缺氧诱导因子1α和Endostatin在乳腺浸润性导管癌中的表达及相

【摘要】 　　目的： 探讨乳腺浸润性导管癌组织中缺氧诱导因子1α和Endostatin的表达、两者的内在相关性及其与乳腺癌生物学行为之间的关系。 方法： 采用免疫组织化学SP方法，检测86例乳腺浸润性导管癌和12例乳腺良性肿瘤组织中缺氧诱导因子1α和Endostatin的表达。 结果： 86例乳腺浸润性导管癌组织中缺氧诱导因子1α阳性表达率为52.33%（45/86），Endostatin阳性表达率为46.51%（40/86），两者在乳腺良性肿瘤组织中均不表达（0/12）；缺氧诱导因子1α和Endostatin的表达率显著高于乳腺良性肿瘤组织，缺氧诱导因子1α和Endostatin表达率与乳腺浸润性导管癌患者临床分期、病理组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、5年生存率密切相关（P＜0.01），缺氧诱导因子1α的表达和Endostatin呈负相关（P＜0.01）。 结论： 在乳腺浸润性导管癌组织中，肿瘤血管生成通过缺氧诱导因子1α上调肿瘤的血管生成因子，或血管生成抑制因子Endostatin下调肿瘤的血管生成因子，来实现肿瘤组织的恶性发展或好转。缺氧诱导因子1α和Endostatin的表达可能成为评价乳腺浸润性导管癌临床分期、病理组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、5年生存率等生物学重要指标。

【关键词】 乳腺癌； 缺氧诱导因子1α； Endostatin； 免疫组织化学。

乳腺癌肿瘤细胞具有生长迅速，向正常组织浸润及转移扩散的特点。近年大量研究表明，乳腺癌肿瘤细胞的这些特性都与其周围组织的血管内皮生长有关。缺氧诱导因子1α又是调控血管内皮生长等众多靶基因表达的重要因子，它的表达水平升高使肿瘤细胞耐受缺氧，促进肿瘤生长，浸润和转移。而O＇Reilly［1］等于1997年发现的Endostatin具有抑制肿瘤血管生成和肿瘤转移最强烈、最特异的作用，能使肿瘤细胞迅速凋亡，残余肿瘤细胞进入休眠状态，但两者在乳腺癌研究中未见有报道。本研究旨在探讨乳腺浸润性导管癌组织中缺氧诱导因子1α和Endostatin的表达、两者的内在联系及其与乳腺癌生物学行为之间的关系。

1 材料与方法。

1.1 材料 　　来源于武穴市人民医院和武汉大学中南医院病理科1996～2005年档案材料，从中选取石蜡包埋的乳腺浸润性导管癌标本共86例，年龄30～70岁（平均46.9岁），乳腺良性肿瘤12例，年龄19～58岁（平均37.0岁），均为女性。临床分期：Ⅰ期10例（11.63%）、Ⅱ期46例（53.49%）、Ⅲ～Ⅳ期30例（34.88%）；病理组织学分级：Ⅰ期10（11.63%）、Ⅱ期31（36.05%）、Ⅲ期45（52.33%）、肿瘤大小：T1组≤2cm18例（20.93%）、T2组＞2cm，≤5cm58例（67.44%）、T3组＞5cm10例（11.63%）；淋巴结转移：无转移46例（53.49%）、转移40例（46.51%）；5年生存率：＞5年50例（58.14%）、≤5年36例（41.86%）。

1.2 方法 　　标本经10%福尔马林溶液固定，常规脱水包埋，厚3～4μm的连续切片，分别进行HE染色和免疫组织化学染色，缺氧诱导因子1α和Endostatin为兔抗人多克隆抗体，均购自武汉博士德生物工程有限公司。免疫组化步骤按SP试剂盒说明进行。PBS代替一抗作阴性对照，阳性对照片由试剂公司提供。

1.3 结果判定标准 　　缺氧诱导因子1α和Endostatin以细胞核或细胞浆内有棕黄色细颗粒为阳性。两者在高倍镜下（×400），着棕黄色颗粒细胞≤25%为阴性表达，＞25%为阳性表达。

1.4 统计学处理 　　应用SPSS13.0软件进行统计学分析，采用χ2检验、精确概率法和Spearman等级相关分析，P＜0.01，差异在统计学上有显著性意义。

2 结果。

2.1 缺氧诱导因子1α、Endostatin在乳腺浸润性导管癌和乳腺良性肿瘤组织上的表达 　　缺氧诱导因子1α阳性染色为棕黄色细颗粒，主要表达于细胞核，胞浆也有表达。Endostatin主要以细胞浆着棕黄色颗粒为主。86例乳腺浸润性导管癌组织中，缺氧诱导因子1α阳性表达率为52.33%（45/86），Endostatin阳性表达率为46.51%（40/86），两者在1例癌组织和12例良性肿瘤组织中均无表达。缺氧诱导因子1α、Endostatin阳性表达率明显高于乳腺良性肿瘤组织（P＜0.01）。

2.2 缺氧诱导因子1α和Endostatin的表达与乳腺浸润性导管癌临床分期、病理组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、5年生存率的关系。

表1 缺氧诱导因子1α和Endostatin的阳性表达（略）。

乳腺浸润性导管癌组织中缺氧诱导因子1α阳性表达率随临床分期增加而增高，Endostatin阳性表达率随临床分期增加而降低，不同乳腺浸润性导管癌临床分期的缺氧诱导因子1α和Endostatin阳性表达之间有显著差异（χ2H=72.223，χ2E=72.205，P＜0.01）；缺氧诱导因子1α阳性表达率随病理学分级增加而增高，Endostatin阳性表达率随病理学分级增加而降低，不同乳腺浸润性导管癌病理学分级的缺氧诱导因子1α和Endostatin阳性表达之间有显著差异（χH2=72.224，χ2E=72.246，P＜0.01）；缺氧诱导因子1α阳性表达率随肿瘤增大而增高，Endostatin阳性表达率随肿瘤增大而降低，不同大小乳腺浸润性导管癌分组中的缺氧诱导因子1α和Endostatin阳性表达之间有显著差异（χ2H=61.450，χ2E=61.257，P＜0.01）；淋巴结转移情况中，无转移或转移的缺氧诱导因子1α和Endostatin阳性表达之间有显著差异（χ2H=32.005，χ2E=29.848，P＜0.01）；乳腺浸润性导管癌患者中生存率＞5年或≤5年的缺氧诱导因子1α和Endostatin阳性表达之间有显著差异（χH2=33.184，χE2=31.191，P＜0.01）。