家兔血浆中龙胆苦苷浓度的高效液相色谱测定
作者：赵淑红，蒋袁絮，马学琴，高亦珑，杨光，李记诤，马琳，余建强。
【摘要】 目的建立家兔血浆中龙胆苦苷的HPLC检测方法,研究秦艽中龙胆苦苷在家兔体内的药代动力学规律。方法以秦艽水煎醇沉液家兔耳静脉注射后定时取血, 色谱条件: SHIM—PACK VP—ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm) ;流动相: 甲醇—乙腈—水（5∶10∶85） ;检测波长: 271 nm;流速: 1.0 ml·min—1，测定血浆药物浓度，采用DAS软件计算药动血参数。结果龙胆苦苷血药浓度在0.683～136.6 μg·ml—1范围内线性关系良好(r= 0.999 5),最低定量浓度为0.0342 μg·ml—1。日内、日间精密度均小于10﹪,回收率为89.8﹪～101.4.3﹪。药—时曲线符合三房室模型，主要药动学参数：Tmax=0.083 h，Cmax=45.1 mg·L—1，V=1.312L·kg—1，CL=0.761 L·h—1·kg—1，t1/2=1.195 h, AUC(0～∞)=30.78 mg·L—1·h—1。结论该方法具有准确、简便、快速的特点,可用于秦艽中龙胆苦苷的检测。
【关键词】 龙胆苦苷； 高效液相色谱法； 血药浓度； 药动学。
秦艽作为一种常用的传统中药,野生品种早已不能满足临床需要，栽培秦艽开发利用尚处于起步阶段，对其的研究多见于化学成分及药效学方面，少有对药动学的研究。有报道龙胆苦苷在Beagle犬体内的药动学过程表现为静脉内给药一房室模型［1］;大鼠灌胃给予含龙胆苦苷药物后［2］；用HPLC法测定龙胆苦苷呈静脉外给药的二房室模型。龙胆苦苷是裂环烯醚萜苷类化合物，极性大，吸收较少，静脉外给药其血药浓度均较低。为此本实验选择兔耳静脉注射秦艽水煎醇沉液，用HPLC法定量测定家兔体内龙胆苦苷的药动学过程。
1 材料与仪器。
1.1 药品三年生栽培秦艽采于宁夏六盘山药材栽培基地(由宁夏六盘山药材栽培基地张守宗高级农艺师提供)，经宁夏药检所邢世瑞主任药师鉴定原植物为秦艽Gentiana macrophylla Pall.的生药材；按中药制剂药理学实验的常规制备方法制备秦艽水煎醇沉液1.0 g/ml（以生药计），于冰箱内冷藏保存。
1.2 试剂与药物龙胆苦苷对照品（中国药品生物制品检测定所，批号：770—200105）。乙腈、甲醇（美国TEDIA，色谱纯），水为去离子水，其余试剂均为分析纯。
1.3 仪器日本岛津LC—20A系列高效液相色谱仪(包括LC—20AT输液泵、DGU—20A5在线、脱气机、SPD—20AV紫外检测器、SCL—20Avp系统控制器、LC—solution色谱工作站)。Explorer电子分析天平(Ohaus Corporation，美国)；UV—2550 型紫外可见分光光度计(日本岛津公司)；高速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）。