肉苁蓉对败血症大鼠肝线粒体能量代谢功能的影响
【摘要】 目的 研究 肉苁蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)对败血症大鼠肝线粒体功能的 影响 ，明确其具体作用机制。 方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制败血症模型，采用生理多导仪监测平均动脉压(MAP)的变化，定磷法测定肝线粒体ATP酶活性，采用Clark氧电极法测定呼吸控制率(RCR)，Ⅲ态的变化。结果大鼠在CLP术后，线粒体ATP酶活性，RCR和Ⅲ态显著降低(P0.01)。肉苁蓉给药组肝线粒体ATP酶活性，RCR和Ⅲ态较对照组明显改善(P0.05)，与大鼠死亡率的降低呈显著正相关。结论 肉苁蓉能增强实验性败血症大鼠线粒体能量代谢功能。 代写论文。
Abstract：ObjectiveTo study the effect of Cistanche deserticola Y.C.Ma on energy metabolic function of liver mitochondria following sepsis and investigate the treatment mechanism.Methods The model of sepsis was made by cecal ligation and puncture. Cistanche deserticola Y.C.Ma and saline were administrated by gastric garage to the rats respectively for fifteen days.Liver mitochondria RCR，ATPase activity were assayed.ResultsLiver mitochondria RCR ，ATPase activity were obviously decreased after CLP．Compared with control group, Cistanche deserticola Y.C.Ma could obviously reversed the changes(P0.01). Furthermore the effect was positive correlated to the improvement of the death rate.ConclusionCistanche deserticola Y.C.Ma can strengthen the energy metabolic function of liver mitochondrial，effectively attenuate the dysfunction of hepatocytic mitochondria from the damage induced by sepsis. 论文代写。
Key words：Cistanche deserticola Y.C.Ma； Sepsis； Mitochondria； ATPase； RCR 论文代写。
肉苁蓉是传统补益中药，具有延缓衰老，抗膜脂质过氧化，增加细胞DNA合成率，抗疲劳等药理作用［1］。研究发现肉苁蓉能减轻败血症肝损伤，降低败血症大鼠死亡率［2］，但其具体作用机制尚不清楚。败血症早期肝线粒体能量代谢功能降低，是败血症中肝损伤的始动环节［3］。以改善肝线粒体能量代谢为突破口，紧密结合传统补益类中药扶正功能这一药 理学 基础，必将开拓败血症 治疗 的新领域。实验中我们观察了肉苁蓉对败血症大鼠肝脏线粒体ATP酶活性和呼吸控制率(RCR)，Ⅲ态的影响以及与大鼠死亡率之间的关系，以期为阐明肉苁蓉治疗败血症作用机制提供必要的 理论 依据和有效探索。
购自新疆(长江大学医学院中医系张德新教授鉴定)，取干重肉苁蓉200 g，蒸馏水煎2次，收集所得滤液蒸发浓缩至浓度1 g/ml。戊巴比妥钠(001104)， 中国 医药集团上海化学试剂公司； ATP酶试剂(20030108)南京建成生物工程研究所。JYDIA溶氧测定仪，江苏电 分析 仪器厂。
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雄性SD大鼠(200～250 g)40只(购自华中 科技 大学同济医学院实验动物中心)，随机分为5组：假手术组(n=8)；12 h对照组(n=8)；12 h给药组(n=8)；16 h对照组(n＝8)；16 h给药组(n=8)。假手术组和对照组给予生理盐水灌胃，给药组予1 g/ml的肉苁蓉(200 mg/kg)灌胃，2次/d，喂至15 d。采用盲肠结扎穿孔术［4］复制感染性休克模型。手术前动物自由饮水，禁食12 h。 论文代写。
颈静脉插入头皮针，肝素抗凝，左侧颈总动脉插管至主动脉弓处，用自制导管与生理多导仪相连，记录平均动脉压(MAP)，待MAP平稳后进行实验。
取大鼠肝脏6g迅速置于0℃分离介质〔蔗糖250 mmol，乙羟乙基哌嗪2－乙基磺酸2 mmol，乙二胺四乙酸0.1 mmol，pH 7.4〕，剖开洗去杂质，以分离介质悬浮(1∶10)，用Teflon电动匀浆器匀浆(1 200 r/min)，以2 000 r/min离心10 min，留置上清液，以10 000 r/min离心15 min，弃去上清液，取沉淀物以2 ml分离介质进行悬浮得到线粒体悬液，全部过程在0～4℃进行。采用定磷法［5］测ATP酶活性。 论文代写。
采用Clark氧电极法［6］，取反应介质(0.225mol/L蔗糖，15 mmol/L KCl，15 mmol/L KH2PO4，50 mmol/L TrisHCl，1 mmol/L EDTA，pH 7.5)2.9 ml，加入搅拌反应杯中，恒温30℃，加入线粒体悬液0.1 ml，以琥珀酸(终浓度10 mmol/L)为底物，反应1 min后，加入600 nmol/L ADP，用JYD－IA溶氧测定仪记录线粒体氧化还原反应曲线， 计算 Ⅲ态，Ⅳ态，RCR。 论文代写。
2 结果。
2.1 肉苁蓉对败血症大鼠平均动脉压和24 h大鼠死亡率的影响 毕业论文。
盲肠结扎穿孔术后对照组血压12 h血压显著降低，16 h更趋明显，与假手术组比较，有显著差异。肉苁蓉治疗组血压得到改善。对照组死亡率与假手术组相比较，死亡率显著上升，给药组死亡率较对照组明显降低。结果见表1。表1 肉苁蓉对大鼠平均动脉压和死亡率的影响(略) 论文代写。