衢州市主要病媒生物对常用卫生杀虫剂的抗药性调查
蚊、蝇、蟑螂是爱国卫生工作主要关注的几种病媒生物，可引起传病、骚扰、损物等危害，且孳生场所广泛、繁殖快，化学杀虫剂是目前使用最广泛的防制手段。
抗药性是因不合理的连续大量应用杀虫剂产生的，对抗药性监测是杀虫药剂合理使用、害虫抗药性治理及评价害虫抗药性治理措施等有效性的手段[1]。
为了解衢州市蚊、蝇、蟑螂的抗药性情况，在衢州市区采用多点取样法现场采集测试虫自然品系，并调查它们对7种常用杀虫剂的抗药性，现将结果报道如下： 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 杀虫剂 溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、残杀威（前3种测蚊蝇蟑）、敌敌畏（测蚊蝇）、氯菊酯（测蝇蟑）、仲丁威（测蚊）、乙酰甲胺磷（测蟑），均由中国疾病预防控制中心流研所提供。
1.1.2 现场试虫 现场试虫（自然品系）均采集于衢州市区农贸市场、餐饮场所、宾馆饭店、垃圾中转站、垃圾箱桶等孳生环境；其中，淡色库蚊的卵块或成蚊，携回实验室经鉴定后培育繁殖1～2代的4龄期幼虫作测试用虫；家蝇成蝇，携回实验室经鉴定后培育繁殖1～2代，羽化后3～5 d成蝇作测试用虫；德国小蠊雄性成虫，携回实验室繁殖饲养1～2代，羽化后4～5 d的雄性成虫作测试用虫。
1.1.3 对照试虫 浙江省疾病预防控制中心病媒所实验室长期饲养不接触杀虫剂的敏感品系（正常品系）作为对照。
1.2 实验方法 1.2.1 环境条件 抗性测试室和饲养室：室温（261）℃，相对湿度60%～70%。
1.2.2 淡色库蚊 于2013年采用蚊幼虫药液浸渍法测定淡色库蚊4龄期幼虫半数致死浓度（LC50）。
先将杀虫剂原药用丙酮逐步稀释成等差或等倍5～7個浓度组，现配现用；取50 mL容器若干只，每只放入适量脱氯水和4龄期幼虫20条；取500 mL容器若干只，每只加脱氯水150 mL，根据设定浓度用刻度吸管吸取药液置入容器，用玻璃棒从低浓度向高浓度逐一搅拌均匀；把50 mL容器内的幼虫倒500 mL容器内，24 h时检查死亡数。
同一个测试浓度重复5次，并设空白对照组。
1.2.3 家蝇 于2014年采用点滴法测定家蝇成蝇半数致死量（LD50）。
先将杀虫剂原药用丙酮逐步稀释成等差或等倍5～7个浓度组，现配现用；将家蝇用乙醚麻醉后，挑选50只雌性成蝇放置于玻璃平皿；用微量点滴器按1 L/只的剂量点滴于中胸背板，再移入洁净的饲养笼内正常饲养，24 h时检查成蝇死亡数，试验重复2次。
对照组用丙酮液同剂量处理，死亡率大于20%时，试验重做。
1.2.4 德国小蠊 于2015年采用点滴法测定德国小蠊成虫LD50。
先将杀虫剂原药用丙酮逐步稀释成等差或等倍5～7个浓度组，现配现用；将德国小蠊用乙醚麻醉后，挑选30只雄性成虫置于平皿中，用微量点滴器按1 L/只的剂量点滴于第2、3对足基节间的腹板上，再放入清洁的养虫笼内正常饲养，24 h后检查死亡数。
试验重复3次。
对照组用丙酮液同剂量处理，死亡率大于20%时，试验重做。
家蝇六足紧缩，用针触虫体不能翻身爬行者为死亡。
德国小蠊腹部上翻，六足抽搐，用针触虫体不能翻身爬行者为死亡；虫体恢复正常姿势但不能移动也视为死亡。
1.4 抗性分级 抗性倍数（R/S）=自然品系LD50值（或LC50）/正常品系LD50值（或LC50）。
抗性倍数20倍为高抗，10～20倍为中抗，2～10倍为低抗。
1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，求出LC50、LD50及抗性倍数，运用配对t检验方法分析试虫对测试杀虫剂的半数致死浓度（量）的差异，以P 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 淡色库蚊的抗药性测定结果 衢州市淡色库蚊对5种常用卫生杀虫剂的抗药性测定，敌敌畏和溴氰菊酯处于中抗水平，抗性倍数分别为16.87倍和13.08倍；高效氯氰菊酯、仲丁威、残杀威的抗性倍数在2.63～9.52倍之间，处于低抗水平。
见表1。
自然品系与正常品系对测试杀虫剂的LC50经配对t检验，差异无统计学意义（t=1.942，P=0.124）。
2.2 家蝇的抗药性测定结果 衢州市家蝇对5种常用卫生杀虫剂的抗药性测定，高效氯氰菊酯处于中抗水平，抗性倍数为13.14倍；溴氰菊酯、敌敌畏、残杀威、氯菊酯的抗性倍数在4.87～6.22倍之间，处于低抗水平。
见表2。
自然品系与正常品系对测试杀虫剂的半数致死量经配对t检验，差异无统计学意义（t=1.302，P=0.263）。
2.3 德国小蠊的抗药性测定结果 衢州市德国小蠊对5种常用卫生杀虫剂的抗药性测定，高效氯氰菊酯为高抗水平，抗性倍数为23.69倍；其次乙酰甲胺磷和溴氰菊酯，抗性倍数分别为14.51倍和11.58倍，处于中抗水平；氯菊酯和残杀威的抗性最低，抗性倍数分别为8.99倍和8.20倍。
见表3。
自然品系与正常品系对测试杀虫剂的半数致死量经配对t检验，差异有统计学意义（t=6.375，P=0.003）。
3 讨论 3.1 衢州市主要病媒生物对常用卫生杀虫剂存在不同程度的抗药性 本次抗药性调查以正常品系作为基数，与采集于不同孳生环境的自然品系进行比较测定，结果显示，3种不同自然品系对7种测定的常用卫生杀虫剂均存在不同程度的抗性。
从衢州市近3年开展的病媒生物密度监测来看，蚊虫优势种类均为淡色库蚊，2013、2014、2015年占比分别为81.31%、66.17%、76.27%；蝇类优势种类均为家蝇，2013、2014、2015年占比分别为33.46%、32.53%、28.57%；蟑螂优势种类均为德国小蠊，2013、2014、2015年占比分别为79.71%、79.21%、77.90%，主要优势种和浙江省病媒生物监测结果一致[2]，与此次抗药性调查监测的测试虫种相同。
蚊虫密度监测采用的是诱蚊灯法[3]，诱捕时间为日落前1 h至次日日出后1 h，淡色库蚊、中华按蚊和骚扰阿蚊的吸血活动高峰在此期间，而伊蚊大多在白天吸血[4]。
因此，笔者认为蚊种群密度监测方法有待进一步研究，与其他研究者考虑相同[3—5]。
本次抗药性调查使用的3种拟除虫菊酯类药物中，淡色库蚊、家蝇、德国小蠊自然品系对高效氯氰菊酯的抗性分别为接近中抗水平、中抗水平、高抗水平，对溴氰菊酯的抗性分别为中抗水平、低抗水平、中抗水平；家蝇、德国小蠊自然品系对氯菊酯的抗性均为低抗水平。
两种有机磷类药物中，淡色库蚊、家蝇对敌敌畏的抗性分别为中抗水平、低抗水平，且淡色库蚊对敌敌畏的抗药性最强，与浙江省丽水、千岛湖[5—6]等城市情况相似；德国小蠊对乙酰甲胺磷的抗性水平为中抗水平。
两种氨基甲酸酯药物中，淡色库蚊、家蝇、德国小蠊自然品系对残杀威的抗性均为低抗水平，淡色库蚊对仲丁威的抗性水平为低抗。
3.2 抗药性的发生与卫生杀虫剂的应用情况有关 衢州市于2005年开始实施公共外环境病媒生物防制市场化运作，随着社会经济的发展和卫生创建的深入，目前各大型宾馆饭店、超市、农贸市场以及部分医院、学校等重点单位病媒生物防制工作由有害生物防制业PCO实施，实行市场化运作的情况越来越普遍，也取得明显成效。
由于拟除虫菊酯类杀虫剂具有高效、广谱、低毒、低残留等特点，衢州市多选用拟除虫菊酯类杀虫剂进行蚊蝇蟑的消杀，用量大、使用频率高；其次是有机磷，像敌敌畏主要作为速杀药剂，乙酰甲胺磷是灭蟑的主要药剂。
2015年，衢州市组织开展了本地杀虫剂生产企业和有害生物防制服务机构等专业机构以及大中型超市和小商品市场等流通单位的抽样调查。
根据调查情况来看，全市卫生杀虫剂品种从多到少依次为拟除虫菊酯、有机磷、氨基甲酸酯、烟碱类、有机氟、硝基亚胺类；其中，专业机构拟除虫菊酯占64.18%，有机磷和氨基甲酸酯分别占11.94%；流通单位拟除虫菊酯占97.64%，有机磷和氨基甲酸酯分别占0.79%和0.40%，可知衢州市拟除虫菊酯类杀虫剂的市场最为广泛。
抗药性发生程度与化学杀虫剂的用药量、使用频率等密切相关，与任樟尧等[8]调查相同。
3.3 根据调查结果提出主要病媒生物的防制对策 病媒生物防制是一项民生工程，通过有效防制可以减少病媒生物对人类的骚扰和经济损失，更可以预防控制虫媒疾病的发生流行[9—10]。
衢州市是浙江省首个全市域国家级生态示范区[11]，随着人们健康意识及环保意识的增强，病媒生物防制工作在追求高效的同时，应多关注杀虫剂对环境的影响[12]。
杀虫剂具有污染环境、造成非靶有益昆虫的死亡和抗药性产生等缺点，所以需采用综合措施来达到有效防制的目的[13]。
全市上下要以创建国家卫生城市和县城为抓手，实施以环境治理为主的综合措施，有效促进病媒生物预防控制工作开展[14—16]。
广泛宣传鼠、蚊、蝇、蟑螂等四害与环境卫生之间的关系，改变单纯靠药物消杀的观念，通过多采取环境治理的治本措施消灭四害。
病媒生物防制的环境治理与广义的环境卫生整治有区别，它应侧重对孳生地的处理，包括搞好室内外环境卫生，切断食源，堵塞鼠洞，翻箱倒柜，堵抹缝隙，疏通沟渠，清理积水，垃圾桶加盖，垃圾不落地、日产日清。
②强化防灭设施配置。
加大投入，强化重点单位场所安装箅子、地漏、挡鼠板、防鼠网等防鼠设施和纱门、纱窗、风幕机、门帘、纱罩等防蝇设施[17—18]；推进在公共区域和重点区域使用灭鼠毒饵站、鼠夹、鼠笼、粘鼠板和灭蝇灯、捕蝇笼、粘蝇条，灭蚊灯、毒蚊缸、防蚊闸、电蚊拍，以及蟑螂盒等物理除四害方法。
③优化杀虫药物使用。
采取化学防制时，要明确技术要领，规范施药方法，合理控制药物浓度，尽量减少施药频次。
应减少使用已有高抗水平和中抗水平的卫生杀虫剂，并根据不同类型杀虫剂的抗性机制，采用复配杀虫剂或者增效剂与杀虫剂复配以降低或者减缓抗药性的发生[19]。
定期开展病媒生物抗药性监测工作[20]，及时掌握蚊、蝇、蟑螂的抗药性状况，指导杀虫剂的合理使用和病媒生物的科学防制。
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