车前草中乌索酸和齐墩果酸含量的反相高效液相色谱法测定
【关键词】 车前草；,,乌索酸；,,齐墩果酸；,,高效液相色谱法 毕业论文。
摘要：目的采用反相高效液相色谱（RP—HPLC）法测定车前草中主要成分乌索酸和齐墩果酸的含量。 方法 采用高效液相色谱法。使用Nova—Pak C18柱（3.9 mm×300 mm，4 μm)，流动相为甲醇：水(88：12，V/V)，流速为0.8 ml/min，检测波长为210 nm，柱温25 ℃。结果乌索酸在0.456~4.104 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 7)，平均回收率为98.2 %，RSD=1.1 %；齐墩果酸在0.156~1.384 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 6)，平均回收率为101.6％，RSD=1.7％。结论方法灵敏、准确、专属性强，重现性好，可作为车前草药材的质量控制方法。 论文网。
关键词：车前草； 乌索酸； 齐墩果酸； 高效液相色谱法 代写论文。
Determination of Ursolic Acid and Oleanolic Acid in Plantago asiatica L.by RP—HPLC 论文代写。
Abstract:ObjectiveTo establish a method for determining ursolic acid and oleanolic acid in Plantago asiatica L. by high performance liquid chromatography. Methods The separation was carried out on Nova—Pak C18 column（3.9 mm×300 mm, 4 μm) with methanol —water (88:12,V/V) as the mobile phase，at a flow rate of 0.8 ml/min. The detection wavelength was set at 210 nm. The column was used at 25℃. ResultsUrsolic acid showed a good linear relationship in the range of 0.456~4.104 μg (r=0.9997) and the average recovery was 98.2 %, RSD was 1.1% . Oleanolic acid showed a good linear relationship in the range of 0.156~1.384 μg (r=0.999 6) and the average recovery was 101.6 %, RSD was 1.7%．ConclusionThe method is sensitive,accurate and specific with a good repeatability and can be used for the quality control of Plantago asiatica L. 代写论文。
Key words:Plantago asiatica L； Ursolic acid； Oleanolic acid； HPLC 车前草，又名车前、牛舌菜、五根草、当道、鱼草等，为车前科植物车前 Plantago asiatica L. 或平车前 Plantago degresa Willd. 的干燥全草。多年生草本，叶片形状如饭匙，五条明显的弧形叶脉，淡绿褐色穗状花序，数支花茎凸出于饭匙形叶片中间地带，形状特殊，极易辨识，为中医常用药物。车前草主要含有桃叶珊瑚苷、芳香醇、香芹酚、车前苷、乌索酸、齐墩果酸、β—谷甾醇、棕榈酸、β—谷甾醇脂、维生素等化学成分［1］。其药理活性广泛，有利水通淋、清热名目、护肝降压、降低血清胆固醇、祛痰、抗菌、抗炎、抗肿瘤等作用。临床上用来 治疗 尿频、尿急、尿血、肾小球肾炎、脐炎、湿疮等疾病。近年来又发现其对治疗高血压病、慢性活动性肝炎［2~4］ 、产后尿潴留等［5］有较好作用。车前草资源丰富，用途广泛，且毒副作用小，有广阔的 应用 前景。我们采用 HPLC法对其抗肝炎、抗肿瘤、抗病毒、抗炎抑菌主要成分乌索酸和齐墩果酸的含量进行了测定，为控制药材质量提供依据。 代写论文。
1 仪器与试药。
毕业论文。
1.1 仪器美国 Waters515双泵型高效液相色谱仪，2996光电二极管矩阵检测器，77251进样阀，20 μl定量环，Enpower中文色谱管理系统， Nova—Pak C18色谱柱(3.9 mm×300 mm，4 μm，Waters公司)；RO—MB—10 D高纯水机（杭州永洁达膜分离设备厂）；FC204N 电子 分析 天平(上海天平仪器厂)；202—26A型数显电热恒温干燥箱（上海阳光实验仪器有限公司），KS—150超声提取仪器 (宁波科盛仪器厂)。
1.2 试药甲醇为色谱纯（上海陆忠试剂厂），水为高纯水，95%乙醇(分析纯，江西同盟试剂化工厂）。乌索酸和齐墩果酸对照品（ 中国 药品生物制品检定所提供，批号：110742—200314，110709—200311，供含量测定用)。车前草购于江西省宜春市药材市场，经本所天然药物 研究 室鉴定为车前Plantago asiatica L.的干燥全草。 代写论文。
2 方法与结果。
2.1 色谱条件色谱柱：Nova—Pak C18柱(3.9 mm×300 mm，4 μm，带保护柱)；流动相为甲醇：水（88：12，V/V)，流速为0.8 ml/min；柱温为25 ℃；检测波长为210 nm。以美国药典方法 计算 ，乌索酸和齐墩果酸 理论 塔板数均大于9 000。乌索酸和齐墩果酸对照品及车前草样品的 HPLC色谱见图1。 毕业论文。
2.2 对照品溶液的配制精密称取干燥至恒重的乌索酸对照品22.8 mg和齐墩果酸对照品7.8 mg，置于10 ml容量瓶中，加入适量甲醇溶解，用甲醇定容，得对照品储备液。精密吸取1 ml储备液置10 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混合均匀，制成乌索酸和齐墩果酸的浓度分别为0.228 μg/μl和0.078 μg/μl对照品混合溶液，备用。
2.3 样品溶液的制备将车前草样品置烘箱中90℃烘干12 h，研细后精密称取约4 g，置于具塞三角烧瓶中，加入10倍量95%乙醇，采用超声法提取60 min，过滤，药渣洗涤两次，合并滤液于50 ml容量瓶中，加乙醇定容至刻度，摇匀。滤液用0.2 μm的滤膜过滤，得车前草提取物的样品溶液。 论文网。
2.4 线性范围实验分别精密吸取对照品的混合溶液2.0，6.0，10.0，14.0，18.0 μl进样分析，按2.1所述色谱条件测定峰面积，以对照品的进样量(μg)为横坐标，以峰面积（μV・s）为纵坐标，进行线性拟合，乌索酸和齐墩果酸的回归线方程分别为：Y乌索酸=5.18×105X—4.36×104 (r=0.999 7)，Y齐墩果酸=6.21×105X—6.32×104 (r=0.999 6) 。表明当乌索酸进样量在0.456~4.104 μg，齐墩果酸进样量在0.156~1.384 μg范围内线性关系良好。