高效液相色谱法同时测定沙枣中槲皮素和异鼠李素的含量

作者：杜瑞芳, 王雨梅 刘卫东，马丽。

【摘要】 　　目的建立沙枣中槲皮素（Quercetin）和异鼠李素（Isorhamnetin）的高效液相色谱测定方法。方法采用ODS柱，甲醇0.1%磷酸溶液（58∶42），检测波长370 nm。结果槲皮素在0.042～0.84 μg范围内线性关系良好，异鼠李素在0.041 2～0.824 μg范围内线性关系良好；该法回收率槲皮素为98.98％，异鼠李素为99.27％；RSD槲皮素为1.56％，异鼠李素为0.86％（n=6）结论该方法为沙枣的含量测定提供了一种快速和准确的方法，为蒙药植物资源的进一步开发提供了可靠的依据。

【关键词】 沙枣 槲皮素 异鼠李素 含量测定 高效液相色谱法。

Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for determination of quercetin and isorhamnetin in Fructus Elaeagni.MethodsThe separation was performed on Kromasil C18 Column(250 mm×4.6mm, 5μm) and the mobile phase was methanol—0.1%phosphoric acid(58∶42). Quercetin and isorhamnetin was detected at 370nm. ResultsThe standard curve was linear within the concentration range of 0.042～0.84 μg for quercetin and 0.0412～0.84 μg for isorhamnetin , respectively. The recovery was 98.98％ for quercetin and 99.27％ for isorhamnetin, respectively. ConclusionThis method is rapid and accurate for determination of quercetin and isorhamnetin. It could be used for further exploitation of Mongolia herbal resources.

Key words:Fructus Elaeagni； Quercetin； Isorhamnetin； Assay； HPLC 　　沙枣，为胡颓子科植物沙枣Elaeagnus angustifolia L.的干燥成熟果实，具有补虚，安神，健脾，止泻等功效，用于治疗身体虚弱，神志不清，消化不良，腹泻［1］。在西部地区，沙枣被称为“百树宝”，果实营养丰富，含糖量较高，干品为62%～70%，主要为果糖，蛋白质、维生素C也比较丰富。另外，果实中还含有鞣质、黄酮类和黏液质［2］。人们对其枝、叶及花进行研究，发现各部分都含有黄酮类化合物［3，4］，果实中所含黄酮类化合物的测定未见报道。本研究首次采用HPLC法测定沙枣果实中槲皮素和异鼠李素含量，操作简便，测定灵敏度、准确度均较好，对更好地开发沙枣药用植物资源具有一定的意义。

1 器材。

1.1 仪器。

Agilent1100液相色谱仪，Agilent1100紫外检测器，AS3120超声波清洗机，AG135电子分析天平。

1.2 试药。

槲皮素对照品和异鼠李素对照品均由中国药品生物制品检定所购入；水为双蒸水，甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

1.3 药材沙枣采自内蒙古巴彦淖尔、乌海，由内蒙古大学生命科学学院赵立清博士鉴定为沙枣Elaeagnus angustifolia L.的果实。

2 方法和结果。

2.1 色谱条件。

Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm，100A）；流动相：甲醇 0.1％磷酸溶液（58∶42）；检测波长370 nm；体积流量：1.0 ml/min；柱温：室温；进样量：20 μl。在此条件下供试品中槲皮素成分、异鼠李素成分能与其它成分达到较好分离。见图1。

2.2 对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品和异鼠李素对照品适量，加80％甲醇分别制成每毫升含槲皮素和异鼠李素200 μg的溶液。精密量取上述对照品溶液各0.5 ml，置10 ml量瓶中，加80％甲醇制成每毫升含槲皮素和异鼠李素10 μg的混合对照品溶液。