黄芪皂苷和黄芪多糖对大鼠肾脏系膜细胞增殖的影响
作者：房信胜 穆象山 周红英 王建华 谭晓梅。
【摘要】 目的观察黄芪皂苷和黄芪多糖对体外培养的肾脏系膜细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠肾脏系膜细胞，用MTT法研究不同浓度的皂苷和多糖对细胞增殖的影响，并计算抑制率。结果黄芪多糖在低浓度时表现出一定的促进细胞增殖作用，在高浓度时有一定的抑制作用；黄芪皂苷在所考察的范围内均表现出一定的抑制作用。结论黄芪皂苷和黄芪多糖在一定浓度时对肾脏系膜细胞增殖具有一定的抑制作用，为其在治疗肾小球肾炎中的作用提供了理论依据。
Abstract：ObjectiveTo study the effect of Astragalosides and Astragalus Polysaccharide on the proliferation of glomeruli mesangial cells(GMCs). MethodsExtract and culture GMCs from SD rats,then study the effect of different density of Astragalosides and Astragalus Polysaccharide on the proliferation of GMCs by MTT assay, and calculate the inhibitory rate. ResultsAstragalus Polysaccharide could stimulate the cells to reproduce in low density, and had inhibitory activity in high density. Astragalosides show some inhibitory activity in the density investigated. Conclusion Astragalosides and Astragalus Polysaccharide can inhibit proliferation of GMCs.
Key words：Astragalosides； Astragalus Polysaccharide； Glomeruli mesangial cells； Proliferation。
慢性肾炎在现代医学中治疗困难，而中医根据辨证论治表现出了一定优势。在中医应用处方中，黄芪使用频率很高，并且临床和实验研究都表明黄芪疗效确切，具有多方面的药理作用。现代研究表明，肾脏系膜细胞（GMsC）是肾小球肾炎发生发展过程中的主要靶细胞［1，2］，是肾小球肾炎发生、发展及肾小球硬化的重要病理基础［3，4］，因此抑制系膜细胞增生是治疗该类疾病的重要途径。本实验用体外培养的肾脏系膜细胞，研究黄芪皂苷和多糖是否通过抑制肾脏系膜细胞增殖而对肾炎起到治疗作用。
1 器材。
1.1 试剂。
胎牛血清（杭州四季青公司），RPMI1640营养液，IV型胶原酶，胰蛋白酶（均为 Gibco 公司产品），结蛋白、肌动蛋白和角蛋白， 噻唑蓝(MTT)，二甲基亚砜（均为Sigma 公司产品），胰岛素（江苏万邦医药公司）。
1.2 仪器。
96孔培养板(Corning Incorporated)；CO2培养箱 (Kendro Laboratory Products)；倒置显微镜 (Olympus Japan)；超净工作台（苏净集团安泰公司）；酶标仪（BIO—RAD，USA）。
1.3 动物。
SD大鼠，雄性，150～180 g。
1.4 药物。
黄芪皂苷，黄芪多糖，实验室自制，比色法测定含量，均为80%以上。
1.5 试剂及药物配制。
1.5.1 Ⅰ号溶液RPMI1640营养液+L—谷氨酰胺（30 mg·ml—1）+丙酮酸钠（2 mmol·L—1）+HEPES液（15 mmol·L—1）+青霉素、链霉素（各100 U·L—1），用0.22 μm微孔滤膜滤过备用。
1.5.2 Ⅱ号溶液(培养液)在Ⅰ号溶液中加入灭活胎牛血清使含量达20%；加入胰岛素使含量达0.66 U·ml—1。
1.5.3 酶胰蛋白酶：用RPMI1640营养液配成0.25%的溶液备用；IV型胶原酶：用RPMI1640营养液配成1 000 U·ml—1的溶液备用。
1.5.4 药物溶液配制取黄芪皂苷和黄芪多糖适量，分别用RPMI1640营养液溶解，0.45 μm微孔滤膜滤过，适当稀释后均配成1，10，100，500，1 000 μg·ml—1的溶液，用前过0.22 μm微孔滤膜除菌。