棉酚原料药的理化性质及稳定性研究
作者：黄洪勇，唐辉，关丽，代友彪，杨四涛。
【摘要】 目的在临床前研究中，考察棉酚原料药的理化性质和稳定性。方法采用红外光谱图、薄层色谱法（IR、TLC）等方法进行理化鉴别，以相关评价指标为依据考察棉酚的稳定性。结果研究方法操作简便、灵敏度和准确度高、重复性好。结论棉酚对高热、光照、高湿均不稳定。
Abstract：ObjectiveTo investigate the physico—chemical property and stability of Gossypol．MethodsIR and TLC methods were used to identify the characterization，and the stability was investigated on the base of correlated evaluation index．ResultsThe method was convenient,sensitive,accurate and repeatable．ConclusionThe stability test showed that Gossypol is unstable under the high fever,light and humidity．。
Key words：Gossypol； Physico—chemical property； Stability。
棉酚(Gossypol)又称棉籽醇，是一种天然存在于锦葵科的黄色酚类化合物，化学名为2,2′联二萘—8,8′二醛基—1,1′6,6′7,7′六羟基—5,5′二异丙基—3,3′二甲基，结构见图1。可溶于多种有机溶剂，如丙酮、氯仿、乙醇及乙醚等，但不溶于水及低沸点的石油醚。现代医学研究表明，棉酚具有抗生育作用、抗肿瘤作用、抗病毒和抗菌作用等［1～3］。
目前，在临床前研究中尚无棉酚原料药理化性质及其稳定性研究的文献报道。本实验对采用新工艺自制的高纯度棉酚进行了理化性质和稳定性研究。
1 器材。
日本岛津UV—2401PC紫外分光光度计；Nicolet—380型智能傅立叶红外光谱仪；德国SartoriusBP211D电子天平；北京泰克X—5型显微熔点测定仪；宁波东南RXZ—300C型智能人工气候箱；中国上海科学院2X—91旋转蒸发仪；成都唐氏AKRY—1860艾柯超纯水机。
棉酚对照品(美国SIGMA公司，Lot20k4057)；棉酚样品(自制，批号：071016、071228、080313)；聚酰胺薄层层析板(安徽皖西硅源材料厂，批号：071126)；氯仿、正己烷、冰醋酸均为分析纯；水为超纯水；其余试液均按《中国药典》(2005版)Ⅱ部附录XVB配制。
2 方法与结果。
2.1 理化性质。
2.1.1 熔点与溶解度取60℃减压干燥至恒重的棉酚样品适量，以X—5显微熔点测定仪(使用前已校正)测定，每份样品重复测定3次。按照溶解度测定的方法，考察样品的溶解情况。棉酚的熔点为180.0～182.0℃，在丙酮、氯仿、甲醇、乙醇及乙醚中易溶；在环己烷、高沸点石油醚中微溶；在水、低沸点石油醚中不溶。
2.1.2 薄层色谱以重蒸氯仿为溶剂，配制质量浓度为0.2 mg·ml—1的棉酚对照品及样品溶液，分别以自动定量点样器点样20 μl于聚酰胺板。于20℃条件，以正己烷—氯仿—冰醋酸(80∶20∶7)为展开剂上行展开1 h，自然光下目视观察，棉酚样品斑点与对照品一样，呈现亮黄色，比移值Rf为0.60。
2.1.3 红外吸收光谱按《中国药典》2005年版Ⅱ部附录Ⅳ C红外分光光度法，采用溴化钾压片法测定。见图2。红外吸收光谱特征与棉酚结构相符。
2.2 稳定性实验。
2.2.1 对照品储备液的制备。
称取棉酚对照品约2 mg，精密称定，重蒸氯仿溶解并转移至100 ml容量瓶中，定容至刻度，即得。
2.2.2 检测波长的确定。
以对照品储备液在紫外全波段扫描，其在364.5，288.5，211.5 nm处均有较强吸收。而364.5 nm处吸收峰无干扰，且正态分布，故选定364.5 nm为检测波长。
2.2.3 标准曲线的制备分别精密量取对照品储备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml至10 ml容量瓶，定容至刻度，摇匀，得系列浓度的棉酚对照品溶液。以重蒸氯仿为空白对照，在364.5 nm处测吸光度，以吸光度(A)为横坐标，质量浓度(C)为纵坐标进行线性回归，得标准曲线方程C=17.27A—0.066 7，(r=0.999 8，n=5)，在2.0～10.0μg·ml—1范围内C与A呈良好的线性关系。
2.2.4 精密度实验。
称取棉酚对照品约1mg，精密称定，重蒸氯仿溶解并转移至50 ml容量瓶中，按“2.2.3”项下同法处理，分别于0，15，30，45，60，120 min测定棉酚含量，计算日内精密度；1次/d，一共6次，计算日间精密度。结果日内RSD为0.9%；日间RSD为1.5%，表明棉酚比较稳定，重复性较好。