HPLC测定盐酸异丙嗪糖浆中盐酸异丙嗪的含量
作者：彭芳玲，阳利龙，龙荣，胡勤。
【摘要】 目的：建立高效液相色谱法测定盐酸异丙嗪的含量。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶（4.6 mm×150 mm，5 μm）为色谱柱，以0.5%三乙醇胺溶液（用磷酸调pH至2.5）∶乙腈（65∶35 v/v）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为249 nm。结果：盐酸异丙嗪在 22.8～68.4 μg/mL（r=0.9999）范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为99.97%，RSD为0.45%。结论：本测定方法简便、快速、准确，重复性好，可以有效控制盐酸异丙嗪糖浆的含量。
【关键词】 高效液相色谱法；盐酸异丙嗪糖浆；盐酸异丙嗪；含量测定。
［Abstract］ Objective: To establish an HPLC method for determination of promethazine hydrochloride in promethazine hydrochloride syrup. Methods: The chromatographic conditions were a Hypersil BDSC18 column (4.6 mm×150 mm, 5 μm), 0.5% Triethanolamine (with H3PO4 to adjust pH 2.5)∶acetonitrile (65∶35 v/v) as the mobile phase, a flow rate at 1.0 mL/min and a wavelength of 249 nm used for detection. Results: The peak area of promethazine hydrochloride showed a good linearity in the range of 22.8～68.4 μg/mL (r=0.9999). The average recovery was 99.97%, RSD= 0.45% (n=6). Conclusions: This method was simple and fast and reproducible, and it can be used for quality control of promethazine Hydrochloride syrup.
［Key words］ HPLC; Promethazine hydrochloride syrup; Promethazine hydrochloride; Determination。
盐酸异丙嗪是常用的组胺H1受体拮抗剂，具有明显的抗过敏和镇静作用，因其不良反应小，临床应用广泛。本院自制的盐酸异丙嗪糖浆应用于临床多年，主要用于小儿支气管过敏及上呼吸道感染引起的咳嗽。盐酸异丙嗪属于吩噻嗪类药物，结构中的硫易氧化变色，配制成的糖浆在室温条件下仅能维持6 d［1］，因此，我们在自拟处方中加入了抗氧化剂，为了区分同类产品，防止在调配过程中发生差错，加入了适量色素亮兰。在一定的条件下，未被氧化的硫与金属离子形成有色配位化合物，采用紫外分光光度法测定其含量［23］，由于加入了色素亮兰和羟苯乙酯，影响其结果，改用HPLC测定其含量，经过多次试验可消除单糖浆、抗氧剂、色素等的干扰，且方法快速、准确、灵敏，可以用于该制剂的质量控制。
1 仪器与试剂。
1.1 仪器。
Agilent 1100高效液相色谱议（G1311A四元泵，G131A自动进样器，G131A柱温箱，G1311A检测器，Chemstations工作站），BS210S型电子天平（德国赛多利斯股份公司）。
1.2 试剂。
盐酸异丙嗪对照品（中国药品生物制品检定所），甲醇为色谱纯（天津科密欧化学试剂有限公司），水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯，盐酸异丙嗪糖浆（自制），其他辅料均符合《中国药典》（二部）2005版的规定。
1.3 处方。
盐酸异丙嗪2.0 g，亚硫酸氢钠、羟苯乙酯、单糖浆、桔子香精、亮兰适量，纯化水加至1 000 mL。
2 方法与结果。
2.1 色谱条件。
色谱柱（大连依利特）：Hypersil BDS C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），柱温30 ℃；流动相：0.5%三乙醇胺溶液（用磷酸调pH至2.5）∶乙腈（65∶35 v/v）；流速：1.0 mL/min，检测波长249 nm［4］；进样量10 μL；定量方法为外标法。
精密称取经105 ℃干燥至恒重的盐酸异丙嗪对照品11.4 mg置100 mL棕色容量瓶中加水溶解至刻度，摇匀，配成0.114 mg/mL的贮备液，用0.45 μm的微孔滤膜过滤，滤液放于冰箱内（2～8 ℃）保存备用。
2.3 空白样品的制备。
按处方比例配制不含盐酸异丙嗪的空白溶液，用0.45 μm的微孔滤膜过滤，滤液放于冰箱内（2～8 ℃）保存备用。
2.4 供试品溶液的制备。
精取盐酸异丙嗪糖浆2 mL置100 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，用0.45 μm的微孔滤膜过滤，滤液放于冰箱内（2～8 ℃）保存备用。
2.5 空白干扰试验。
在上述色谱条件下，分别进样盐酸异丙嗪对照品（22.8 μg/mL）和盐酸异丙嗪供试品溶液及空白样品各10 μL，盐酸异丙嗪保留时间6.15 min，盐酸异丙嗪峰形尖锐对称，并能与制剂中辅料的色谱峰很好分离，见图1。
2.6 标准曲线的制备。
精密称取“2.2”的贮备液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL分别置10 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件进样10 μL测定，以盐酸异丙嗪峰面积（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制成标准曲线，得回归方程为A=41.7162C+50.59（r=0.9999），盐酸异丙嗪在22.8～68.4 μg/mL范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系。