腹膜腔灌洗对重症急性胰腺炎兔血浆细胞因子的影响

作者:沈新江 冯文明 鲍鹰 朱鸣。

【关键词】 腹膜腔。

重症急性胰腺炎(SAP)早期促炎因子过度释放破坏了促抗炎因子的平衡,造成全身炎症反应综合征(SIRS)[1],调控细胞因子的生成、降低细胞因子水平成为SAP治疗中的重要课题之一。腹膜灌洗具有清除中、大分子物质的能力,已有临床运用证实腹膜灌洗对SAP有良好的治疗作用[2,3]。作者自2004年7至8月通过腹膜灌洗治疗SAP兔,了解其对血浆中的肿瘤坏死因子(TNF—a)及白细胞介素10(IL—10)水平的影响。

1 材料和方法。

1.1 动物及分组 实验动物采用健康新西兰大白兔,重2420~2860g,雌雄不拘,由浙江大学实验动物中心提供。牛磺胆酸钠标准品购于sigma公司。

实验兔随机分为3组,SAP非腹膜灌洗(NPL)组10只,腹膜灌洗(PL)组14只,另取10只作为对照组(C组)。C组和NPL组不进行任何治疗,仅作麻醉后开腹,翻动十二指肠。PL组在建模成功后马上行腹膜灌洗治疗2h,腹透液为1.5%的葡萄糖液。

1.2 重症急性胰腺炎模型的建立 以兔耳缘静脉注射硫贲妥钠(15mg/kg)麻醉。动物固定后行左颈外静脉置管作采血用,无菌下上腹正中切口进腹,十二指肠升部切开、找到主胰管开口,插入硅胶导管逆行注射5%牛磺胆酸钠液(1ml/kg),持续5min,观察胰腺在10min内出现明显的充血、出血和水肿改变,证实建模成功。小网膜囊内和盆底各置一橡胶管作腹膜灌洗用,前者作为腹透液的进路,后者作为出路。

1.3 腹膜灌洗设备及技术指标 采用百特公司双联系统进行腹膜灌洗,先用温生理盐水约30 ml腹腔冲洗,腹透液(15ml/kg)在腹腔内停留1h,腹膜灌洗共进行2h。

1.4 标本采取 3组均于建模前、建模后1、2、6和24h分别从左颈外静脉置管内采血3ml,在常温下无菌试管内静置30min后,在4℃下1500rpm离心10min,血清于—80℃保存待检。各组观察术后死亡时间。

1.5 检测指标及方法 分别用放免法测定各组及时间点的血浆TNF—a和IL—10含量。放免药盒购自解放军总医院科技开发中心放免所,严格按产品说明书操作步骤进行。

1.6 统计学方法 实验数据采用均数±标准差(x±s)表示,同一时段组间比较采用F检验和q检验。

2 结果。

3.1 预后 24h内C组无死亡,NPL组有4只死亡(分别死于建模后7、13、16和16.5h),PL组1只死于术后21h。

3.2 血浆TNF—a水平 建模后24h NPL组血浆TNF—a升至(827.3±20.8)ng/L,PL组升至 (510.1±29.6) ng/L,C组为(91.7±9.5) ng/L ,NPL和PL组各时点值均高于C组(P0.01),NPL组各时点的值均比PL组高(P0.01)。见表1。

3.3 血浆IL—10水平 建模后2组血浆IL—10均明显升高,建模24h NPL组IL—10升至(357.7±67.2) ng/L,PL组升至(438.8±36.8)ng/L,C组升至(18.4±5.8) ng/L,术后2hPL组、NPL组水平明显高于C组(P0.01),NPL组建模2h后的IL—10水平明显低于PL组(P0.05~0.01)。见表2。

3.4 IL—10/TNF—a的比值 建模后2h NPL组IL—10/TNF—a的比值为(0.4509±0.0900)、24h为(0.4402±0.1094), 建模后2h PL组IL—10/TNF—a的比值为(1.1482±0.2257)、24h为(0.8621±0.0810),C组2h IL—10/TNF—a的比值为(0.2048±0.0417)、24h为(0.2003±0.0378),手术2h后PL组各时段比值均高于C组(P0.01),手术6hNPL组的比值高于C组(P0.01),建模2h后 NPL组各时点的比值均明显小于PL组(P0.05~0.01)。见表3。

表1 3组各时段血浆TNF—a水平(略)。

注: #q检验 PL组 vs NPL组P0.01,*PL组 vs C组P0.01,ΔNPL组vsC组 P0.01。

表2 3组各时段血浆IL—10水平(略)。

注:q检验 PL组 vs NPL组P0.01,*PL组 vs C组P0.01,ΔNPL组 vs C组P0.01。

表3 3组各时段血浆IL—10/TNF—a水平(略)。

注:#q检验 PL组 vs NPL组P0.01,*PL组 vs C组P0.01,ΔNPL组 vs C组P0.01。

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