去感热注射液指纹图谱进样方式的研究

【摘要】 　　目的 建立去感热注射液挥发性成分指纹图谱的进样方式。方法 采用直接进样、固相微萃取、有机溶剂提取、吹扫捕集和顶空进样等进样方式进行比较。结果 选定顶空进样为指纹图谱研究的进样方式。结论 本方法为去感热注射液的挥发性成分的指纹图谱研究提供了可靠的进样方式。

【关键词】 去感热注射液；气相色谱；指纹图谱。

ＡＢＳＴＲＡＣＴ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ To set up the most suitable sampling injection mode for the fingerprint of the volatile components in Quganre Injection.Ｍｅｔｈｏｄｓ The techniques of direct injection, solidphase microextraction, organic solvbent extraction, purgetrap sampling and headspace sampling were applied, their effects in fingerpring were compared.Ｒｅｓｕｌｔｓ Headspace sampling was chosen for fingerprint study.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Headspace sampling is reliable in studying the fingerprint of volatile components in Quganre Injection.

ＫＥＹＷＯＲＤＳ Quganre Injection gas chromatography fingerprint。

在70个中药注射液的指纹图谱研究中，柴胡注射液，鱼腥草注射液，去感热注射液［1］，醒脑注射液等多个品种需要建立挥发性成分的指纹图谱测定条件，条件要求所有挥发性色谱成分达到分离，能客观、真实地表达各色谱成分；为了追踪各色谱成分的来源和归属，此条件应同时满足中药材和各生产环节的中间体样品的指纹图谱测定要求，要建立这样的测定条件，无疑是一道技术难关。各研究单位在攻克难关时，一般均从色谱分离和制样(包括进样)技术两方面求得突破。在分离技术上均已获成功，在制备样品，特别是进样方式上，存在各种看法和争议。焦点是所得指纹图谱的信息量。 　　去感热注射液由青蒿、竹叶柴胡、芦竹根和石膏四味中药提取制成，其中青蒿、竹叶柴胡用其水蒸汽蒸馏的挥发性部分；本文主要研究了去感热注射液挥发性成分用固相微萃取、吹扫捕集和顶空直接进样，液液萃取后进样和直接进样等进样方式的条件，并对各进样方式的信息量和重复性进行评估与比较。提出选择顶空进样作为去感热注射液指纹图谱测定的进样方法的依椐。本研究可供其它挥发性成分的指纹图谱进样方法研究作为参。

1 仪器与试药 　　美国安捷伦公司Agilent 6890N气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（FID）, Agilent 6890N色谱工作站（安捷伦科技有限公司），TEKMAR DOHRMANN 3100 Sample Concentrator吹扫捕集器， MilliQ 超纯水仪（MILLIPORE公司）。去感热注射液由雅安三九药业有限公司及四川大陆蓉东制药有限公司提供。乙醚、正己烷（均为分析纯，成都化学试剂厂），超纯水(电阻率18.2MΩ·cm) 。

2 方法与结果。

2.1 采用气相色谱法。用HP5(5%苯基95%二甲基聚硅氧烷)色谱柱（30m×0.53mm×1.50μm）（Agilent公司）。色谱条件：进样口温度：200℃,氮气总流速：25ml.min—1，分流比：10：1；氮气柱流速：2.0 ml.min—1，柱温：初始50℃保持1分钟，以5℃.min—1升温至160℃保持17分钟即可；FID检测器：温度260℃,氢气流速：35 ml.min—1，空气流速：350 ml.min—1，尾吹流速：30 ml.min—1。

2.2 直接进样 取去感热注射液1μl直接注入气相色谱仪进样，考察去感热注射液中主要含有的挥发性成分的种类和量的大致比例。见图1。 　　图1 直接进样色谱图（略）。

Fig 1 Chromatogram of Sample Injection。

2.3 固相微萃取 固相微萃取为近年新兴的进样方式，可对样品富集后再行进样，可提高样品的色谱响应。取去感热注射液用固相微萃取法测定，固相微萃取所得图谱中较多组分保留在固相微萃取柱上，不能完整地表达样品的指纹特征。见图2（上图为固相微萃取的色谱图，下图为顶空进样的色谱图）。注：本组色谱图所用色谱柱为HP5(5%苯基95%二甲基聚硅氧烷)色谱柱（30m×0.32mm×0.25μm）。