苦参素氯化钠注射液质量标准的相关研究

【摘要】 目的 建立苦参素氯化钠注射液中苦参素含量及有关物质检测的高效液相色谱方法。方法 HypersilC18(5m，4.6mm200mm)色谱柱;流动相：三乙胺磷酸缓冲液(pH 7.2)—乙腈(80：20);流速1ml/min，检测波长210nm。取三批试药单点外标法测定苦参素含量，归一化法测定制剂中有关物质的含量。结果 苦参素浓度在12～1200g/ml范围内，峰面积(A)与浓度(C)线性良好，回归方程为(A)=15262759C+24440(r=0.9999)。日内日间RSD1%，平均回收率为100.6%。三批样品的含量分别为102.9%、102.4%和102.2%，三批样品有关物质的含量分别为0.31、0.31、0.32。结论 可以应用HPLC测定苦参素氯化钠注射液中苦参素的含量和有关的物质，该方法准确度和精密度高，检测限低，适合应用于该制剂的质量控制。 【关键词】 苦参素氯化钠注射液；高效液相色谱法；含量；有关物质 ; The study of quality about the injection of kurarinone and sodium chloride ; 【Abstract】 Objective To use liquid chromatograghy(LC)，and to detect the content of kurarinone and correlative matter in the injection of kurarinone and sodium chloride.Methods Chromatograghic column was Hypersil C18(5m.4.6mm200mm);mobile phase were the buffer solution of triethylamine phosphoric acid (pH 7.2);acetenitrile(80：20)，flow rate 1ml/min and detection wavelength was 210nm. To use extiernal standard method，detected　the　content　of　kurarinone in the three groups of reagent，detected the content of the correlative matter in the reagent with normalized method. Results We found that the content of kuarinoe was 12～1200g/ml，peak area(a). concentration(c)and linear regression were favorable， regression equation was A=15262759c+24440(r=0.9999)，and RSD1.in a day or next，the everage recovery was 100.6%， the econtent of kurarinone in the three groups of reagent were 102.9%，102.4% and 102.2%，the content of the correlative matter in the three groups of reagent were 0.31，0.31，and 0.32.Conclusion The study shows that we can detect the content of the kurarinone and correlative matter in the injection of kurarinone and sodium chloride with HPLC， The methods has very good accuracy and precision， it is suitable for the quality control of the reagent， with low detection limit.

毕业论文 ; 【Key words】 kurarinone sodium chloride injection;high—performance liquid chromatography(HPLC);content;correlalive matter; ; 苦参素(Oxymatrine)是从中药苦豆子中提取的生物碱，98%为氧化苦参碱，具有抗炎、抗菌、抗病毒、调节机体免疫功能等生物化学作用［1］。临床应用的苦参素氯化钠注射液为每瓶250ml，含0.2g苦参素和2.25g氯化钠，每次用3瓶，液体用量较大，静点时间较长，为了满足临床的需要开发了每瓶100ml，含苦参素0.6g和氯化钠0.9g的新制剂，从 而减少了临床应用次数和输液量，且缩短了静脉点滴时间。在参考国内文献基础上［2］，本实验建立了测定制剂中苦参素含量及有关物质的HPLC方法， 该测定方法为制剂的质量研究提供参考。 ; 1 仪器和试药 ; 1.1 仪器 Waters高效液相色谱系统(600E泵，712自动进样品，996PDA检测器，在线脱氧机，Millenium色谱管理系统)。 ; 1.2 试药 苦参素氯化钠注射液(规格100ml含苦参碱0.6g，氯化钠9g；批号：020621、020622、02623；生产厂家：哈尔滨康信药物技术开发有限公司)；苦参素对照品(黑龙江省药品检定所提供);乙腈为色谱纯，磷酸、三乙胺为分析纯。 毕业论文 ; 2 方法与结果 ; 2.1 色谱条件 色谱柱：HyperSilC18(5m，4.6mm200mm)柱；流动相：三乙胺磷酸缓冲（三乙胺１０ml溶于800ml水中，用磷酸调pＨ至7.2，再加水至1000ml）：乙腈（８０：２０v／v）;检测波：210nm;流速１ml/min;进样量２０l。 ; 2.2 系统适应性 分别取流动相，苦参素氯化钠注射液及苦参素对照品适量，流动相溶解并稀释得稀释溶液，另取苦参素原料适量两份，其中1份加6mol/L硝酸0.5ml，另1份加1mol/L氢氧化钠0.5ml，分别于60℃水浴４h后，用流动相稀释２０倍，得苦参素酸、碱破坏稀释溶液。取上述溶液２０l进样，色谱分离，结果苦参素的保留时间为6.353min，流动相无干扰峰，酸破坏后降解产物与苦参素分离良好，分离度＞1.5，见图1。 a 空白溶液；b 苦参素对照品；c 苦参素氯化钠注射液； d 酸破坏稀释溶液；e 碱破坏稀释溶液；1 苦参素 图1 系统适应性色谱图　　 2.3 线性实验 精密称取干燥恒重的苦参素的对照品３０mg，置２５ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度摇匀，得浓度为１.２mg/ml的溶液，用流动相逐级稀释使苦参素的浓度分别为0.24、0.12、0.048、0.024和0.012mg/ml的系列溶液，分别精密量以上溶液20l，按上述色谱条件进样，进行色谱分离，以峰面积（A）对浓度（C）进行回归，得回归方程为A＝1526275C+24440(r=0.9999，P0.05)。结果表明苦参素浓度在0.012～0.24mg/ml范围内浓度与峰面积的线性关系良好。 毕业论文 ; 2.4 最小检测限 取2.3项下浓度为0.012mg/ml的溶液，逐级稀释，进样20l，按上述色谱条件进行分离，以信噪比优于3：1为有效色谱峰，结果表明苦参素的最小检测限为2.6ng。 ; 2.5 溶液稳定性 取2.3项下浓度为0.12mg/ml的溶液，分别与0、1、3、5、7、10、15和20h进样20l，按上述条件进行色谱分离，结果20h内溶液稳定，浓度为（0.120.047）mg/ml，RSD为0.39%。 ; 2.6 精密度实验 取苦参素对照品适量，置于100ml容量瓶中，按处方量加入氯化钠和超纯水，分别制备苦参素处方标示量的80%、100%和120%三个浓度供试液。每个浓度制备5份，即，分别每日5次和每日1次连续5天制备，取上述各溶液20l进样，色谱分离纪录色谱峰，将色谱峰带入线性方程计算侧得值，计算精密度，结果RSD＜1%，见表1。 表1 密度实验结果。