西布曲明对营养性肥胖大鼠脂肪细胞中PPARγ表达的影响
【摘要】 肥胖是一种体内脂肪堆积过多和（或）分布不均匀，体重增加，是遗传因素和环境因素共同作用的结果,同时它也是一种代谢异常性的疾病。单纯性肥胖者多有家族史。因饮食因素,热量摄入过多,尤其高脂肪或高糖饮食均导致脂肪堆积而形成营养性肥胖。西布曲明为作用于中枢的肥胖症治疗药，主要通过其胺类（仲胺和伯胺类）代谢产物而产生作用，其主要机制为抑制去甲肾上腺素、5—羟色胺和多巴胺的再摄取而增强饱食感，从而减少能量摄入。PPARγ在脂肪细胞分化、糖代谢以及其他生理过程中起到重要的作用，在白色和棕色脂肪组织中均有高表达。文献报道，PPARγ基因敲除的大鼠表现出棕色脂肪组织（BAT）和白色脂肪组织（WAT）形成和功能的异常，而且这些大鼠表现出血清中瘦素（LEPTIN）和胰岛素（INSULIN）水平的增高，即PPARγ的水平高低与瘦素和胰岛素的水平呈负相关。本研究旨在通过对人工复制的营养性肥胖大鼠模型的作用来研究该药的作用机制与PPARγ的相关性，以及从形态学和组织学角度观察不同剂量的对大鼠减重效果的影响。
【Abstract】 Generally obesity is the abnormal state of having too much fat in the human body, and it is a kind of chronic metabotical disease caused by various factorts. Sibutramine mainly make effect by two metabolic products M1 and M2, which lead to the feeling of disliking dining and it can activate β3—E receptor in BAT by stimulating the sympathetic nerves. Sibutramine contributes well in reducing body weight.Peroxisome proliferator—activated receptor γ(PPARγ) is a significant factor in the differentiation of adipose cells, glycometabolism and many other physiological process. The level of PPARγ in BAT and WAT are relatively high. Documents said that in the rats whose PPARγ gene were knocked, the level of leptin and insulin in their serum increased obviously, without restraining of sugar. That is, the level of PPARγ is inappropriated with the level of leptin and insulin.
【Key words】 alimentary obesity; Sibutramine; PPARγ; animal model。
通过西布曲明对人工复制的营养性肥胖大鼠模型的作用来研究该药的作用机制与PPARγ的相关性，以及从形态学和组织学角度观察不同剂量的西布曲明对大鼠减重效果的影响。
1 实验原理。
盐酸西布曲明一水合物是以外消旋体的形式存在。其主要作用机制为：抑制神经细胞对5—羟色胺、去甲肾上腺素的再摄取；可以下调β—肾上腺素受体结合能力及去甲肾上腺素受体刺激腺苷酸环化酶系统。其药理活性并非通过促进5—HT释放而起作用，这一点不同于右芬氟拉明（右氟苯丙胺，dexfenfluramine）和右安非他明（右苯丙胺，dexamfetamine），前者主要通过促进释放5—HT 起作用，而 后者则主要是通过促进释放多巴胺及去甲肾上腺素起作用的。体外研究以及动物和人体的实验都显示西布曲明对多巴胺的释放无明显影响。盐酸西布曲明一水合物可以通过增加饱满感而减少进食量；同 时通过诱导产热作用而增加能量消耗。药物和活性代谢产物明显剂量依赖性地引起肥胖大鼠的进食减少。这种作用可能是中枢诱导的，主要通过抑制5—HT和去甲肾上腺素的再摄取引起5—HT 2A/2C和β受体活性增加，从而产生一种厌食感。盐酸西布曲明阻止大脑中的神经递质5—HT和去甲肾上腺素再摄取，使它们在神经细胞中维持较高浓度，增加过饱感。除此之外，有迹象表明它可增加代谢，消耗热量，最终产生降低体重的功能。同时文献报道，盐酸西布曲明对血清中瘦素和胰岛素水平的下调有一定影响［1，2］。
PPARγ在脂肪细胞分化、糖代谢以及其他生理过程中起到重要的作用，在白色和棕色脂肪组织中均有高表达。文献报道，PPARγ基因敲除的大鼠表现出棕色脂肪组织（BAT）和白色脂肪组织（WAT）形成和功能的异常，而且这些大鼠表现出血清中瘦素（LEPTIN）和胰岛素（INSULIN）水平的增高，表现出对糖类物质耐受，不表现出胰岛素的抑制。即：PPARγ的水平高低与瘦素和胰岛素的水平呈负相关［2］。
由此推测西布曲明有可能是一定程度上通过PPARγ的作用产生减肥效果。
通过组织学方法可以测定用药前后脂肪细胞数目及形态学变化，从而评价西布曲明的减肥作用以及浓度影响的差异；免疫组化实验和蛋白印记（Western—Blotting）实验可以半定量的测出脂肪细胞中PPARγ表达的变化。
2 材料与方法。
2.1 实验药品 盐酸西布曲明,生理盐水, PPARγ抗体（SANTA GRUZ公司）。
2.2 实验对象 幼年Wistar大白鼠70只进行营养性肥胖动物模型的复制。
2.3 实验方法。
2.3.1.1 实验动物 将100只Wistar大鼠，用以下高脂饲料饲养16周。
2.3.1.2 饲料 见表1。普通饲料：实验鼠全价饲料；高脂饲料：普通饲料60%，猪油 12%，蔗糖5%，花生5%，鸡蛋10%，麻油1%，食盐2%［4］。
2.3.1.3 造模方法 所有大鼠再造模期间自由摄食和饮水，饲料和水每日更换1次。饲养环境清洁，明暗同期为12h，温度，湿度适宜，通风良好。
2.3.1.4 观察指标 造模期间定时观察大鼠摄食量，饮水量，尿量，粪便质地和量，体重（W），体长（H），Lees指数。