、空腹血糖（FPG）和血脂等。结果 ① 网膜脂肪组织内脂素mRNA表达水平在肥胖组与非肥胖对照组之间差异无显著性，肥胖组APN mRNA表达水平显著低于非肥胖对照组(P0.05)；内脂素、APN在两组网膜和皮下脂肪组织mRNA的表达水平均无显著性部位差异；血清内脂素肥胖组显著高于非肥胖对照组（P0.05），APN在两组之间比较差异无显著性。② 肥胖组舒张压（DBP）和收缩压（SBP）均显著高于非肥胖对照组(P0.01和P0.01)，高密度脂蛋白(HDLC)明显低于非肥胖对照组(P0.05)。③ 网膜脂肪组织内脂素mRNA表达量与血清内脂素、BMI和TG显著正相关，APN mRNA表达量与血清APN显著正相关，与BMI、LDLC显著负相关。结论 维吾尔族肥胖患者血清内脂素水平升高，网膜和皮下脂肪组织内脂素mRNA表达水平无显著性部位差异；APN mRNA在网膜脂肪组织的表达显著降低，内脂素和脂联素可能在维吾尔人中心性肥胖相关的代谢紊乱性疾病中起一定作用。

【关键词】 内脂素；脂联素；肥胖；RTPCR。

【Abstract】 Objective To investigate the visfatin and adiponectin mRNA expressions in abdominal subcutaneous and omental adipose tissues and the serum concentration of Uighur obese patients and the relationship between mRNA expression levels，serum concentration and body mass index(BMI)，waisthip ratio(WHR) and blood lipids.Methods The visfatin and adiponectin mRNA expression levels were measured by RTPCR in abdominal subcutaneous and omental adipose tissues of 20 nonobese controls and 41 subjects.Serum visfatin and adiponectin were measured by ELISA.Waist circumference(WC)，hip circumference(HC)，systolic blood pressure (SBP) and diastolic blood pressure (DBP) were measured.Fasting plasma glucose (FPG) and lipids were determined.Results ①There was no significantly difference in visfatin gene expression in omental adipose tissues between obesity group and normal control.The adiponectin mRNA expressions in omental adipose tissues showed decreased significantly in obese subjects(P＝0.018).There were no significantly differences of visfatin and adiponectin gene expression between omental and abdominal subcutaneous adipose tissues in all groups.The serum visfatin was significantly high in obese subjects(P＝0.022),but there was no significantly difference of adiponectin between nonobese controls and subjects.②Obese subjects showed the higher levels of DBP and SBP and lower HDLC compared with lean controls.③The expression level of visfatin mRNA was positively correlated with serum visfatin,BMI and TG in omental adipose tissue；the expression level of adiponectin mRNA in abdominal subcutaneous adipose tissue was positively correlated with serum adiponectin，and was negatively correlated with BMI and LDLC. Conclusions There is no significant difference in visfatin mRNA expression level between omental and abdominal subcutaneous adipose tissue in Uighur obese patients；however，the results of significantly decrease adiponectin mRNA expression and increase serum visfatin, which seems to be partly responsible for the metabolic disorders with central obesity.

【Key words】 Visfatin；Adiponectin；Obesity；RTPCR 　　肥胖无论是在发达国家还是在发展中国家都是广泛流行的多因性代谢疾病。肥胖时，脂肪细胞因子分泌的变化，不但影响以脂肪形式进行的能量储存及释放，还会影响组织的胰岛素敏感性、发生低度炎症反应，从而增加胰岛素抵抗（IR）、2型糖尿病（T2DM）、高血压、血脂异常等多种疾病的患病风险。新疆维吾尔族是一个肥胖高发的民族，T2DM的患病率也处于全国较高水平〔1〕，但对于肥胖与其相关疾病在生物学机制上的联系，至今未有明确结论。内脂素是表达于内脏脂肪组织的一种分泌性蛋白，对内脂素生物学功能研究发现，内脂素具有结合并激活胰岛素受体的类胰岛素和降血糖的作用，并通过旁分泌途径作用于内脏脂肪组织，具有促进脂肪细胞的成脂作用，但与IR的关系尚不清楚。脂联素（APN）是脂肪细胞特异性分泌的细胞因子，具有增加脂肪酸氧化、促进葡萄糖的摄取、改善胰岛素抵抗及抗动脉粥样硬化等作用〔2〕，与肥胖伴随的T2DM、高血压及血脂异常等密切相关。本研究旨在探讨维吾尔族肥胖患者内脂素、APN在腹部网膜、皮下脂肪组织mRNA的表达水平和血清中的变化及其与体重指数（BMI）、腰围（WC）、臀围（HC）及腰臀围比（WHR）和血脂之间的关系。

1 材料与方法。

1.1 研究对象。

61例研究对象均来自2007年6月至2008年10月间新疆维吾尔自治区人民医院慢性胆囊炎择期手术患者。以BMI≥25.0 kg/m2为肥胖切点，肥胖组(BMI≥25.0 kg/m2)41例（男20例，女21例），平均年龄（53±11）岁；非肥胖对照组(18.5 kg/m2＜BMI＜25.0 kg/m2)20例（男7例，女13例），平均年龄（47±13）岁。均排除T2DM、高血压、肿瘤、急性炎症和创伤等应急情况。本研究获得该医院伦理委员会批准，并获得研究对象的知情同意。

1.2 标本留置。

术中留取大网膜脂肪垫和腹部皮下脂肪，迅速置液氮冷冻，然后置—80℃冰箱保存。手术当天收集空腹静脉血5 ml，测空腹血糖（FPG）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）等。

1.3 脂肪组织总RNA提取。

按Trizol（Invitrogen公司）试剂盒说明书提取。用比色法测定吸光度，计算RNA浓度；用甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性。

1.4 内脂素和APN mRNA表达检测。

取1 μg RNA经反转录合成cDNA，并以cDNA为模板分别扩增内脂素、APN和内参照βactin基因。根据人内脂素、APN与βactin的cDNA序列分别设计引物，内脂素（375 bp）引物序列：上游5′CTGATTCTGGAAACCCTC3′，下游5′CTGGCGTCCTATGTAAAG3′；APN(234 bp)引物序列：上游5′AGGTCATCACCATTGGCAAT3′，下游5′ACTCGTCATACTCCTGCTTG3′；βactin(357 bp)引物序列：上游5′ AGGTCATCACCATTGGCAAT3′，下游5′ACTCGTCATACTCCTGCTTG3′。扩增完毕后取扩增产物5 μl，置于含有溴化乙锭的2%琼脂糖凝胶中进行电泳，采用BioRad Quantity One图像分析软件分析数据,以内脂素和APN区带的A值积分/βactin区带的A值积分为指标进行统计学分析。

1.5 血清内脂素、APN及生化指标检测。

用ELISA法测定血清内脂素、APN，用氧化酶法测定FPG，酶化学法测定TG、HDLC等。

1.6 统计学分析。

采用SPSS15.0软件进行统计分析，所有数据经正态性检验呈正态分布后用x±s表示。两组间均数比较采用t检验，相关分析采用Pearson相关分析。

2 结 果。

2.1 肥胖组与非肥胖对照组临床和生化资料的比较。

肥胖组BMI、WC、HC、WHR、SBP、DBP均显著高于非肥胖对照组 (P＜0.01和/或P＜0.05),HDLC显著低于非肥胖对照组(P0.05)。2组年龄、LDLC、FPG和TG水平差异无统计学意义,见表1。表1 肥胖组与非肥胖对照组临床和生化资料的比较(略)。

2.2 内脂素、APN在网膜、腹部皮下脂肪组织mRNA表达量和血清水平的比较。