疏肝健脾活血法对肝郁大鼠影响的实验研究

【摘要】   目的探讨疏肝健脾活血法对肝郁大鼠子宫卵巢、性激素水平的影响。方法采用夹尾法建立肝郁动物模型,采用光镜观察组织学改变,测定子宫重量,观察雌二醇(E2),孕酮(P)的变化。结果疏肝健脾活血法能增加肝郁大鼠子宫重量,提高大鼠体内E2,P的含量,并能改善子宫卵巢的病理改变。结论疏肝健脾活血法对肝郁大鼠提高性激素水平有一定的治疗作用,增加子宫重量。

【关键词】 疏肝健脾活血肝郁 雌二醇 孕酮

Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of dispersing stagnated liver—qi,invigorating spleen and promoting blood circulation method on rats with stagnation of liver qi. MethodsThe stagnation of liver qi model was induced by clamping tail. The change of histology was observed by light microscope,and the weight of uterus and the changes of E2 and P were determined.ResultsThe dispersing stagnated liver—qi ,invigorating spleen and promoting blood circulation method could enhance the weight of uterus and enchance the expression of E2 and P in the body,and improve the pathological changes of uterus and ovary.ConclusionDispersing stagnated liver—qi,invigorating spleen and promoting blood circulation method has some therapeutic action on enchancement of level of gonadal hormone of stagnation of liver qi and weight of uterus.

Key words:Dispersing stagnated liver—qi and invigorating spleen and promoting blood circulation; Syndrome of stagnation of liver qi; E2; P   肝郁证是临床常见的证候之一,多见于妇科疾病。疏肝健脾活血法是临床治疗肝郁证的有效方法之一,为了进一步探讨疏肝健脾活血法治疗肝郁证的作用机理,本研究重点观察了疏肝健脾活血法对肝郁大鼠子宫卵巢雌二醇(E2)及孕酮(P)的影响,同时检测了大鼠阴道脱落细胞的变化,进一步探讨疏肝健脾活血法治疗肝郁证的作用机理。

1 器材。

1.1 动物健康Wistar成熟雌性大鼠,体重(180±20)g,黑龙江中医药大学实验动物中心提供。

1.2 药物与试剂。

盐酸肾上腺素,广州明兴制药厂产品。美兰染液,黑龙江中医药大学附院化验室提供。疏肝健脾活血复方、逍遥散处方药材,由黑龙江中医药大学附院提供。雌二醇孕酮试剂盒,北京北免东雅生物技术研究所提供。

1.3 仪器。

LIANG—100微机显示自动记录血浆粘度计(上海医科大学生产)、显微镜(Olympus日本)、扭力天平(TN—100B上海第二天平仪器厂)等。

2 方法。

2.1 动物分组。

取Wistar雌性大鼠70只,连续进行阴道涂片两个性周期,从中选择4日性周期明显,为动性间期的大鼠作为实验对象[1],共50只,随机分为5组,实验组分高、低两组,中药对照组,模型组及正常组。每组动物数为10只。

2.2 造模与给药。

大鼠7~10只置于同一笼内,用尖端包扎纱布的止血钳钳夹一只大鼠尾部,然后立即放开,使其与其它大鼠撕打,导致整笼大鼠保持激怒状态,每天刺激45 min,同时皮下1次肌注0.1%肾上腺素0.08 ml/100 g[2]。   正常组、模型组:每日2ml/只生理盐水灌胃。中药对照组:每日2ml/只含量1.418g/ml逍遥散灌胃。中药治疗组:高剂量组每日2ml/只含量1.8217g/ml;低剂量组每日2 m1/只含量0.607 g/ml,疏肝健脾活血复方灌胃

2.3 样品采集与指标检测刺激造模12d后,摘取大鼠一侧眼球取血,检测血液流变学指标,观察造模是否成功,于模型成功后第2天开始给药,同时继续给于造模,0.1%肾上腺素0.08 ml/100 g 1周注射2次,夹尾方法同前。各组连续灌胃14 d,于末次给药后禁食24 h,摘眼球取血,离心,用于E2、P含量测定。然后处死大鼠,剖开腹腔,切取子宫卵巢,剥离周围脂肪组织,将子宫以扭力天平称重,换成子宫/体重指数。将子宫卵巢组织放于4%多聚甲醛,固定,供HE染色。

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