子宫腺肌病患者诱生型一氧化氮合酶表达的研究

作者：王秀伟范广忠靳晓倩 【关键词】子宫腺肌病;子宫内膜;诱生型一氧化氮合酶;免疫组织化学 子宫腺肌病是妇科常见病，以在子宫肌壁内出现子宫内膜腺体和间质为其病变征，此病多发生于30～50岁经产妇，临床上往往以子宫增大、痛经和月经过多为其主要症状。近年来对该病的发生机制提出一些新的看法，关于血管生成、免疫等方面的异常在子宫腺肌病的发生发展中起重要作用。子宫内膜侵入子宫肌层后，血管生成活性的增强，为异位内膜的种植生成提供了有利条件[1]。NO可诱导血管内皮细胞的分裂增生，调节血管生成及血流量，由此推测可在子宫腺肌的发生发展中发挥作用。所以本研究用免疫组化的方法，测定子宫腺肌病患者在位内膜与异位内膜诱导型一氧化氯合酶(iNOS)的含量，旨在探讨其在子宫腺肌病的发生发展过程中所起的作用和意义，为临床治疗提供理论依据。 　　1资料与方法 　　1.1标本来源材料均取本院2006年9月—2008年3月手术切除并有完整临床资料的子宫标本，腺肌病组:子宫腺肌病38例，患者年龄35～49岁，平均年龄38.9岁;子宫内膜组织学分期:增生期20例，分泌期18例。肌瘤组:无症状子宫肌瘤31例，38～51岁，平均年龄43.2岁;子宫内膜组织学分期:增生期17例，分泌期14例两组患者术前3个月内均未服用任何激素类药物。所有病例均行子宫全切或次全切除术，并经病理诊断证实。即用型SABC免疫组织化学染色试剂盒(产品编号:SA1022)为武汉博士德生物工程有限公司产品。

1.2方法石蜡切片常规二甲苯脱蜡，梯度酒精水化，PBS液洗5min,3%H2O25min,PBS洗5min;10%山羊血清室温10min;一抗(1∶50)，冰箱4℃过夜，PBS洗5min;二抗(1∶150)37℃温箱30min,PBS洗5min;SABC30min,PBS洗5min;DAB显色5min,自来水冲洗;苏木素复染，脱水透明，封片。 　　1.3结果判定结果判断标准[2]以细胞浆出现黄色颗粒为阳性，表达强度用组织学评分表示。组织学评分为ΣPi，其中i代表细胞浆染色强度，分为4级:0级无黄色颗粒，1级为淡黄色颗粒，2级为黄色颗粒，3级为棕色颗粒;P代表同一染色强度细胞所占计数细胞百分数，1、2、3、4、5分别代表染色细胞占计数细胞总数的0%～15%、16%～50%、51%～85%、86%～95%、96%～100%。每张切片随机测定5个高倍镜视野(200倍)的染色强度，取5个视野的组织学评分均值作为最终得分。 　　1.4统计学处理实验结果用x±s表示，采用方差分析和两两比较t检验，P0.05为有显著性差异。 　　2结果 　　iNOS在正常或异位内膜腺上皮都有阳性表达，两组的血管平滑肌也有阳性表达，而在间质细胞及子宫平滑肌细胞均未见阳性表达。 　　2.1腺肌病组在位子宫内膜与肌瘤组子宫内膜iNOS组织学评分比较腺肌病组增殖期或分泌期子宫内膜与肌瘤组比较，腺上皮iNOS组织学评分无明显变化，两组比较，差异无显著性(P0.05)。同时，两组子宫内膜腺上皮的增殖期和分泌期iNOS组织学评分比较，差异无显著性(P0.05)，即无周期性变化，见表1。表1两组患者正常内膜、异位内膜腺上皮细胞iNOS组织学评分比较注:*与肌瘤组正常内膜比较，P0.05，▲与在位内膜比较，P0.05，△与同组增殖期比较P0.05。

2.2腺肌病组在位内膜与异位内膜iNOS组织学评分比较腺肌病组增殖期或分泌期异位内膜腺上皮细胞iNOS组织学评分均较在位内膜显著增加，两者比较，差异有显著性(P0.05)。异位内膜、在位内膜及正常内膜各组内增殖期和分泌期比较均无明显差别，即无周期性变化。两者比较差异无显著性(P0.05)，见表1。