姜黄素对家鸭脂肪肝模型肝脂与血脂的干预效果及机制研究
作者：任永丽，徐宗佩，梁汝圣，刘鹏，李玉红，苏菁。
【摘要】 目的考查姜黄素对家鸭脂肪肝模型肝脂、血脂的干预效果，并研究其作用机制。方法复制家鸭脂肪肝模型，并用姜黄素进行干预，考查肝脂、血脂、肝脂酶、肝病理变化、一般情况，并进行统计分析。结果姜黄素具有降低家鸭脂肪肝模型肝TG、血TG、体重、肝指数，改善肝组织病理的作用，其中高、中剂量组显著低于模型组（P0.01，P0.05)。姜黄素有升高家鸭脂肪肝模型肝脂酶的作用，其中高剂量组显著高于模型组（P0.05)。结论姜黄素具有降低家鸭脂肪肝模型肝脂、血脂的作用，且具有剂量依赖性。其作用机制可能与增加肝脂酶活性，促进脂质代谢，保护肝细胞有关。
【关键词】 姜黄素； 脂肪肝； 家鸭； 肝脂； 血脂； 肝脂酶pared with the model group ,high dose of curcumin could obviously increase the HL activities of model ducks,（P0.05). ConclusionCurcumin may decrease liver lipid ,serum lipid in a dose—dependent manner and the therapeutic mechanism may be related to Improving the HL activities ，increasing lipid metabolism and protecting liver cells.
Key words：Curcumin； Fatty liver； Duck； Liver lipid； Blood lipid ； HL。
天津中医药大学张伯礼院士根据中医理论和多年临床经验建立了治疗脂肪肝的经验效方“降脂清肝方”。在前期实验中已经成功地建立了家鸭脂肪肝模型，并对“降脂清肝方”全方及拆方进行了实验研究。实验结果表明“降脂清肝方”全方及拆方中姜黄、何首乌具有显著的抗脂肪肝作用。为了深入研究该方的抗脂肪肝作用，本次实验主要考查了姜黄中主要成分姜黄素对家鸭脂肪肝模型肝脂、血脂的干预效果及作用机制。现报道如下。
1 材料与仪器。
1.1 动物及分组45日龄北京鸭70只，雌雄各半，由天津市精武禽类养殖有限公司提供。采用随机列表法分为7组，每组10只，即空白对照组（空白组）；脂肪肝模型组（模型组）；姜黄素高剂量组（高剂量组）；姜黄素中剂量组（中剂量组）；姜黄素低剂量组（低剂量组）；水煎姜黄组（姜黄组）；东宝甘泰组（东宝组）；。
1.2 试剂血清总胆固醇(TC)测定试剂盒、血清甘油三酯(TG)测定试剂盒、高密度脂蛋白（HDL）试剂盒、低密度脂蛋白（LDL）试剂盒由北京中生北控生物科技股份有限公司提供；肝脂酶(HL)由南京建成生物工程研究所提供。
1.3 主要仪器200型半自动生化分析仪，荷兰威图；超速低温离心机，德国贝克曼；JJ2000型精密电子天平，常熟双杰测试仪器厂；友声ACS—A型电子秤，上海申衡电子有限公司制造；鸭填饲机，北京市泽恩德平科技开发有限责任公司；722RS型分光光度计，上海第二分析仪器厂。
2 方法。
2.1 用药及造模方法。
采用标准动物的等效剂量折算系数法［1］参照家兔系数确定给药剂量。以成人等效剂量2倍作为姜黄素低剂量，4倍为中剂量，8倍为高剂量，姜黄和东宝肝泰剂量均为等效剂量的2倍。如下：
姜黄素高剂量80 mg·kg—1·d—1·ig；中剂量40 mg·kg—1·d—1·ig；低剂量20 mg·kg—1·d—1·ig。由天津一方科技提供（纯度95%）。
姜黄1.4 g·kg—1·d—1·ig。由天津中医药大学研究中心提供。
东宝甘泰0.35 g·kg—1·d—1·ig，市售，通化东宝药业股份有限公司生产。产品批号：050707。
采用高糖饮食复制家鸭脂肪肝模型［2］。 造模同时每日按上述药物与剂量于餐后30 min灌胃1次，空白组、模型组给予等量蒸馏水。
2.2 检测指标。
2.2.1 一般情况观察实验期间家鸭的毛发、形态、进食、粪便及死亡情况。
2.2.2 体重实验开始前（0 d），7 d，14 d，21 d，28 d称量各组家鸭体重。
2.2.3 肝指数实验结束（28 d），剖腹取肝称重，计算肝指数(肝指数=肝湿重/体重×100%)。
2.2.4 肝脏TG，TC取肝右叶同一部位0.3 g肝组织，用无水乙醇∶丙酮（1∶1）制成10%匀浆液抽提脂质，4℃，3 000 r/min离心10 min，静置48 h后，取上清液用半自动生化分析仪测定TG，TC含量。
2.2.5 血清TG，TC，HDL，LDL实验结束，停止供食供水12 h，颈静脉取血,据试剂盒说明检测TG，TC，HDL，LDL。
2.2.6 肝脂酶(HL)活性取肝右叶同一部位0.3 g肝组织，用生理盐水制成10%匀浆液，4℃，2 500 r/min离心10 min，取上清液0.05 ml按试剂盒操作表进行检测，同时应用考马斯亮蓝法检测匀浆上清液蛋白含量，并依据公式计算出HL的活性。
2.2.7 肝脏的病理学改变实验四周末剪断颈静脉放血处死，迅速剖腹，去除网膜及附属组织，取出完整的肝脏，首先进行肉眼观察其颜色、形态。
再取肝右叶相同部位肝组织2 cm×2 cm×0.3 mm做病理标本，所有标本均用10%中性甲醛液固定，石蜡包埋，连续切片，HE染色，光镜下评估肝脂肪变性程度。判断标准按照脂变细胞占肝细胞的比例进行脂变程度分级［3］。见表1。表1 肝细胞脂肪变性程度判断标准。
2.3 统计学处理用Spss11.5软件包进行统计学处理，数据用±s 表示，计量资料比较用方差分析（ONE— WAY ANOVA）；计数资料比较用非参数检验（Nonparametric Tests）。
3 结果。
3.1 一般情况空白组家鸭毛发光泽，体态活泼，反应敏捷，食量、排泄物均正常，无死亡情况；模型组毛色欠光泽，活动明显减少，个别家鸭见青绿色粪便；姜黄素各组以及姜黄组、东宝组各种外在表现均优于模型组。
3.2 体重实验初始，各组家鸭体重无显著差异（P0.05）；实验期间，各组体重均直线升高。实验第21天时，模型组体重3.79 kg，显著高于空白组3.64 kg，P0.05；给药组高，中剂量组为3.62，3.64 kg，显著低于模型组3.79，P0.05。实验第28天时，体重变化规律同21 d时。见表2。表2 各组家鸭体重的比较与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05；n=10。