婴幼儿支气管炎中药外洗液传统煎煮与配方颗粒组方中芍药苷的含量
摘要：目的比较婴幼儿支气管炎中药外洗液传统煎煮与2种配方颗粒组方中芍药苷的含量。
方法采用高效液相色谱法（HPLC）对传统煎煮的幼儿支气管炎中药外洗液、农本方配方颗粒及江阴中药配方颗粒组方的洗剂中的主要成分芍药苷进行含量测定。
色谱柱为Inertsil ODS—3，流动相为乙腈—01%磷酸溶液（14：86），流速为10ml/min，检测波长为230nm。
结果芍药苷在进样浓度1025～1025μg/ml范围内线形关系良好（r=09996）。
加样回收率为9957%（RSD=156%）；婴幼儿支气管炎中药外洗液传统饮片洗剂、农本方颗粒洗剂、江阴配方颗粒洗剂中芍药苷含量分别为10310，08679，08056mg/ml。
结论婴幼儿支气管炎中药外洗液传统饮片汤剂与配方颗粒中的芍药苷含量有差异。
毕业论文网 关键词：婴幼儿支气管炎中药外洗液；传统煎煮；农本方中药配方颗粒；江阴中药配方颗粒；芍药苷 【Abstract】Objective： To compare paeoniflorin content in traditional decoction of TCM and two formula granule prescriptions for infant bronchitis Methods： HPLC was used to determine paeoniflorin content in TCM external lotion and in two formula granule prescriptions of Nongbenfang and Jiangyin The chromatographic column was Inertsil ODS—3 The mobile phase was acetonitrile—01% phosphoric acid solution （14：86） The flow rate was 10ml/min and the detection wavelength was 230nm Results： Paeoniflorin had a good linear relationship at the range of 1025 to 1025μg/ml （r=09996） The recovery rate was 9957% （RSD=156%） The content of paeoniflorin in Jiangyin formula granule was 10310， 08679 and 08056 Mg/ml Conclusion： The content of paeoniflorin in traditional decoction and in formula granule prescriptions for bronchitis infants is different 【Key words】external lotion of bronchitis infant， traditional decoction， Nongbenfang TCM formula granule， Jiangyin TCM formula granules， paeoniflorin 国家发明专利“婴幼儿支气管炎中药外洗液”（专利号为ZL201210351735X）源于我院吴曙粤主任医师的经验方，是由麻黄、白芍、石膏、桔梗、枳壳等18味中药的水煎液浓缩制备而成的外用洗剂。
临床上使用外洗液泡浴支?夤苎子び锥?，并联合抗感染及对症治疗等，取得良好治疗效果[1，2]。
现我院使用婴幼儿支气管炎中药外洗液主要有2种方式，一是用传统中药饮片水煎浓缩而成瓶装洗液（简称饮片洗液）稀释外洗，二是用按处方量调剂的中药配方颗粒温开水冲化外洗。
我院使用是香港集团附属培力（南宁）药业有限公司（简称农本方配方颗粒）和江阴天江药业有限公司（简称江阴配方颗粒）两个厂家的配方颗粒。
相对传统饮片，配方颗粒有使用方便、加减灵活、有效成分可控的优势，但其与传统汤药煎剂的疗效是否一致一直存在争议[3]。
为此，通常通过测定和比较饮片与配方颗粒中有效成分含量来评价两者质量的优劣[4，5]。
芍药是婴幼儿支气管炎中药外洗液中的君药之一，芍药苷是芍药的有效成分[6]。
笔者使用高效液相色谱法（HPLC）来测定用传统饮片煎煮与2个厂家配方颗粒组方的婴幼儿支气管炎中药外洗液主要有效成分芍药苷的含量，来比较3种洗剂的质量差异。
现报道如下。
1仪器与试药 11仪器LC—10A高效液相色谱仪（UV—10A紫外检测器、威玛龙色谱工作站，日本岛津）；CP225D电子分析天平（德国赛多利斯股份公司） 12试剂芍药苷对照品（批号：110736—201136），中国药品生物制品检定所提供。
乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
13药材 131中药饮片石膏、麻黄、白芍、杏仁、茯苓、橘红、法半夏、干姜、桂枝、五味子、甘草、细辛、鱼腥草、枳壳、桔梗、当归、桃仁、仙灵脾18味饮片购自广西张益堂中药饮片厂，经南宁市第一人民医院药学部黄仕孙副主任中药师鉴定为真品。
132农本方配方颗粒与饮片同一组方18种农本方配方颗粒，由香港集团附属培力（南宁）药业有限公司提供。
133 江阴配方颗粒 与饮片同一组方18种江苏江阴配方颗粒，由江阴天江药业有限公司提供，为小袋独立包装。
2方法与结果[6，7] 21色谱条件色谱柱：Inertsil ODS—3（十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，46 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈—01%磷酸溶液（14：86）；流速：10 mL/min；检测波长：230 nm；柱温：30℃；进样量为10μl。
理论塔板数按芍药苷峰计算均在2000以上。
22溶液制备 221煎煮洗液与2种颗粒洗液煎煮洗液：按处方称取18味饮片，除鱼腥草和细辛外，将白芍、麻黄等16味中药加水浸泡1 h，加热煎煮30 min后，加入鱼腥草和细辛再煮5 min，过滤，滤取煎煮液，药渣加水再煎煮二次，每次1 h，合并三次煎煮液，滤除沉淀物，取滤液，浓缩制得药物浓度为1 g/mL的外洗液。
农本方颗粒洗液：将处方输入农本方自动配药机电脑程序中，按对应颗粒的重量称量，经混药机混合。
将混合后的颗粒用温水湿润后，加入沸水彻底溶解配制与饮片洗液相同浓度的药液。
江阴颗粒洗液：按处方称取与原药材相等量的江阴配方颗粒，全部颗粒加入沸水彻底溶解配制成与饮片洗液相同浓度的药液。
222供试品溶液精密量取以上按“221”制备的3种洗液各20 mL，置25 mL量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理30 min，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（045 μm）滤过，取续滤液，即得供试品 1（煎煮洗液）、供试品2（农本方颗粒洗液）、供试品3（江阴颗粒洗液）。
223对照品溶液精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含芍药苷60 μg的溶液，即得。
224阴性对照溶液按处方称取除白芍外石膏等17味中药，按“222”溶液制备项下的供试品1制备方法，制得缺白芍的阴性??照液。
23方法学考察阴性干扰试验 精密吸取对照品、供试品1、2、3，阴性对照样品溶液，按“21”项下色谱条件进样测定。
结果供试品溶液色谱中，在与对照品溶液相应位置上有相同保留时间的色谱峰。
在阴性对照溶液色谱中芍药苷峰相应的保留时间无吸收峰，表明处方中其它成分对测定无影响（见图1）。
线性关系考察 精密称取芍药苷对照品1025 mg，置于50 mL量瓶中，加稀乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，制成2050 μg/mL对照品溶液，备用。
分别精密吸取上述对照品溶液05、10、20、30、40、50 mL，分别置10 mL量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，进样测定。
以对照品进样浓度为横坐标（X），峰面积积分值为纵坐标（Y）绘制标准曲线，回归方程为：Y=14090X+52068，r=09996。
结果表明，芍药苷在进样浓度1025～1025 μg/mL范围内，进样浓度与芍药苷峰面积呈良好的线形关系。
精密度试验 取“223”项下对照品溶液，按“21”项下的色谱条件，连续测定6次，记录芍药苷峰面积。
结果对照品溶液中芍药苷峰面积的RSD为069%（n=6），表明仪器的精密度较好。
稳定性试验 取“222”项下供试品1（饮片洗液）适量，分别在0、4、8、12、18、24h按“21”色谱条件进行测定，记录峰面积。
结果6次测定的芍药苷峰面积的RSD为158%（n=6），试验表明，在24小时内测定稳定。
重复性试验 取“222”项下供试品1（农本方洗液）适量，按“21”色谱条件平行测定6份，记录峰面积并计算含量。
结果平均值为08679 mg/mL，RSD为117%（n=6），结果表明，本法的重现性较好。
加样回收试验 精密量取已知含量的供试品1（农本方洗液）10 mL，平行6份，置于25 mL量瓶中，精密加入芍药苷对照品溶液2050 μg/mL）40 mL，按“222”项下方法制备供试品溶液，再按“21”项下的色谱条件进样测定，计算回收率，结果见表1。
24样品含量测定分别精密吸取3种供试品溶液与对照品溶液各1 0 μL，注入液相色谱仪测定。
记录峰面积，以峰面积计算样品中芍药苷的含量，同一样品进行4 次平行试验，以4 次测得的平均值计，结果见表2。
3讨论 中药配方免煎颗粒是以传统的中药饮片为原料，经过现代加工工艺和制药技术对药材的全成分进行提取、分离、浓缩、干燥、制粒、包装等处理而得的可直接配方和冲服的颗粒剂，保留了原中药饮片的有效成分、主治和功效[8]。
与传统中药饮片值得探讨的问题在于免煎颗粒的“单味提取”和传统中药饮片的“共煎”。
[9]研究方剂的传统煎煮与配方颗粒组方中有效成分的含量高低，是评价两者质量的重要方法。
为此，本实验采用了HPLC对婴幼儿支气管炎中药外洗液中君药――白芍中的芍药苷作为主要成分指标，进行了成分对比分析，探讨中药饮片与两个不同厂家的配方颗粒制备的婴幼儿支气管炎中药外洗液质量的差异，为临床选择用药提供依据。
本实验结果表明，传统中药煎煮的婴幼儿支气管炎中药外洗液中芍药苷含量最高，农本方颗粒洗剂次之，免煎颗粒洗剂最低。
传统煎煮洗剂的芍药苷含量是农本方颗粒的11879%，是免煎颗粒的12798%，结果提示我们传统煎煮的外洗剂与配方颗粒洗剂的芍药苷含量差异大。
芍药苷含量高低可能与厂家的提取工艺有关，这也是配方颗粒使用过程中，药学人员、患者最关注的问题。
目前尚无统一的配方颗粒的质控标准，我们建议尽快建立全国统一的配方颗粒质量标准。
另外，复方的单一成分的含量高低只能从一个方面来评价传统煎煮与配方颗粒的质量差异，要对这两者全面的评价，还应从多成分以及药理实验、临床疗效综合进行观察对比。
参考文献： [1]陈 彪，钟 慧，高桂娥，等中药外洗与头孢拉定治疗婴幼儿支气管炎的经济学分析[J].中 国药房，2011，22（15）：1 411—1 413 [2]陈彪，高 桂娥，王艳宁，等中药外洗治疗婴幼儿支气管炎的疗效观察[J].广西医学，2009，31（9）：1 263 [3]麻淑磊，邹艳君，陈晓城，等补阳还五汤配方颗粒和传统饮片汤剂中盐酸川芎嗪含量的比较[J].中国中医药科技，2016，23（2）：170—171 [4]梁俊，叶正德，郑江萍甘草饮片及其配方颗粒中甘草苷和甘草酸含量比较[J].中国中医药信息杂志，2015，22（10）：91—94 [5]王晓琳，张平，郭敏牡丹皮免煎颗粒与饮片有效成分含量的差异研究[J].甘肃中医，2010，23（12）：43—44 [6]叶娟，高文远，刘新桥，等白芍配方颗粒制备工艺优化及质量控制[J].中国药房，2007，18，（9）：660—661 [7]国家药典委员会中华人民共和国药典：一部[S]2015年版北京：中国医药科技出版社，2015：320 [8]庄俊嵘，徐德生，?⒘Γ?等中药配方颗粒的优势与劣势分析[J].中国中医药信息杂志，2014，21（7）：8—10 [9]俞路宁，许筱芳，邵深深，等传统煎法中药与免煎颗粒比较[J].长春中医药大学学报，2010，26（5）：784—786。