注射用盐酸索他洛尔无菌检查的方法验证

【摘要】 目的：建立注射用盐酸索他洛尔的最佳无菌检查方法，保证检验结果的准确和可靠性。方法：按中国药典2005年版二部（附录Ⅺ H）无菌检查法中的薄膜过滤法进行。结果：样品管无菌生长，六株阳性对照菌生长良好。结论：方法学验证采用薄膜过滤法进行的无菌检查，可行。

【关键词】 注射用盐酸索他洛尔 无菌检查法（薄膜过滤法） 方法学验证。

无菌检查时必须选择适宜的方法消除其抗菌作用，才能保证检验结果的准确和可靠性。为此我们按照《中国药典》2005年版二部（附录Ⅺ H）无菌检查法项下薄膜过滤法的要求对注射用盐酸索他洛尔进行了实验，对其无菌检查方法进行了验证。

1 仪器与材料。

1.1 仪器 HTY—2000A型智能集菌仪及全封闭式无菌过滤培养器（杭州高得医疗器械有限公司）。

1.2 供试品 注射用盐酸索他洛尔（吉林市卓怡康纳制药有限公司，规格40mg/支，批号为060201）。

1.3 培养基及冲洗液 硫乙醇酸盐流体培养基（批号：050907）、改良马丁培养基（批号：060419）、营养肉汤培养基（批号：050919）、营养琼脂培养基（批号：060330）、PH7.0无菌氯化钠—蛋白胨缓冲液（批号：0604242），均由北京三药科技开发公司提供。

1.4 验证试验用菌种 ①金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]；②铜绿假单胞菌[CMCC（B）10 104]；③枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63 501]；④生孢梭菌[CMCC（B）64 941]；⑤白色念珠菌[CMCC（F）98 001]；⑥黑曲霉[CMCC（F）98 003]；以上菌种均由中国药品生物制品检定所提供。

2 方法与结果。

按中国药典2005年版二部无菌检查法（附录Ⅺ H）方法验证进行试验。

2.1 菌液制备。

2.1.1 取经36℃培养20h的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的肉汤新鲜培养物1ml加入0.9%的无菌氯化钠溶液9ml，10倍稀释至10－6约为50～100cfu/ml，备用。

2.1.2 取经36℃培养20h的生孢梭菌硫乙醇酸盐流体培养物1ml，加入0.9%的无菌氯化钠溶液9ml，10倍稀释至10－6约为50～100cfu/ml，备用。

2.1.3 取经26℃培养48h的白色念珠菌改良马丁液体培养物1ml，加入0.9%的无菌氯化钠溶液9ml，10倍稀释至10－6约为50～100cfu/ml，备用。

2.1.4 取经26℃培养1周的黑曲霉斜面培养物，加0.9%的无菌氯化钠溶液10ml，将孢子洗脱后，吸出孢子悬液，用垫有脱脂棉的漏斗（湿热灭菌）过滤，除去菌丝，收集菌液至另一无菌试管内作为原液。取此原液0.1ml，加0.9%无菌氯化钠溶液9.9ml，稀释至10－5约为50～100cfu/ml，备用。