血液病患儿骨髓细胞DNA变异的临床意义探讨
方法 应用流式细胞仪测定54例血液病患儿骨髓单个核细胞的DNA含量，计算细胞周期各时相比例。
3例接受治疗的急性淋巴细胞性白血病患儿达到完全缓解后，其S%明显高于治疗前，非白血病组的骨髓细胞周期与正常对照组差异无显著性。
结论 检测常见小儿血液病DNA可为临床诊断、判断其预后及其治疗提供客观的参考数据。
关键词 常见血液病 DNA变异 异倍体 细胞周期 【Abstract】 Objective To study the clinical significance of DNA variationof marrow cell in the common blood disease in children.Methods We have detectedthe DNA quantity of MNLL in54children patients with the common blood disease byflow cytometry，and counted the ratio of any timely difference in cell cycle.Results The deˉtection ratio of heteroploidy in leukemia children was more than that in non—leukemia.Four of12patients with non—leukemia were heteroploidy，2of4were precancerous lesion.The S%of marrow cell of leukemia was significant lesser than that of control.Three acute lymphocytic leukemia were got CR，and its S%was more than that before therapy.There were no significance between the marrow cell cycle of non—leukemia and the normal control.Conclusion To detect the DNA in the common blood disease in children can provide objective parameter for clinical diagnosis，judging prognosis and its therapy. Key words common blood disease DNA variation heteroploidy cell cycle 为探讨血液病患儿DNA的变异，我们采用流式细胞仪（FCM）检测54例血液病患儿骨髓单个核细胞（MNLL）的DNA含量，以分析其倍体水平及细胞增殖周期，进一步探讨其临床意义。
1 对象与方法 1.1 对象 （1）急性白血病组（AL）:初诊为AL42例，其中急性淋巴细胞性白血病（ALL）22例，急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）20例。
（2）初诊为非白血病的常见血液病组12例:4例急性特发性血小板减少性紫癜（AITP），慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）、再生障碍性贫血（AA）、急性溶血性贫血各2例，营养性缺铁性贫血、粒细胞减少症各1例，均经临床及实验室检查确诊，年龄2～14岁，平均年龄6.5岁。
（3）正常对照组15例，为骨髓象正常的儿童，年龄2～14年。
平均年龄6.7岁。
1.2 方法 （1）样品制备:取肝素抗凝骨髓0.1ml，按常规方法分离MNC，每个测定管加骨髓细胞10 6 个，然后依次加入DNA测定液（Coulter DNA Kit），室温保存30min，然后加入PI染色液（终浓度为100μl/ml）。
室温下30min后上机测定。
（2）DNA测定方法:流式细胞仪FACscan（Coulter公司），15mW氩离子激光光源，发射波长488nm，每个样品测定10000个细胞，采用Coulter公司提供的DNA分析程序，获取 各样本细胞周期时相百分比。
流式细胞检测方法:采用Coulter公司生产的流式细胞仪FACscan进行参数检测，每个样本随机测定10 4 个细胞，并求出细胞生长分数（%）=（S+G 2 /M）/（G 1 +S+G 2 /M）×100%，将测量的数据、图形同步输入HP—300Consort30计算机，应用相应软件程序进行资料处理。
（3）倍体分析:根据DNA指数（DI）判断，本仪器DI正常范围是0.90～1.10，小于0.9为亚二倍体，大于1.10为超二倍体。
1.3 统计学处理 采用t检验和X 2 检验。
2 结果 2.1 DNA异倍体检出率 白血病组异倍体检出率57.1%（24/42），其中ALL68.2%（15/22），ANLL为25%（5/20），两者比较存在显著差异（P0.05），血液病组异倍体检出率33.3%（4/12），与白血病组比较存在显著差异（P0.05）。