经轻胶囊对肝郁雌性大鼠神经递质作用的实验研究
【摘要】 目的：研究经轻胶囊治疗肝郁证大鼠的作用机制。方法：将雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、经轻胶囊组，每组10只。除正常组外的大鼠用绷带束缚大鼠四肢，外加束缚桶进行造模。观察各组大鼠一般情况、阴道脱落细胞，并用荧光分光光度法检测大鼠中枢单胺类神经递质NE、DA、5—HT的含量。结果：与正常组大鼠比较，模型组大鼠的一般情况变差，体重减轻，NE、DA的含量明显升高。与模型组比较，经轻胶囊组大鼠的一般情况明显好转，NE、DA的含量明显降低。3组大鼠之间，5—HT的含量无明显差异。结论：经轻胶囊能降低NE、DA的含量，这可能是其治疗肝郁证的作用机制。
Abstract Objective：To study the therapeutic mechanism of Jingqing capsule on female rats with depression of Liver—Qi. Methods：Female SD rats were randomly divided into normal group，model group and Jingqing capsule group（n=10）. The model rats were induced by binding up rat＇s limbs and putting them into special barrels. The general conditions，vaginal exfoliate cell were observed，the contents of neurotransmitter NE、DA and 5—HT in brain stem were detected by fluorospectrophotometry. Result: Compared with normal group，the general conditions of model group rats became worse，body weights were lightened，the contents of neurotransmitter NE、DA in brain stem were increased obviously. Compared with modle group，the general conditions of model group rats became better，the contents of NE and DA in brain stem were decreased obviously. The 5—HT content among three groups have no significant difference. Conclusion: Jingqing capsule could alleviate symptoms of female rats with depression of Liver—Qi through decreasing the contents of NE and DA.
Key words depression of Liver—Qi; rat; Jingqing capsule; experimental study。
肝藏血，主疏泄，通过调畅气机而具有调节人体情志活动的作用。肝郁证是妇女疾病的常见证候，女子从心理特点来看以肝为中心，感情脆弱，易受情志所伤，而情志伤肝多使肝的疏散宣泄功能失司导致肝郁［1］。现代医学从生物化学及内分泌角度对“肝主疏泄，调节情志”理论亦有一定解释，即人体正常的精神情志活动与中枢单胺类神经递质有密切关系，中枢神经递质的活动变化，可引起情绪、情感障碍、食欲和内分泌及睡眠障碍，同时也可引起下丘脑和垂体机能的变化，说明肝主疏泄与单胺类神经递质的合成代谢有关。基于上述理论的认识，本实验复制肝郁证动物模型，并予中药经轻胶囊以治疗。通过测定中枢单胺类神经递质的含量，来探讨肝郁导致精神情志异常的生化基础，并初步分析中药经轻胶囊防治女性情感性疾病的作用机制。
1 材料与方法。
1.1 实验材料。
1.1.1 实验动物 雌性成年未孕SD大鼠32只，（3～4）月龄，体重（210～240）g，由成都中医药大学实验动物中心提供，合格证号：川实动管质第8号。
1.1.2 药品与试剂 经轻胶囊生药煎剂：由川芎、柴胡等中药组成，成都中医药大学附属医院制剂室提供，生药浓度为2 g/mL，高温消毒后置于4 ℃冰箱保存备用，用时稀释至0.24 g/mL，动物用药剂量相当于成人剂量的6倍［2］。标准去甲肾上腺素（NE）试剂盒，由SEPVA公司提供；标准多巴胺（DA）试剂盒，由FLUKE公司提供；标准5—羟色胺（5—HT）硫酸肌酐试剂盒，由中国医药公司上海公学试剂采购站进口分装。
1.1.3 实验仪器 普通光学显微镜；电子分析天平BS210S，为德国Sartorius股份有限公司产品；FJ－2008P自动R免疫计数器（国营二六二厂）；BX50－OLYMPUS光学显微镜。
1.2 实验方法。
1.2.1 分组与造模 大鼠适应性喂养1 w后，按体重随机分为3组：正常组、模型组、经轻胶囊组。根据“怒伤肝，久则成郁”的中医理论，以“情志刺激为主”多因素进行造模。本实验在借鉴传统模型方法的基础上，参照乔明琦先生大鼠肝气郁结模型制作方法（此方法已通过山东省省级技术鉴定)进行改进，将除正常组外大鼠用医用纱布拴捆四肢，并外加束缚筒束缚，使之行走困难，正常生活能力受阻且不能摆脱，怒而不得发，形成“郁怒”［3~5］。这种非损伤性应激刺激与人类精神性(心因性)应激十分相似，较接近肝郁证的发病学因素［6］。对肝郁造模加中药组同时施予中药经轻胶囊以干预。
1.2.2 给药方法 各组大鼠每日下午灌胃1次，剂量为1 mL/100 g，连续7 d。其中正常组用蒸馏水灌胃；模型组每日下午解除束缚后用蒸馏水灌胃；经轻胶囊组每日下午解除束缚后用经轻胶囊水煎剂灌胃。
1.2.3 指标观察及检测方法。
1.2.3.1 一般观察 仔细观察各组大鼠的精神、活动、毛发、大便、体重、对外界刺激的反应能力等情况，并作出造模前后的变化对比。
1.2.3.2 阴道上皮脱落细胞角化指数的观察 适应性喂养1 w之后，每天给大鼠作阴道脱落细胞涂片，连续7 d，以观察其体内雌激素水平。观察1 w后开始造模，造模期间也每天作阴道脱落细胞涂片，以观察所做处理对阴道脱落细胞的影响，从而间接反应体内雌激素水平的变化。
1.2.3.3 大鼠脑干单胺神经递质5—HT、DA、NE含量的测定 大鼠经股动脉取血后，迅速断头处死，开颅取脑，在冰台上进行分离出脑干并称重，然后在成都中医药大学生化教研室测定5—HT、DA、NE的含量。
1.2.4 统计处理 所有实验数据均采用SPSS10.0软件进行处理，采用One—Way ANOAY进行分析。
2 结 果。
2.1 一般观察。
实验前各组大鼠发育正常，行动自如，被毛浓密有光泽，眼睛鲜红有精神，活动快速有力，粪粒正常，对外来刺激呈攻击防守态。实验后空白组除体重增加外，其他与实验前相同；模型组大鼠活动减少，被毛欠光泽，眼睛眯小、眼屎增多，精神较差，扎堆、贴边、嗅走明显，粪便稀软不成形而奇臭，对外来激惹呈躲避态；经轻胶囊组大鼠毛色尚光泽，无眼屎，精神可，动作无明显减少，粪便形质大多正常，对外来激惹有防守反应。