反相HPLC法测定氨酚曲马多片各组分含量
方法色谱柱：DiamonsilC18色谱柱（Dikma公司，4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇－磷酸盐缓冲液（pH＝5.8）（40：60）；流速：1.0ml/min；检测器：UV，215nm；；进样量：20μl；柱温：20℃［２］。
结果对乙酰氨基酚和盐酸曲马多分别在57.2～286μg/mL和5.74～28.70μg/mL范围内，浓度与峰面积的线形关系良好，相关系数R分别为0.99995和0.9997。
方法的精密度RSD分别为和0.1%和0.2%。
（n=3），平均回收率分别为99.46%和99.75%（n=3）。
【关键词】反相HPLC法氨酚曲马多片 氨酚曲马多片（及通安）主要用于中度至重度急性疼痛的短期治疗［１］。
盐酸曲马多和对乙酰氨基酚合用时［2］，显示了协同的镇痛效果而且可以减少副作用的发生，在临床应用上具有明显的优势。
实验表明该方法准确可靠，能满足各项分析要求。
1仪器和药品 仪器Agilent1100Series高效液相色谱仪，德国安捷伦；TU—1800PC型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器。
药品氨酚曲马多片（盐酸曲马多37.5mg，对乙酰氨基酚325mg），西安杨森制药；盐酸曲马多，辽宁锦州九天药业；对乙酰氨基酚，安徽永安药业；茶碱（内标），天津中安药业；利多卡因（内标），山东华鲁制药] 2实验方法 2.1检测波长的选择 取处方量两主药、辅料,0.1mol/L盐酸溶解，超声5min,按同倍比例稀释,以0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤［3］。
以0.1mol/L盐酸为空白,在200nm～400nm波长范围紫外扫描，确定测定波长。
2.2HPLC测定氨酚曲马多片含量的方法 色谱柱：DiamonsilC18色谱柱（Dikma公司，4.6mm×250mm，5μm）；测器：UV，215nm；流动相：甲醇－磷酸盐缓冲液（pH＝5.8）（40：60）；流速：1.0ml/min；进样量：20μl；柱温：20℃。
2.3线性范围与标准曲线 精密称取两主药对照品适量，置100ml容量瓶，0.1mol/LHCL定溶。
精密吸取2.0，4.0，6.0，8.0ml，10.0ml,置100mL容量瓶中,加入0.1mol/LHCL定容。
取20μl注入液相色谱仪，记录峰面积A，绘制标准曲线，进行线性回归［4］。
2.4精密度试验 精密称取对两主药适量,0.1mol/LHCL溶液配制含对乙酰氨基酚、盐酸曲马多浓度分别75μg/ml,150μg/ml,225μg/ml，8μg/ml,16μg/ml,28μg/ml3份溶液,测定其浓度。
2.5氨酚曲马多片含量测定方法 取本品10片，精密称定，研细，称取粉末适量（相当于对乙酰氨基酚32.5mg，盐酸曲马多3.75mg），置100ml容量瓶中，0.10.1mol/L盐酸定容。
经0.45μm的微孔滤膜滤过。
对照品的制备：取两主药对照品适量，按照2.3项配制系列浓度溶液，即得。
精密量取上述溶液20μL注入高效液相色谱仪，按标准曲线法计算标示百分含量。
3结果与讨论 3.1检测波长的确定 紫外扫描图谱显示：对乙酰氨基酚在243nm处有最大吸收，考虑两主药相差近10倍，在215nm波长处两者吸收系数较接近，盐酸曲马多灵敏度得到提高，同时考虑近紫外末端吸收的影响，因此选择215nm作为检测波长。
3.2HPLC同时检测对乙酰氨基酚和曲马多DiamonsilC18色谱柱（Dikma公司，4.6mm×250mm，5μm），流动相：甲醇－磷酸盐缓冲液（pH＝5.8）（40：60）；流速：1.0ml/min；检测波长：215nm，柱温：20℃。