PCNA、p53和hTERT在子宫颈病变中的表达及意义
作者：王玉莲 方林彬 林琼燕。
【关键词】 宫颈癌；,,p53；,,hTERT。
摘要：目的：探讨PCNA、p53和hTERT在宫颈糜烂,宫颈上皮内瘤样变（CIN）及宫颈癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化技术检测宫颈糜烂22例, 宫颈上皮内瘤样变38例,宫颈癌20例中PCNA、p53和hTERT的表达。结果:PCNA、p53和hTERT在宫颈糜烂,宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌中的表达有统计学差异。结论:PCNA、p53和hTERT与宫颈癌的发生发展相关,它们的异常表达为宫颈癌的诊断提供了一定的病理学依据。
关键词： 宫颈癌； p53； hTERT。
Expression and Clinical Significance of PCNA, p53 Protein and hTERT in Cervical Lesion。
Abstract:Objective： To investigate the clinical significance and the expression of PCNA,P53 protein and hTERT in cervical lesion tissues. Method： Immunohistochemistry was used to examine the expression of PCNA,p53 protein and hTERT in 22 cervical erosion tissues and 38 cervical intraepithelial neoplasia(CIN) tissues and 20 cervical carcinoma tissues. Result： The expression of PCNA , p53 protein and hTERT showed an increasing tendency from 22 normal cervical tissues to 38 CIN tissues,then to 20 cervical carcinoma tissues. Conclusion： The expression of PCNA, p53 protein and hTERT plays an important role in the development and malignant changes of cervical carcinoma.
Key words: Cervical carcinoma; p53; hTERT。
宫颈癌是妇科肿瘤中最常见的恶性肿瘤,而宫颈癌中的一部分由宫颈糜烂,宫颈上皮内瘤样变病变发展而来,其发生发展受诸多因素的影响。端粒酶是合成及维持端粒重复序列的一种特殊核糖核酸蛋白质复合体,主要由3部分组成:人端粒酶mRNA (hTR)、端粒酶相关蛋白 (TP1)和人端粒酶逆转录酶(hTERT),其中hTERT是维持端粒酶活性最重要的成分,与端粒酶活性呈平行相关［1,2］,而端粒酶活性是癌细胞无限增殖的基础。增殖细胞核抗原(PCNA)已被证实与细胞增殖活跃和恶性程度密切相关。抑癌基因P53结构和功能的异常与大多数恶性肿瘤的发生密切相关。本研究应用免疫组化方法检测了宫颈糜烂,宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌中的PCNA、P53蛋白和hTERT的表达,以揭示端粒酶活性、P53蛋白和PCNA在子宫颈癌变发生发展中的作用,不仅有助于阐明子宫颈癌前病变、癌变的发生发展机制,且有利于临床筛选高危人群和评估癌的预后及治疗效果。
1 材料与方法。
1.1 标本来源：收集广东医学院附属医院及雷州市人民医院妇科2002年至2005年活检或手术患者病变组织块,10%甲醛液固定,常规石蜡包埋,部分标本选自病检存档蜡块,共80例,其中宫颈糜烂22例, 宫颈上皮内瘤样变38例,宫颈癌20例，均经病理学确诊。经统计学处理,各组病例的平均年龄无显著性差异。
1.2 试剂与方法：免疫组化:Ⅰ抗: PCNA鼠抗IgG(PC10),P53鼠抗IgG (DO—7),购自北京中山生物技术有限公司;Envivion二步法试剂盒购自DAKO公司。按说明书进行,以已知PCNA或P53阳性的乳腺癌组织为阳性对照,用PBS液代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判定：PCNA、p53阳性细胞为细胞核呈棕黄色颗粒,随机选5个视野低倍镜(×200)采用图像分析系统对PCNA、p53阳性细胞进行计数,将收集的数据进行整理,并由此得出阳性细胞的百分比。hTERT阳性为细胞浆中出现蓝紫色颗粒,根据子宫颈上皮细胞特点及参考钟鸣［3］等文献资料,将染色结果分为:10%计(—)即阴性,10%～40%计(+)即弱阳性,40%～70%计(++)即中阳性,70%计(+++)即强阳性。
1.4 统计学分析：检测结果用SPSS11.00软件进行统计学分析,各组的PCNA、p53阳性细胞百分比进行单因素方差分析, hTERT阳性率进行X2检验。
2 结果 2.1 hTERT的表达：在慢性宫颈炎组中仅1例有弱表达,主要位于基底层及棘细胞深层。在CIN组中,随着异常增生程度的增加,阳性率也逐渐增加,宫颈癌时阳性率达最高, 宫颈炎组织hTERT表达阳性率明显低于宫颈癌和CIN(见表1),且随着异常增生程度的增加阳性细胞分布也从基底层向表层扩展,在重度异常增生或原位癌中,甚至可达上皮全层,在高分化宫颈癌中,阳性细胞主要分布在癌巢周边部,分化较差的宫颈癌,肿瘤细胞呈片状弥漫性阳性染色。