霉茶总黄酮在大鼠体内的药代动力学
作者：王桂红，刘丹，吴杰，邴飞虹，张国斌，郑国华。
【摘要】 目的研究霉茶总黄酮在大鼠体内的药代动力学。方法以蛇葡萄素为指标，高效液相色谱法(HPLC)测定给药后大鼠血清中蛇葡萄素的浓度。结果大鼠灌胃0.5 h后血清中即可检测出蛇葡萄素，霉茶总黄酮在大鼠体内呈一室模型分布，且药物在高、中、低剂量时的药物浓度变化比较一致。结论HPLC法适用于测定大鼠体内霉茶总黄酮血药浓度，总黄酮在大鼠体内吸收很快，浓度对药物的体内代谢行为没有明显影响。
【关键词】 霉茶总黄酮； 蛇葡萄素； 药代动力学； 大鼠； 高效液相色谱法。
霉茶系葡萄科蛇葡萄属植物大叶蛇葡萄Ampelopsis.megalophylla Diels et. Gilg的枝叶加工而成，其主要活性成分为霉茶总黄酮，临床上用于降血压、降血脂［1］。有关霉茶总黄酮的药代动力学研究报道较少，为了进一步了解霉茶总黄酮的降压机制，本实验对霉茶总黄酮在大鼠体内的药代动力学进行了研究。
1 材料与仪器。
1.1 药品与试剂。
霉茶总黄酮、蛇葡萄素对照品（自制），乙腈(色谱纯)，霉茶总黄酮用4% CMC—Na溶液加热溶解成所需浓度。
1.2 动物。
SD大鼠，体重200～250 g，雌雄各半，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供，许可证号：SCXY（鄂）2004—00070。室温18～20℃，实验期间饲以该中心提供的固体饲料，自由饮水。
1.3 仪器。
LG16—W型离心机（北京医用离心机厂）；XW—80A旋涡混合器（上海医科大学仪器厂）；Agilent—1100系列高效液相色谱仪（四元泵）、紫外检测器及配套色谱工作站；Mettler—Toledo AG285型分析天平。
2 方法。
2.1 色谱条件。
色谱柱为Aichrom Bond—AQ C18（5 μm，4.6 mm×250 mm）； YWG—C18 保护柱，检测波长为292 nm，流动相为乙腈—0.2%磷酸水（25∶75），流速为1.0 ml·min—1；柱温：30℃；进样量：5 μl。
2.2 血液样品的制备与处理［2］。
取36只大鼠，禁食过夜，随机分为霉茶总黄酮高、中、低3个剂量组（灌胃剂量分别为：360，180，90 mg·kg—1），每只大鼠取6个时间点、3个平行，单次灌胃给药后分别于0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0，10.0，12.0 h眶静脉取血0.5 ml，4 000 r·min—1离心10 min，分离出血浆，定量吸取血浆0.2 ml，加0.6 ml乙腈沉淀蛋白，涡流混旋10 min，4 000 r·min—1离心10 min，取上清液，滤膜滤过(0.45 μm)，进样5 μl，以峰面积进行定量。
分别精密称取蛇葡萄素对照品适量，以甲醇溶解并稀释至刻度配制成不同浓度的对照品储备液（1 200，800，600，400，200 μg·ml—1），4℃保存备用。精密吸取蛇葡萄素对照品储备液适量，加甲醇定容，梯度稀释为800，200，120，80，40，8，4 μg·ml—1的对照品溶液。
分别精密吸取上述稀释的系列对照品溶液各0.1 ml，然后用大鼠空白血浆分别定容至1 ml，使血浆浓度分别为80，20，12，8，4，0.8，0.4μg·ml—1的对照品溶液。
2.5 数据处理 药物代谢动力学参数由MCPKP软件计算［3］。