《中国药典》收载附子3种加工品中生物碱的含量分级对比测定

作者：余葱葱，彭成，郭力，叶强。

【摘要】 　　目的系统对比研究盐附子、黑顺片、白附片3种附子加工品的生物碱含量。方法采用常用滴定、UV、HPLC方法分别测定附子3种加工品的总生物碱，酯型生物碱，乌头碱、乌头次碱、新乌头碱等双酯型生物碱的含量。结果盐附子同黑顺片、白附片相比，总生物碱含量下降80%～85%，酯型生物碱下降70%～85%，乌头碱等等双酯型生物碱下降90%以上，其中乌头碱下降92%以上。结论在生物碱含量方面，盐附子与黑顺片、白附片有显著差异，后二者差异较小。建议新版药典单列盐附子质量控制标准。

【关键词】 分级对比　加工品　生物碱。

Abstract：ObjectiveTo research alkanoid contents in 3 kinds of prepared Radix Aconiti Lateralis Praeparata:salty Aconiti Root,black slice of Aconiti Root,white slice of Aconiti Root.MethodsNormal titration method,UV,HPLC were used to determine the total alkanoid,esteralkanoid,doubleester alkanoid involved aconitine,hypaconitine,mesaaconition.ResultsCompared with black slice of Aconiti Root and white slice of Aconiti Root,the total alkanoid declined 80%～85% esteralkanoid declined 70%～85%,doubleester alkanoid declined over 90% in salty Acontit Root.ConclusionIn term of alkanoid, there is significant difference between Salty Aconiti Root and black slice of Aconiti Root,white slice of Aconiti Root.Black slice of Aconiti Root is similar with white slice of Aconiti Root in alkanoid content.It is recommended that salty Aconiti Root is unilined in new edition Chinese Pharmacopoeia.

Key words： Radix Aconiti Lateralis Praeparata； Processing； Alkanoid 　　附子Radix Aconiti Lateralis Preparata来源于毛茛科乌头属植物乌头Aconitum carmichaeli Debx．的侧生子根及加工品。是四川道地药材之一［1］。《中国药典》［2］2005版附子项下规定了盐附子、黑顺片、白附片3种加工品，其中盐附子在炮制淡附片和炮附片时使用，临床是否直接使用未作规定；黑顺片、白附片为可直接入药的加工品种。在药性、药效和质量控制上3者并无明确区分。对生品与炮制品含量研究多有报道［2～4］，但均以单一方法为主，不能从整体上反映中药药性和毒效物质基础的特征。本课题拟采用适用性较好的滴定［1］、UV［1］、HPLC［4］对比测定3种加工品中总生物碱、酯型生物碱和乌头碱的含量，为规范附子不同加工品种的质量控制提供实验依据。

1 仪器与材料。

1.1 仪器HPLC岛津LC10ATVP液相色谱仪，SPD10AVP紫外检测器，N2010数据处理软件；分光光度计，PerkinElmer Lambda35型；pHS2型酸度计(上海雷磁仪器厂) ； Sartorius系列十万分之一电子分析天平（德国）；R501B旋转蒸发器(上海申顺生物科技有限公司)；容量仪器均经校正。

1.2 对照品新乌头碱(1107999403)、乌头碱(110720200208)、次乌头碱(1107989403)对照品购自中国药品生物制品检定所。

1.3 试剂甲醇为色谱纯；淀粉为药用级；乙醇、溴甲酚绿、氯仿、硫酸、盐酸羟胺、高氯酸、乙醚、氨水皆为分析纯。实验用水为重蒸水，其他试剂自备。

1.4 药材盐附子、黑顺片、白附片购于四川省江油市恒源药业有限公司。盐附子、黑顺片、白附片为附子加工品，质量符合《中国药典》2005版Ⅰ部规定。经成都中医药大学中药鉴定教研室严铸云教授鉴定为乌头Aconitum carmichaeli Debx．的侧生子根。

2 方法与结果。

2.1 溶液的制备。

2.1.1 对照品溶液的配制。

2.1.2 供试品溶液的制备取药材粗粉(1号筛)适量（白附片5 g，黑顺片5 g，盐附子1 g），精密称定，置具塞锥形瓶中，用氨水1 ml润湿，用乙醚—氯仿(3∶1)（总碱）50 ml冷浸24 h，滤过，残渣用50 ml混合液洗涤3次，合并洗液和滤液置蒸发皿中，水浴低温蒸干，残渣加混合液5 ml溶解，蒸干，加适量溶剂使溶解，定容于5 ml。

2.2 总生物碱含量测定照《中国药典》2005年版Ⅰ部制川乌含量测定项下方法［1］，供试品精密加入硫酸液(0.01 mol／L)10 ml,水10 ml与甲基红指示液3滴，用氢氧化钠液(0.02 mol／L)滴定至黄色。每毫升硫酸液(0.01 mol／L)相当于12.9 mg的C34H47NO11。求得总生物碱含量。结果表1。表1 不同加工品总生物碱含量测定结果（略）。

结果表明，盐附子总生物碱含量是另两种加工品的5～6倍，黑顺片与白附片差别较小。

2.3 酯型生物碱含量测定。

2.3.1 最大吸收波长的确定。

照《中国药典》［1］2005年版Ⅰ部制川乌项下含量测定，将乌头碱碱性盐酸羟胺显色溶液在波长400～600 nm进行紫外扫描，在520 nm处有最大吸收，与药典中520 nm一致，故选择520 nm为测定波长。