贯叶连翘的研究进展
【摘要】 贯叶连翘具有广泛的药理活性，在治疗抑郁症、爱滋病以及肿瘤方面的应用前景而成为当前国际研究开发的热点。文章介绍了贯叶连翘的化学成分、活性成分的提取方法和药理作用，为进一步研究和开发贯叶连翘提供理论基础。
贯叶连翘又名贯叶金丝桃［1］，欧洲名为St.john‘s wort，俗称为圣约翰草。贯叶连翘系藤黄科金丝桃属多年生草本植物，是世界上分布最广的天然植物。贯叶连翘在民间已有二千四百余年的药用历史。传统中医药学认为，其性平，味辛苦涩，具有清心明目、舒经活血、止血生肌、解毒消炎、利湿之功效［2］。在欧洲等国主要用于治疗抑郁症、甲型和乙型肝炎及爱滋病等。近年来也发现其对恶性神经胶质瘤有抑制作用［3］。
1 贯叶连翘的主要药理成分 贯叶连翘具有多种化学成分。主要有苯并二蒽酮类化合物（Naphthodianthrones）、间苯三酚化合物（Phloro glucinols）、黄酮类化合物（Flavonoids）［4］。深入地研究使人们发现贯叶连翘中的黄酮类在抗抑郁作用中起着不可忽视的作用。
1.1 苯并二蒽酮类化合物苯并二蒽酮类化合物主要包括金丝桃素（Hypericin）、伪金丝桃素(Pseudohypericin)、异金丝桃素（Isohypericin）、环金丝桃素（Cyclopseudohpericin）、原伪金丝桃素（Protitpseudohypreicin）等。其含量以金丝桃素和伪金丝桃素为主，鲜植物中含有的原金丝桃素和原伪金丝桃素在阳光下可分别转化为金丝桃素和伪金丝桃素。
1.2 间苯三酚化合物间苯三酚类物质广泛存在于藤黄科植物中。这类化合物的主要成分为贯叶金丝桃素（Hyperforin）和加贯叶金丝桃素（Adhyperforin）。贯叶金丝桃素含量为2%~4.5%，加贯叶金丝桃素为0.2%~1.9%。
1.3 黄酮类化合物贯叶连翘黄酮成分相当丰富，全草达到了9.25%，而且比金丝桃素要稳定，不用避光和热，具有较好的开发前景。已经鉴定的有槲皮素（Quercetin）、芦丁（Rutin）等，具有抗炎、抗病毒、收敛止血、止泻等功效。
2.1 金丝桃素的提取从化学结构式分析，金丝桃素在极性溶剂和非极性溶剂中溶解度都很高，但在非极性溶剂中极易被氧化，在极性溶剂中如甲醇、乙醇、乙醚中具有较好的稳定性，同时它具有多个酚羟基呈弱酸性，易溶于弱碱物质［5］。醇提法存在产品易吸湿，发粘的缺点。卢群等［6］优化出的最佳提取工艺是：药材4倍量的甲醇，40℃浸提3次，12 h/次。王晓利等［7］以甲醇为溶媒，采用回流提取与超声振荡提取，考察提取率，最后确定以甲醇超声提取30 min提取率最高。
2.2 黄酮类成分的提取关于贯叶连翘中黄酮物质的提取方法少有报道。目前比较通用的方法有：水提取法、碱液提取法、微波或超声波提取法、大孔树脂法、超滤法以及超临界萃取法等。瞿发林等［8］研究结果表明贯叶连翘中总黄酮的最佳提取条件为60%，乙醇80 ml，回流提取3 h。李莹等［9］研究表明采用乙醇热回流法，以金丝桃苷为指标，用量分数为80%乙醇10倍量，热回流提取2次，每次0.5 h可以提高金丝桃苷的提取率。各种方法各有优缺点，要根据提取物的性质、提取成本、工艺设备等条件来选择合适的提取工艺，提高黄酮类物质的提取率和原料的利用效果。
3 贯叶连翘提取物的药理作用 目前已知，贯叶连翘提取物中至少含有10种成分有药理作用。金丝桃素被认为是贯叶连翘提取物中最具有生物活性的物质，国内外已完成了金丝桃素抗爱滋病Ⅱ期临床试验［10］，治疗恶性神经胶质瘤的临床研究也在进行之中。
3.1 抗抑郁作用体外实验表明，贯叶连翘提取物的抗抑郁活性是多种成分综合作用的结果，其机制也不是单一的，不同的活性成分具有不同优势的抗抑郁机制［11］。 金丝桃素的抗抑郁作用较为独特，它以相近的效能同时抑制5—HT、多巴胺、去甲肾上腺素的摄取，并有广谱的摄取抑制作用，还可抑制γ—氨基丁酸和L—谷氨酸的摄取。这种广谱的摄取抑制作用提示金丝桃素的抗抑郁作用机理可能与其他抗抑制药不同，即它可能不是通过与不同的迁移分子上特定的位点结合，而是通过介入神经递质转化功能而发挥抗抑郁作用。 贯叶连翘中的金丝桃素对单胺氧化酶丙二醛（MAO）的抑制作用一直被公认为贯叶连翘抗抑郁的主要作用机理，然而该假设并未在一些实验中得到证实。金丝桃素对神经递质的摄取抑制作用为贯叶连翘抗抑郁作用的主要作用机理，其他的一些药理作用也可以解释其临床疗效。贯叶连翘的蒽酮部分也有抗抑郁作用，但是似乎不是其抗抑郁作用的主要成分，因为去掉蒽酮的贯叶连翘提取物仍然具有抗抑郁作用。由于贯叶连翘提取物及其制剂与传统化学抗抑郁药相比具有疗效好、副作用小等特点［12］，贯叶连翘已经是世界上最畅销的抗抑郁症植物药之一。其中最有说服力的是Linde等［13］的报道，治疗轻度和中度抑郁症患者时，含有金丝桃素类成分的贯叶连翘提取物治疗效果明显优于安慰剂，与标准抗抑郁药物（三环类）相比，疗效相同而副作用小。
3.2 抗病毒作用。
3.2.1 对HIV的作用朱晓薇等［14］报道了金丝桃素抗HIV逆转录酶的作用。金丝桃素2 μg/ml与HIV一同培养，结果显示HIV逆转录酶活性降低了75%。美国研究人员采用口服0.5 mg/kg金丝桃素，对30例爱滋病感染者进行临床观察，结果16人CD4值保持稳定或有所上升，表明患者免疫状况好转。
3.2.2 对包膜病毒的作用实验者将金丝桃素与病毒预培养后接种于细胞，发现0.78~1.56 μg/ml金丝桃素可有效杀灭Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV—1）、流感病毒A（Brazil）和莫洛尼鼠白血病毒。Maraleda等［15］通过对乙肝病毒（DHBV）模型研究金丝桃素对乙肝病毒的抗病毒活性，结果表明浓度为1~10 μg/ml，金丝桃素可在5 d或更长时间中阻断感染DHBV的细胞产生病毒颗粒。
3.3.1 金丝桃素抗肿瘤作用金丝桃素是贯叶连翘中最具生物活性的物质之一，也是贯叶连翘抗抑郁、抗病毒、抗肿瘤的主要活性成分之一。目前用金丝桃素进行肿瘤的光动力治疗（PDT），在体外细胞药效、动物实验等方面的研究十分活跃。金丝桃素的“抗癌谱”非常广，对多种癌症均有良好的疗效，其中皮肤癌的PDT已经进入Ⅰ期临床试验阶段。目前已知金丝桃素的抗肿瘤机制至少有3种，即直接杀灭、引发凋亡和局部血管闭塞导致的续发性细胞死亡。
3.3.2 贯叶金丝桃素抗肿瘤作用贯叶金丝桃素对光、氧气、温度敏感，极其不稳定，存放几个星期可以完全分解，因此它的药效作用常被忽视。但随着对贯叶连翘提取物活性作用的研究发现，贯叶金丝桃素不仅是贯叶连翘提取物抗抑郁的主要活性成分之一，且还具有显著的抗肿瘤活性。Schempp CM等［16］认为其机制可能是贯叶金丝桃素激活了线粒体介导的信号转导通路，从而诱导肿瘤细胞凋亡。Katarina Hostanska等［17］的报道证实了贯叶金丝桃素与金丝桃素在抑制K562和U937细胞生长时的协同作用。由于贯叶金丝桃素具有显著的抗肿瘤活性、体内低毒性、天然资源含量丰富，使其有望开发成一种新型的抗肿瘤药物。
3.3.3 黄酮类化合物抗肿瘤作用贯叶连翘中的槲皮素作为自然界分布最广的黄酮类化合物，不仅对多种致癌剂、促癌剂有拮抗作用，而且可以抑制多类恶性肿瘤细胞的生长和转移［18］。其他许多黄酮类物质均有类似的抗癌活性。贯叶连翘中的黄酮类物质含量相当丰富，在贯叶连翘的抗癌活性中所起的作用不容忽视。