异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型下丘脑—垂体—肾上腺轴
【摘要】 目的阐明异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型丘脑—垂体—肾上腺轴(HPAA)功能的调节。 方法 根据维吾尔医学 理论 采用多因素复制小鼠异常黑胆质载体动物模型，并用异常黑胆质成熟剂不同剂量（8.58,17.16,34.32 g/kg）， 14 d全程干预给药,此后用ELISA法检测血清ACTH和CORT含量；采用高效液相—荧光检测 分析 法分析了异常黑胆质载体动物模型小鼠血清和脑去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5—羟色胺(5—HT)、3，4二羟基本乙酸（DOPAC）等单胺类神经递质含量。结果异常黑胆质成熟剂不同剂量可以降低异常黑胆质载体动物模型血清NE含量（P0.01），增加血清DA、5—HT和DOPAC含量（P0.01），同时发现异常黑胆质成熟剂能降低异常黑胆质载体动物模型脑组织中NE含量（P0.01），异常黑胆质成熟剂大剂量能增加DA含量（P0.05），小剂量和大剂量能增加DOPAC含量（P0.01）。结论提示异常黑胆质成熟剂可能通过参与神经内分泌系统的内在调节，改善异常黑胆质载体动物模型的丘脑—垂体—肾上腺轴(HPAA)功能的紊乱。
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【关键词】 异常黑胆质成熟剂 载体模型 丘脑—垂体—肾上腺轴 调节。
代写论文。
Abstract：ObjectiveTo study the regulative effect of Abnormal Savda Munziq (ASMq) on Hypothalamic—Pituitary—Adrenocortical axis dysfunction on Abnormal Savda carrier animal models. MethodsMulti—complicated induction methods were adopted to prepare the Abnormal Savda carrier animal models. Animals were administered with ASMq at 8.58,17.16,34.32 g/kg b. w. respectively for fourteen days in order to block the procedure of Abnormal Savda development. The concentrations of andreno corticotropic hormone (ACTH), cortisol (CORT) in serum were measured by ELISA method. HPLC—fluorescence detection methods were applied to measure the concentrations of NE, DA, 5—HT and DOPAC. ResultsAll doses of ASMq used in our experiment significantly decreased the concentration of serum NE (P0.05) and increased the concentrations of serum DA, 5—HT and DOPAC (P0.05). Additionally, NE in brain tissue was inhibited (P0.01) while the DA (P0.05) and DOPAC (P0.01) were enhanced by the administration of ASMq. ConclusionThe ASMq has regulative effects on Hypothalamic—Pituitary—Adrenocortical axis（HPAA）in the Abnormal Savda carrier animal model.
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Key words：Abnormal Savda Munziq; Carrier animal model; HPAA; Regulation 论文代写。
近年来对异常黑胆质病证的 研究 表明，异常黑胆质常引起肿瘤、糖尿病、高血压病和哮喘等复杂性疾病。异常黑胆质病证与下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPAA)功能紊乱密切相关，HPAA功能紊乱可能是异常黑胆质证的生成及导致复杂性疾病的物质基础。我们推测临床有效的异常黑胆质成熟剂可能通过调节机体HPAA功能的紊乱达到防治异常黑胆质性病证的发生 发展 之功效，HPAA可能是异常黑胆质成熟剂的作用靶点之一。本研究 应用 异常黑胆质成熟剂不同剂量14 d全程干预异常黑胆质载体动物模型，之后，观察实验动物神经内分泌多项指标，探讨异常黑胆质成熟剂对HPAA功能紊乱的调节作用。
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1 材料与方法。
1.1 仪器与试剂 论文网。
RQH—350型人工气候箱，上海精宏实验设备有限公司；JXDT—1型小鼠跳台仪器； BS—110型 电子 天平，北京赛多科斯天平有限公司；低温超速离心机，美国Beckman 公司；BioRad 550 酶标仪，美国BioRad公司产品；721分光光度计；低温冰箱。液相色谱操作条件：Aglient1100 I080 高压泵,FLD荧光检测器,色谱柱ZORBAX ODB C18 （4.6 mm×150 mm×5 mm）,流动相配比硫酸水：甲醇，流量1 ml/ min ,进样环体积20 μl ,工作电压 +121V ,柱温30℃，检测波长360 nm。小鼠血清促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA 试剂盒，皮质酮(CORT) ELISA 试剂盒，美国RD公司产品，按照试剂盒操作说明进行操作。去甲肾上腺素(Norepincphrine,NE)、多巴胺(Dopamine,DA)、5—羟色胺(Seretonin,5—HT)，3，4二羟基本乙酸（3，4—Dihydroxyphcnylamine,DOPAC），3，4二羟基卞胺（DHBA），以上为SIGMA公司产品，其他试剂均为国产分析纯试剂。 论文网。
1.2 药材和异常黑胆质成熟剂的制备处方中的药材购自于新疆维吾尔自治区维吾尔医 医院 草药房，经新疆维吾尔自治区维吾尔医医院制剂中心质检科严格鉴定，符合《中华人民共和国药典》和《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册》的规定。 论文网。
成熟剂根据国家发明专利《能够使异常黑胆质型体液成熟和清除的药物及其制备方法（专利号C082130082.8）》制备，用旋转蒸发仪浓缩至膏稠状，然后在60℃真空干燥，备用，每1g药粉含3.4 g生药。使用时根据试验需要用双蒸水配制使用。 论文代写。
1.3 实验动物ICR小鼠，清洁级，雄性，体重（20±2） g，新疆医科大学实验动物中心提供,许可证号：SCXK(新)2003—001。 论文网。
1.4 动物分组及造模 代写论文。
1.4.1 异常黑胆质成熟剂对血清ACTH和CORT含量的 影响 选取55只ICR小鼠，按体重将小鼠完全随机分为5组，即正常对照组和载体动物模型、载体动物模型小剂量给药组、载体动物模型中剂量给药组、载体动物模型大剂量给药组。
毕业论文。
1.4.2 异常黑胆质成熟剂对血清和脑组织单胺类神经递质含量的影响选取55只ICR小鼠，按体重将小鼠完全随机分为5组，即正常对照组和载体动物模型、载体动物模型小剂量给药组、载体动物模型中剂量给药组、载体动物模型大剂量给药组。 论文网。
1.4.3 载体动物模型的建立正常对照组：在室温下 〔温度（25±3）℃，相对湿度60～80%〕用普通饲料饲养，随机饮食水未受任何刺激。 载体动物模型组：我们用人工气候箱，将模型组小鼠置于温度为6℃，相对湿度为25%～32.8%的环境饲养，11:00～21:00，干寒属性的饲料喂养，采用间断足底电击作为应激源（输出电压20～30V，不定时改变电压，间隔0.2～0.5s，20 min/d，1次/d），产生慢性应激。
正常对照组与模型组同样从6:00～18:00提供光线。 代写论文。
1.5 动物给药实验第1天开始除正常组和载体动物模型外，其他载体动物模型予异常黑胆质成熟剂药粉小剂量2.53 g/kg（生药量8.58 g/kg）,相当于临床用量的等效剂量；中剂量5.06 g/kg（生药量17.16 g/kg），相当于临床用量的等效剂量的2倍；大剂量10.12 g/kg（生药量34.32 g/kg），相当于临床用量的等效剂量的4倍。每天实验前1 h灌胃给药异常黑胆质成熟剂，给药14 d。
1.6 血清ACTH和CORT含量的测定各组小鼠在第14天末次给药1 h后上午10:00～12:00之间眼静脉采血，4℃ 离心分离血清，分离血清放置在—80℃保存待测。采用小鼠血清促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA 试剂盒，皮质酮(CORT) ELISA 试剂盒进行测定。
毕业论文。
1.7.1 血清样品的制备和检测各组小鼠在第14天末次给药1 h后上午10:00～12:00点之间眼静脉采血，4℃,4 000 r/min, 离心15 min，离血清，取血清 ,加入等体积的0.1 mol/L（含内标物200 μg/ml）高氯酸,在冰浴中振摇混合1.5 min，再加上高氯酸1滴（原液），在冰浴中继续混合1.5 min。18 000 r/ min离心20 min ,取上清液置入Eppendorf 管中，置于液氮罐保存待测,测定时取管底超滤液，按上述色谱条件分析分离血清放置在—80℃保存待测。进样10 μl/次，进行检测。 代写论文。