补肾活血方对血管性痴呆小鼠行为学及脑海马自由基代谢的影响
作者：于文涛 张一昕 吴中秋 李俊仙。
【摘要】 目的 探讨补肾活血方对血管性痴呆小鼠学习记忆能力及自由基代谢的影响。方法 采用脑缺血再灌注法复制血管性痴呆小鼠模型，对补肾活血方与补肾方、活血方三组及对照组、模型组小鼠水迷宫法行为学及脑海马超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化进行对比观察。结果 与对照组比较，模型组小鼠学习与记忆能力下降，表现为游全程时间延长，错误次数增加(P＜0.01)，脑海马SOD活性明显降低，MDA含量明显升高(均P＜0.01)；与模型组比较，各治疗组学习成绩和记忆成绩均有明显提高(P＜0.01)，脑海马SOD活性明显升高，MDA含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01)；各治疗组比较，补肾活血组的学习成绩与记忆成绩以及改善SOD活性和MDA含量方面均优于其他治疗组(P＜0.05或P＜0.01)。结论 补肾中药、活血中药、补肾活血中药均可促进自由基代谢，改善血管性痴呆小鼠学习与记忆能力，且补肾中药与活血中药具有协同作用，补肾活血方疗效显著。
【Abstract】Objective To probe the effects of bushenfang, huoxuefang, and bushenhuoxuefang on the abilities of learning and memory and free radical metabolism of vascular dementia (VD) mice. Methods The models of VD mice were established by cerebral ischemia reperfusion, the praxiological changes were observed by water maze and the activity of superoxide dismutase (SOD) and the content of malondialdehyde (MDA) in hippocampi were measured. Results Compared with those in normal group, the abilities of learning and memory in VD model mice were reduced, which showed extending the time for swimming the whole process, and increasing the time of mistakes(P＜0.01), and the activity of SOD in hippocampi was decreased and the content of MDA was increased(P＜0.01). Compared with those in model group, the learning and memory performance records were improved (P＜0.01), and the activity of SOD was increased and the content of MDA was decreased (P＜0.05 or P＜0.01) in hippocampi in each treatment group. The efficacy of bushenhuoxue group was more excellent than that of other treatment groups(P＜0.05 or P＜0.01). Conclusions The bushen, huoxue, and bushenhuoxue traditional Chinese medicine could improve free radical metabolism and the learning and memory capabilities, and the two kinds of traditional Chinese medicine have synergistic actions.
【Key words】Bushenhuoxue；Vascular dementia; Praxiology; Free radical metabolism。
血管性痴呆(VD)是因脑血管病所致的智能及认知障碍，为老年人常见病、多发病。补肾中药和活血中药为临床治疗VD最常用药物，具有公认的疗效〔1〕，但临床所用复方多为多种治法综合而成，补肾法和活血法是否有协同作用，目前尚未见报道。为了探讨不同治法对于VD的作用效果及其协同关系，本研究采用反复脑缺血再灌注的方法复制VD小鼠模型，观察补肾活血类中药对模型小鼠行为学及自由基代谢的影响，现报道如下。
1 材料与方法。
1.1 实验动物。
清洁级昆明小鼠80只，雌雄各半，体重25～30 g，由河南省中兴实验动物养殖中心提供。
1.2 实验用药。
补肾方：由何首乌、益智仁、胡桃肉、人参组成。活血方：郁金、川芎、丹参、当归组成。补肾活血方：由何首乌、益智仁、胡桃肉、人参、郁金、川芎、丹参、当归组成。以上药由本院煎药室煎制，补肾活血方浓缩成0.50 g/ml的混悬液，补肾方、活血方浓缩成0.25 g/ml的混悬液。
1.3 主要仪器。
小鼠电子水迷宫(中国医学科学院药物研究所)。XTS20型连续变倍体视显微镜(北京)。
1.4 模型制备。
参照文献〔2〕，动物麻醉后颈正中部常规消毒后切口，分离双侧颈总动脉，用4号丝线结扎。拉紧丝线，同时在距尾尖1 cm处剪断放血约0.3 ml，热凝止血。阻断血流20 min，松开丝扣再灌注10 min后，再次阻断血流20 min，第2次再灌后观察30 min，缝合皮肤，切口局部注射庆大霉素0.2万U。对照组只分离颈总动脉，穿线但不结扎，尾部不放血，余各组反复结扎双侧颈总动脉阻断血流加尾部放血，制备反复缺血再灌注VD模型。
1.5 分组及给药。
将小鼠随机分为：对照组、模型组、补肾活血组、补肾组及活血组，每组10只。各治疗组在术后第2天给药治疗，补肾活血组灌服补肾活血方14.28 g/kg体重，补肾组，活血组均以7.14 g/kg体重灌服相应药物，对照组、模型组均灌服生理盐水10 ml/kg体重，均1次/d，治疗14 d。