芦丁渗透泵片的体外释放度方法研究
【摘要】 目的建立芦丁渗透泵片体外释放度测定方法。方法考察不同溶出方法、溶出介质和搅拌桨速度对芦丁渗透泵片体外释药的影响，用紫外分光光度法测定芦丁的含量，并用不同配比处方的芦丁渗透泵片制品进行体外释放度差异测定。结果溶出介质的pH值、溶出方法及搅拌桨转动速度均对芦丁渗透泵片体外释药行为无显著影响；确定了释放介质的种类与体积、溶出方法和搅拌桨转速，建立了芦丁渗透泵片体外释放度测定方法，并能测出不同配比处方的芦丁渗透泵片制品体外释放度差异。结论所建立的释放度测定方法能有效地对辅料进行筛选，可以用于处方优化等。
药物体外释放度是指药物从缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂及透皮贴剂等在规定条件下释放的速率和程度，是评价药物制剂质量的内在指标，是制剂质量控制的重要手段。芦丁为槲皮素的3—O—芸香糖苷，具有广泛的药理作用［1,2］，临床用于防止脑溢血、高血压病等心血管疾病。芦丁口服普通片剂存在给药频繁的问题，开发芦丁口服渗透泵片，可降低给药频率，提高患者用药的顺应性。芦丁渗透泵片的体外释放度方法的研究，是处方设计和优化的重要保证。本实验对芦丁渗透泵片体外释放度方法进行研究。
1 仪器与试药。
TU—1201紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；ZRS—8智能溶出试验仪(天津大学无线电厂)；Sartrius BP211S型电子天平(德国赛多司)；BUG25.12型超声清洗机；DSY—1—4孔电热恒温水浴锅(北京国华医疗器械厂)；DGG—9240型电热恒温鼓风干燥箱(上海森信实验仪器有限公司)。 芦丁原料药 （四川彭县植化厂，批号：002807）；芦丁对照品（芦丁含量≥91.7%，中国药品生物制品检定所，批号：100080—200306）；芦丁渗透泵片试制品（成都医学院药学实验室自制，批号：080427）；无水乙醇、氢氧化钠、盐酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾均为分析纯，水为纯化水。
2 方法与结果。
2.1.1 测定波长的选择精密称取经干燥器干燥至恒重的芦丁对照品适量数份，置容量瓶中，分别加入乙醇、纯水、0.1 mol/L HCl、pH 4.5磷酸盐缓冲液、pH 7.4磷酸盐缓冲液，超声使溶解并定容，制成浓度为12 mg·L—1的芦丁对照品溶液，以相应溶剂为空白，在200～500 nm进行波谱扫描，结果芦丁紫外吸收光谱由两个主要吸收带组成，带Ⅰ在350～370 nm之间，带Ⅱ在250～275 nm之间，带Ⅱ吸收峰的强度大于带Ⅰ（见图1），本实验选用带Ⅱ吸收峰对应的吸收波长为测定波长。
2.1.2 专属性研究分别取芦丁对照品、芦丁渗透泵片试制品、空白辅料适量，加乙醇超声处理15 min，滤过，续滤液定容至100 ml，摇匀，精密量取3 ml置于25 ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，以乙醇为空白，在200～500 nm进行波谱扫描，同法分别考察以纯水、0.1 mol/L HCl、pH 4.5和pH 7.4磷酸盐缓冲液为溶剂时的专属性，结果空白辅料均没有干扰。
2.1.3 标准曲线的制备精密称取经干燥器干燥至恒重的芦丁对照品约15 mg，置100 ml量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为153.8 mg·L—1的贮备液。精密量取贮备液适量，置于10 ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，得到3.076，6.152，12.304，18.456，24.608 mg·L—1标准系列溶液，在UV分光光度计258 nm处，测定吸收度，并将吸收度数据和标准品浓度进行回归处理，制备芦丁在水为溶剂中的标准曲线。同法分别以纯水、0.1 mol/L HCl、pH 4.5和pH 7.4磷酸盐缓冲液，制备相应标准系列溶液，在各自最大吸收波长处测定吸收度，并将吸收度数据和标准品浓度进行回归处理，制备芦丁在不同溶剂中的标准曲线。（见表1）。结果表明，芦丁在3.076～24.608 mg·L—1内浓度和吸收度呈良好的线性相关性。表1 不同介质中芦丁的标准曲线方程介质测定波长（略）。
2.1.4 精密度实验取芦丁对照品乙醇溶液（12.304 mg·L—1）和芦丁渗透泵片试制品供试液，重复测定吸光度5次，结果RSD均2％，表明精密度良好。
2.1.5 稳定性实验取芦丁渗透泵片试制品供试液分别于0，30，60，90，120 min测定吸收度，结果所测时间点的吸光度的RSD为1.2％，表明样品供试液在120 min内稳定。
2.1.6 重复性实验取芦丁渗透泵片试制品20片，除去包衣，研细，分别取5份样品，每份约0.12 g，精密称定，置于100 ml量瓶中，加入乙醇适量振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取0.8 ml，置于10 ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，在258 nm处测定吸收度。结果样品中芦丁的平均含量为124.7 mg/g，RSD=0.94％。
2.1.7 加样回收率实验取已知含量的芦丁渗透泵片试制品20片(49.88 mg/片)，除去包衣，研细，取约0.06 g，精密称定，置于100 ml量瓶中，加入乙醇适量振摇使溶解，分别加入芦丁对照品乙醇溶液（3.012 mg/ml）2，2.5，3 ml，加乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取0.8 ml，置于10 ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，在258 nm处测定吸收度，按下述公式计算回收率。（见表2）。结果表明平均回收率为101.2％，RSD为1.41％，加样回收良好。表2 回收率实验结果（略） 公式：回收率(%)=（测得量—制剂中含量）/加入对照品量×100%。
释放介质温度的选择：芦丁渗透泵片主要是在胃肠道吸收，本试验条件是模拟人体胃肠道环境，故溶出介质温度的选用人体的温度（37±0.5）℃。 释放介质种类的选择：芦丁原料药在不同介质中稳定性的比较：将芦丁原料药15 mg，与不同介质0.1 mol/L HCl、纯水、pH 4.5 PBS、pH 7.4 PBS各100 ml配成溶液，室温放置，分别于第0，2，4，8，12 h取样稀释10倍后测定其吸收度，结果芦丁在上述4种介质中吸光度值的RSD分别为1.35％，0.95％，0.92％，1.54％，表明芦丁在上述4种介质中12 h内均稳定。