蝉拟青霉对小菜蛾致病性的研究
结表明株蝉拟青霉分生孢子、菌丝对菜蛾致病性有定差异,其GZXR6感染致死效,孢子悬液致死率可达到70%,菌丝悬液致死率可达到65%,将蝉拟青霉作类重要生防真菌提供了参考数据。
关键词蝉拟青霉;菜蛾;致病性图分类 76 献标识码编 0075739(009)503690gllll xlll XgL g(llg L ,Gz vr,Gg Gz 55005)br vg g l () lll xlll(L), l rl r r rl r r gr r g g l rl GZXR6, rl r 70% 65% rl rv rr r l brl gK rl ;lll xlll;g蝉拟青霉(l )又名蝉花,是由子囊菌类麦角菌科真菌蝉草(r )子实体及其寄主山蝉(l)幼虫虫体部构成[]。
拟青霉属真菌作类重要生防真菌可以侵染多种害虫,产生多种具有生物活性代谢产物,害虫生物防治上有着广泛应用[]。
蝉拟青霉既是名贵药,又有较高致病性,可以寄生鳞翅目(Lr)、膜翅目(r)很多昆虫[3]。
菜蛾(lll xlll(L))属鳞翅目菜蛾科,我国南、北方有分布,危害植物多达0种以上,也是热带和亚热带十花科蔬菜重要害虫[]。
对菜蛾防治起初采用化学农药,随着其对化学农药耐药性增加以及农药残留毒性等弊端日益凸显,生物防治成当今研究热[5]。
现报道株蝉拟青霉对菜蛾致病性,将蝉拟青霉作类重要生防真菌提供参考数据,有定应用价值。
材与方法试验材供试菌株。
蝉拟青霉(l )共株GZXR6采贵州省贵阳市森林公,GZXR 78采贵州省梵净山,GZXR376采四川省成都市青城山,GZXR606采云南省墨江,以上菌株由贵州学真菌研究所分离、鉴定、保存。
试验试虫。
供试菜蛾由贵州省农科院植保所提供。
3培养基。
①培养基马铃薯00g切块,用水煮沸30,加蔗糖0g、琼脂0g、水补足 000L,值然。
②液体培养基[6]葡萄糖0g,酵母膏5g,K g,水补足 000L,值65。
试验方法菌培养。
①斜面培养将株菌分别接种到试管斜面上,5℃恒温培养7,备用。
③液体种子培养用接种环将已活化试管斜面菌种接种到装有50L液体培养基50L三角瓶,5℃,50r,摇床振荡培养8～0。
④液体发酵培养将种子培养液按5%接种量接种到装有50L液体培养基50L三角瓶,5℃,50r,摇床振荡培养7～96。
杀虫制剂准备。
①孢子悬液培养平板菌落上倒入适量005%土温80溶液,用接种环轻轻刮下孢子,充分振荡用层纱布滤入无菌三角瓶,调整孢子浓×07L、×07L、3×07L,备用。
②菌丝悬液将摇瓶培养菌丝用无菌水洗涤除发酵液,用玻璃匀浆器破碎细胞,无菌水稀释备用,稀释倍数(∶v)倍、倍、5倍。
3致病性测定。
参照安建梅[7]、陈祝安等[8]方法,直径5培养皿放入圆形滤纸,灭菌、冷却,将菜蛾～3龄幼虫分别浸配待测溶液。
每浓处理0头虫,浸渍0～0放入培养皿,饲喂新鲜甘蓝菜叶片,放0～5℃室温下饲养,每天更换新鲜甘蓝菜叶片,并培养皿放湿棉球以保持高湿,逐日统计感染死亡率。
以无菌水对照,设3重复。
致死率试验组死亡率对照组死亡率。
结与分析 感染症状试验程,菜蛾感染了蝉拟青霉～长得很慢,而对照长得很快,可见菌液对菜蛾有抑制生长作用。
处理～7虫体僵硬,出现死亡高峰,继续培养～ ,虫体被白色菌丝覆盖,无孢梗束形成,对感染菜蛾进行粘片显微观察,可见蝉拟青霉菌丝形成产孢结构和分生孢子。
株蝉拟青霉菌丝悬液对菜蛾致病性差异由表可看出,不浓株蝉拟青霉菌丝悬液对菜蛾都有致病作用,浓越高,致病性越强。
3株蝉拟青霉孢子悬液对菜蛾致病性差异由表可看出,不浓株蝉拟青霉孢子悬液对菜蛾都有致病作用,浓越高,致病性越强。
3结论与讨论()对菜蛾致病性测定结显示,株蝉拟青霉菌株对菜蛾都有致病作用,浓越高,致病性越强。
通对蝉拟青霉孢子悬液、菌丝悬液致病性测定表明,孢子悬液致病能力略高菌丝悬液,其GZXR6孢子悬液对菜蛾高致死率可达到70%,菌丝悬液高致死率可达到65%。
由说明,孢子悬液致病能力高菌丝悬液,株蝉拟GZXR6致病性强。
()昆虫病原真菌通体表接触即能使寄主感染、发病并引起寄主昆虫死亡,可以发挥独到作用[5]。
对感染菜蛾进行粘片显微观察,结显示芽孢结构是蝉拟青霉;孢子悬液致病原因可能孢子萌发芽管侵入虫体表使虫致死。
(3)昆虫病原真菌昆虫病原微生物种类多,约占昆虫病原微生物种类60%以上。
温室栽培业蓬勃发展今天,研究利用昆虫病原真菌已成害虫微生物防治研究领域热。
有关菜蛾致病性研究方面,目前仅有少量关白僵菌、绿僵菌和拟青霉等研究报道[9,0];对蝉拟青霉研究主要集药用方面,生物防治方面研究不多,研究表明,蝉拟青霉作生防试剂有良开发应用前景,有待进步深入研究。
参考献[] 陈祝安,刘广玉,胡菽英蝉花人工培养及其药理作用研究[]真菌学报,993,()38[] 陈祝安虫生真菌蝉拟青霉研究[]真菌学报,99,0()8087[3] 邹晓,刘爱英,梁宗琦紫外线诱变蝉拟青霉对白粉虱治病性影响[]菌物研究,00,()3539[] 黄剑,吴君菜蛾抗药性研究进展[]贵州学学报(然科学版),003,0()970[5] 韩燕峰,张延威,梁建东,等些拟青霉菌株对菜蛾致病性初步研究[]植物保护,008,3()69[6] ,LG ZGQ,L Grgl xr lr l []rl zg grlrl vr,00,3()3335[7] 安建梅虫生真菌粉质拟青霉对黄刺蛾幼虫致病性研究[]山西农业学学报,000()0507[8] 陈祝安,黄基荣,许益伟,等蝉拟青霉防治菜粉蝶幼虫试验[]生物防治通报,990,6(3)333[9] 马骏,L , ,等球孢白僵菌对菜蛾致病力测定[]湖南农业学学报,999,5(5)38739[0] 姚丽娟几株真菌代谢产物对菜蛾和菜青虫杀虫效[]国生物防治,996,(3)990