高效液相色谱法测定补脾益肠胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量
【摘要】 目的 建立补脾益肠胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定方法。
方法Hedera ODS C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱，流动相为甲醇∶水（58∶42），检测波长为245 nm。
结果 补骨脂素的线性范围为0.020~0.30 μg，r=0.999 8 (n=7)，平均加样回收率为100.61%，RSD为1.86%（n=5）；异补骨脂素的线性范围为0.038~0.266 μg，r=0.999 9 (n=7)，平均加样回收率为100.76%，RSD 为1.60%(n=5)。
结论 该方法简便，准确，重现性好，可以应用于补脾益肠胶囊的质量控制。
【关键字】 补脾益肠胶囊；补骨脂素；异补骨脂素；高效液相色谱法 【Abstract】 Oobjective To establish the method for determination of psoralen and isopsoralen in Bupi Yichang Capsules. Methods The Hedera ODS C18(250 mm×4.6 mm,5 μm) was used. The mobile phase consisted of methanol—water (58∶42).The flow rate was 0.8 ml/min.The detection wavelength was set at 245 nm. RESULTS The linear range of psoralen was 0.020—0.30 μg, r=0.999 8,the average recovery was 100.61% with RSD of 1.86%. The linear range of isopsoralen was 0.038—0.266 μg, r=0.999 9, the average recovery was 100.76% with RSD of 1.60%. CONCLUSION It is a simple and accurate method for the quality control of Bupi Yichang Capsules. 【Key words】 Bupi Yichang Capsules;psoralen; isopsoralen；HPLC 补脾益肠胶囊是将原补脾益肠丸中生药组分经提取后制得，由黄芪、补骨脂、党参、白芍、白术、延胡索、当归、砂仁、木香、防风、赤石脂、甘草等组成，具有补中益气，健脾和胃，涩肠止泻，止痛止血，生肌消肿作用。
用于脾虚泄泻症，临床表现为腹泻腹痛、腹胀、肠鸣、黏液血便或阳虚便秘等证，以及慢性结肠炎、溃疡性结肠炎、结肠过敏见有上述证候者[1]。
原补脾益肠丸为胃肠分溶型丸剂，外层在胃中溶散，在肠中吸收，以发挥全身的作用治其本，而内层在肠道中溶散，提高病灶部位的药物浓度，以提高药物局部作用治其标。
补脾益肠胶囊保留了原制剂的这一特点，将胃溶部分提取物包薄膜衣，肠溶部分提取物包肠溶衣后装入胶囊。
胃溶部分中的黄芪、党参为方中君药。
肠溶部分中的补骨脂为方中臣药，除甘草为使药外，其余均为佐药。
现代药理研究表明，补骨脂提取物具有抗菌、抗病毒作用，其水提液具有增强免疫的作用[3]。
此外，补骨脂与赤石脂组成的止血复方中发现有效成分为补骨脂素[4]，因此本文以补骨脂素和异补骨脂素为本方中肠溶部分的指标性成分，采用高效液相色谱法对其含量进行测定，以控制产品的质量。
1 仪器与试药 1.1 仪器SHIMADZU LC—10ATvp型高效液相色谱仪（日本岛津），SPD—10Avp型紫外检测器（日本岛津）；Hedera ODS C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱；KQ—100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；BS124S电子天平（德国赛多利斯）。
1.2 试药补脾益肠胶囊浸膏（深圳三九医药业股份有限公司提供），补骨脂素（批号：110739—200613，中国药品生物制品检定所），异补骨脂素（批号：110738—200511，中国药品生物制品检定所），色谱纯甲醇，纯净水。
2 方法与结果 2.1 色谱条件 流动相：甲醇∶水（58∶42）；流速：0.8 ml/min；柱温：室温；检测波长：245 nm[5]。
2.2 供试品溶液的制备 取补脾益肠胶囊浸膏1 g，精密称定，置50 ml容量瓶中，加甲醇约45 ml，超声30 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液10 ml即得。
2.3 对照品溶液的制备 分别精密称取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每毫升各含0.1 mg的对照品溶液，临用时稀释到适当浓度。
2.4 空白对照试验 按本制剂的处方、工艺提取不含补骨脂药材的浸膏，按上述2.2方法制备阴性对照溶液。
照上述色谱条件，吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各20 μl，分别注入液相色谱仪。
结果见图1。
补骨脂素的保留时间为10.4 min，异补骨脂素的保留时间为11.7 min，二者的分离度为3.0，理论塔板数均在15 000以上，表明补骨脂素和异补骨脂素能够良好的分离，且方中的其他成分不干扰补骨脂素和异补骨脂素的测定。