反相高效液相色谱法测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度
【摘要】 目的 建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的HPLCFLD法。方法 以DiamonsilTM C18反相柱(250 mm4.6 mm，5 m)为色谱柱，流动相为乙腈0.03 molL—1醋酸铵(体积比45∶55，调pH=6.0)，流速为0.8 mLmin—1，激发波长：235 nm，发射波长307 nm，以正己烷异戊醇(体积比95∶5)为提取剂。结果 艾司西酞普兰的高(25 gL—1)、中(10 gL—1)、低(1.5 gL—1)3个浓度的平均回收率分别为95.29%、97.01%和97.22%，日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为0.5 gL—1，线性范围为0.5～50 gL—1,回归方程为=20.93A—0.015，r=0.999 9(n=7)。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速，可用于临床血浓监测和药动学研究。
开题报告 /html/lunwenzhidao/kaitibaogao/。
思想汇报 /sixianghuibao/。
Abstract:Objective To set up an RPHPLC method for content determination of escitalopram in human plasma.Methods Escitalopram was extracted with hexaneisoamyl alcohol. The residues were analyzed on an RPHPLC column (Diamonsil C18, 5 m, 4.6 mm250 mm) using a mobile phase consisting of acetonitrile0.03 molL—1 NH4Ac (45∶55，pH6.0). The fluorimetric excitation and emission wavelength was 235 and 307 nm, respectively.Results The average recoveries of three concentrations of escitalopram(25,10, 1.5 gL—1) were 95.29%, 97.01% and 97.22%, respectively. Inter (n=3) and intraday(n=5) assay RSD were less than 15%. The calibration curve was linear over the range of 0.5—50 gL—1 ( r = 0.999 9, n=7)and the limit of quantitation for escitalopram was 0.5 gL—1. Conclusion The method is sensitive, accurate, precise and reliable for clinical monitoring of plasma escitalopram. 毕业论文。
Key words:escitalopram;plasma concentration;RPHPLC 代写论文。
艾司西酞普兰(escitalopram，ETP)是新一代的抗抑郁药物，其对5羟色胺重吸收抑制剂的相对选择性在同类药物中最高，能有效抑制5羟色胺的再摄取，具有很强的抗抑郁作用。目前该药由西安杨森制药股份有限公司首次在国内上市。其检测方法国外采用高效液相色谱法[1—2]和LCMS检测法[3]。为便于进行血药浓度监测和药动学研究，本文参照文献[4]建立了以度洛西汀为内标的测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的HPLCFLD法。 开题报告 /html/lunwenzhidao/kaitibaogao/。
1、仪器与试药 论文代写。
1.1仪器。
开题报告 /html/lunwenzhidao/kaitibaogao/。
Agilent1100 HPLC仪配荧光检测器G1321A，G1313A自动进样器，G1311A自动调配泵，G1316A可调柱温恒温箱，Agilent色谱化学工作站(美国惠普);旋涡混合器(原上海医科大学仪器厂);电子天平(瑞士SARTORIUS);MICRO1224高速离心机(美国);MMMGROUP真空干燥箱(德国)。 毕业论文。
1.2药品和试剂 开题报告 /html/lunwenzhidao/kaitibaogao/。
草酸艾司西酞普兰对照品(西安杨森制药有限公司，批号：050608，质量分数99.5%)，内标物为度洛西汀(美国礼来公司，批号：050621，质量分数99.8%)。乙腈(色谱纯，迪马公司)，水为超纯水，其余均为分析纯。 毕业论文。
1.3对照品和内标溶液。
论文代写。
精密称取草酸艾司西酞普兰适量(含艾司西酞普兰10.0 mg)加乙腈溶解并定容至10 mL，于冰箱4 ℃避光保存。临用时用乙腈水(体积比50∶50)稀释成所需浓度的艾司西酞普兰对照品溶液。度洛西汀浓度为10 mgL—1的乙腈溶液。
代写论文。
2、方法与结果 总结大全 /html/zongjie/。
2.1色谱条件。
简历大全 /html/jianli/。
DiamonsilTM C18反相柱为色谱柱(迪马公司，4.6 mm250 mm, 5 m)，流动相为乙腈0.03 molL—1 醋酸铵(体积比46∶54)，用甲酸调pH=6.0)，流速0.8 mLmin—1，柱温30 ℃;激发波长：235 nm，发射波长307 nm。艾司西酞普兰和度洛西汀的保留时间分别为6.3 min和8.5 min。见图1。 作文 /zuowen/。
图1艾司西酞普兰HPLC色谱图 略 总结大全 /html/zongjie/。
2.2样品处理。
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取1 mL含药血浆加至10 mL锥形玻璃离心管中，加入10 mgL—1的度洛西汀溶液50 L，快速振荡5 s，加入0.1 molL—1的氢氧化钠溶液0.2 mL，振荡5 s。加入3 mL正己烷异戊醇(体积比95∶5)密塞，旋转振荡30 s，3 000 rmin—1离心10 min，吸取有机层转入5 mL锥形玻璃离心管内，30 ℃真空干燥至干。进样前加入0.1 mL乙腈水(体积比50∶50)溶解，快速振荡10 s溶解残渣，吸取10 L进样。 总结大全 /html/zongjie/。
2.3标准曲线的制备。
思想汇报 /sixianghuibao/。
取空白血浆1 mL 8份，分别加入0、10、20、50、100、200、500、1 000 gL—1浓度的艾司西酞普兰对照品溶液，振荡5 s，使血浆药品质量浓度相当于0、0.5、1、2.5、5、10、25、50 gL—1，然后按血样处理方法处理。经HPLC分析，测得ETP峰面积与内标峰面积之比(A)作横坐标，以血浆ETP质量浓度()为纵坐标，得到0.5.～50 gL—1范围的血浆ETP浓度标准曲线。直线方程为：=20.93A—0.015，r=0.999 9。当RS/N=3时,最低检测浓度为0.5 gL—1。分别取5个不同来源空白血浆1 mL，分别加入10 gL—1的艾司西酞普兰乙腈溶液50 L，按照2.2项操作，测得结果为(0.540.03) gL—1，RSD为4.75%。
作文 /zuowen/。
2.4回收率及精密度试验。
取高、中、低3种浓度(25、10、1.5 gL—1)制作提取前和提取后的2组样品，经色谱分析，以峰面积比较,得到的提取回收率均大于90%。按2.3项下方法分别配制高、中、低3种浓度样品，在1 d内和分散于2周内测定其浓度，计算日内、日间误差及相对回收率。结果见表1。 简历大全 /html/jianli/。
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按2.3项下方法分别配制高、中、低3种浓度(25、10、1.5 gL—1)的3组血浆样品,分别在室温(放置6、12、24 h )、长期冻存(—20 ℃冻存1、2、3 星期)和冻融(1、2、3次)条件下分别进行色谱测定，结果见表2。 总结大全 /html/zongjie/。
表1回收率与日内、日间精密度 略。
代写论文。
表2稳定性考察 略 思想汇报 /sixianghuibao/。
2.6质控样品的监控 总结大全 /html/zongjie/。
按2.3项下方法分别配制高、中、低3种浓度(25、10、1.5 gL—1)置—20 ℃冻存，备用，此即为质控样品。每天检测血样品前须按照2.3项方法制作随行标准曲线及检测高、中、低3种浓度双份质控样品，如果相对回收率均在85%～115%(低浓度可在80%至120%之内)内时，即可认为仪器检测正常，否则须检查整个操作过程以及仪器原因。 论文代写。
2.7临床检测实例 毕业论文。
40例抑郁症患者，男25例，女15例，年龄19～73岁，平均(2311)岁，连续服药14 d血药浓度达稳态后测定艾司西酞普兰浓度，结果：15例口服5 mgd—1，平均稳态血药浓度为(15.148.00) gL—1;22例口服10 mgd—1，平均稳态血药浓度为(19.088.81) gL—1;3例口服15 mgd—1，平均血药浓度为(62.0823.74) gL—1。
作文 /zuowen/。
3、讨 论 代写论文。
3.1测定波长的选择。