益智方对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响
作者：高丽萍，伊朝晖， 柴锡庆， 程书玲， 李贞。
【摘要】 目的探讨益智方对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆能力的影响。方法在基础饲料中添加三氯化铝，Al3+剂量为111.9 mg/kg体重，连续染毒3个月复制大鼠AD模型。采用Y—电迷宫仪检测正常对照组、模型组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组大鼠学习记忆能力，观察脑区病理形态学改变。结果益智方能明显增加大鼠逃避正确率、缩短逃避潜伏期，明显减轻大鼠脑神经元损伤。结论益智方是防治AD模型大鼠学习记忆能力减退的有效药物。
老年性痴呆是一种多病因参与的神经退行性疾病,伴随着老年人口的增加，老年性痴呆的发病率也在增加，其中以阿尔茨海默病（Alzheimer AD)较为多见。本病病因复杂，目前尚缺乏有效的防治药物与手段。根据中医肾藏精、通脑、主智理论，本研究采用氯化铝制作大鼠AD模型，探讨了自拟益智方对大鼠学习记忆能力的影响。
1 材料与仪器。
AlCl3·6H2O，分析纯，天津双船化学试剂厂产品；水合氯醛 分析纯，天津市华东试剂厂产品；多聚甲醛，化学纯，中国医药集团上海试剂化学公司产品。
中药复方组份：淫羊藿、熟地、黄芪等组成，由河北省石家庄医药公司提供，生药经河北医科大学药学院生药教研室鉴定均为纯品。按传统方法将中药浸浴1 h，文火煎两次，去渣，合并、浓缩，每毫升生药含量为2.7 g，4℃冰箱保存，用前巴氏消毒。
MG—2 型Y—电迷宫仪，张家港市生物医学仪器厂生产；OA切片机 Lukar—2135; 全自动纤维摄像系统 New Vanox。
2 方法。
2.1 动物分组与处理选用北京医科大学实验动物中心提供的体重（350±20）g健康3月龄SD大鼠60只(清洁级，合格证号—00—0004)，采用普通饲料适应性饲养1周后，按体重随机分为5组，每组12只，其中正常对照组喂普通饲料，模型组及低、中、高剂量3个中药组在普通饲料的基础上，按体重8%的进食量添加AlCl3·6H2O，剂量为：111.9 mg/kg体重，饲喂添加AlCl3·6H2O饲料当天起，3个中药组用中药煎剂灌胃，用量为：低剂量中药组10.8 g·kg—1·d—1、中剂量中药组21.6 g·kg—1·d—1，高剂量中药组30.4 g/kg/天，模型组、对照组大鼠每日灌服等量温开水。动物自由饮水，动物房温度（20±2）℃，第90天，采用Y—电迷宫仪训练和测定大鼠学习记忆能力。
2.2 学习记忆能力测试 参照郭宗君方法［1］，在夜晚安静和避光的条件下，用Ｙ型电迷宫仪训练和测试大鼠的学习记忆能力。大鼠首先在Ｙ型电迷宫仪的安全臂灯源处停留适应1 min，然后给予电刺激（电压90 V，持续1 s），当大鼠逃避到新的安全臂灯源处时，让大鼠在该处休息适应1 min, 顺时针依次将通电臂换为安全臂，连续训练和测定4 d，每天10次/只，记录每只大鼠逃避正确率，受电刺激后，大鼠从通电臂灯源处直接逃至安全臂灯源处为正确逃避，所用时间为逃避潜伏期，如果电刺激后，大鼠不出现逃避或逃避到安全臂的非灯源处停留，且对敲击声没有做出正确反应的为逃避错误，其潜伏期记为10 s, 逃避正确率越高，逃避潜伏期越短，说明学习记忆能力越好。
2.3 脑区病理形态学检查行为实验测试结束后，从每组随机抓取4只大鼠，采用4%水合氯醛按1 ml/100 g 体重腹腔注射，麻醉后固定大鼠，从大鼠胸骨剑突处开胸，经左心室插管至主动脉，快速灌注0.01 mol/L的冷生理盐水100 ml冲洗血液，之后用4%多聚甲醛500 ml灌注，取脑组织后立刻固定于4%多聚甲醛中，常规石蜡切片，HE染色，观察脑组织形态改变。
2.4 数据处理实验结果采用SPSS10.0统计软件对数据进行统计分析。