氨苄西林与红霉素联用的体外抑菌实验研究

【摘要】 目的：研究繁殖期杀菌剂和抑菌剂联用的可能性，降低细菌内毒素的释放量，改善临床感染症状。方法:采用微生物井式扩散法，在无菌条件下，用藤黄八叠球菌作菌悬液，氨苄西林、红霉素标准品为模型药物，测定两者合用后的抑菌圈。结果:两种抗生素联用后的抑菌圈与氨苄西林单用的抑菌圈相当（P0.05）。结论:抑菌剂与繁殖期杀菌剂联用并不降低繁殖期杀菌剂的杀菌效能，联用时应以同时合用或杀菌剂后使用抑菌剂为宜。

【关键词】 氨苄西林，红霉素，抑菌圈，藤黄八叠球菌。

繁殖期杀菌剂在杀灭细菌的同时会引起内毒素大量释放，导致临床症状加剧［1］。繁殖期杀菌剂和抑菌剂联用历来被认为是抗生素的不合理用药［2］，原因是抑菌剂抑制细菌的生长无法使繁殖期杀菌剂起到杀菌作用，从而使联用失去意义。繁殖期杀菌剂主要是β内酰胺类抗生素，包括青霉素类和头孢菌素类，发挥抗菌作用时与细胞外膜上的青霉素结合蛋白结合，细胞壁合成受阻，最后细菌破裂死亡。抑菌剂主要是大环内酯类，其抗菌机制是抑制细菌蛋白质合成致细菌死亡。到目前为止，尚未见有实验研究证明繁殖期杀菌剂和抑菌剂联用不合理。

1 材料。

氨苄西林标准品（甘肃省药品检验所，4109402），红霉素标准品（甘肃省药品检验所，1303072001 14），10 μL微量进样器（上海医用激光仪器厂），隔水式电热恒温培养箱（上海医疗器械七厂），藤黄八叠球菌（甘肃省药品检验所，28001）。

2 方法。

2.1 Ⅱ号培养基及灭菌缓冲液（pH=6.8）的制备［3］。

2.2 菌悬液的制备［4］ 取已分离出的单个菌落接种于试管斜面上，在30 ℃恒温箱培养24 h。取上述菌种，分别接种于2个扁瓶斜面上，置30 ℃恒温箱培养，一斜面培养24 h（代表生长期相同组)；另一斜面分别间隔6 h接种2次培养至24 h（代表生长期不同组)；各用100 mL灭菌缓冲液将已培养好的斜面菌苔洗下，备用。

2.3 菌碟的制备［4］。

将Ⅱ号培养基适量加热融化后，冷至50 ℃左右，在无菌条件下加入细菌悬液适量（1%，菌悬液体积×100/培养基体积%），摇匀后趁热吸取18 mL注入水平台上的玻璃培养皿（Ф=9 cm）中，待冷凝后用角膜环钻（Ф=3 mm）在同一圆周上打若干个孔, 孔距适当, 倒置备用。

2.4 标准溶液的制备。

精密称取标准品适量，用灭菌水溶解制备贮备液（100 μg/mL)，取贮备液适量用水稀释至红霉素为2 μg/mL、4 μg/mL；氨苄西林为0.5 μg/mL、1.0 μg/mL浓度备用。取4 μg/mL 红霉素、1.0 μg/mL 氨苄西林各1 mL混合使红霉素的浓度为2 μg/mL，氨苄西林的浓度为0.5 μg/mL（混合液）。

2.5 实验方法［5］。

无菌条件下在菌碟孔中分别点样，点样量为10 μL，平行实验菌碟为6 个，置恒温箱中（30 ℃）培养16～18 h后取出，用游标卡尺测量抑菌圈直径。

2.5.1 氨苄西林与红霉素联用对生长期相同细菌的影响 依“2.2”、“2.3”制备两种细菌悬液和菌碟，每碟打四个孔，分别注入10 μL灭菌水、2 μg/mL 红霉素、0.5 μg/mL氨苄西林及混合液，依“2.5”法试验。