p53、 bcl2和CD44v6蛋白表达与乳腺癌转移的相关性研究
【摘要】 目的 探讨乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中p53、bcl2和CD44v6蛋白的表达及意义。方法 采用免疫组化法检测96例乳腺癌及其癌旁正常乳腺组织中p53、bcl2和CD44v6蛋白的表达，并分析其与淋巴结转移和cerbB2表达状态的相关性，从而评价这些指标在预测乳腺癌转移方面的价值。结果 正常乳腺组织中p53蛋白为阴性，在乳腺癌中阳性表达率为65.63%；随着组织学分级的增高，阳性率逐渐增高；淋巴结转移组阳性表达率明显高于无淋巴结转移组，并与cerbB2表达状态呈正相关。乳腺癌组织中bcl2阳性表达率明显低于周围正常乳腺组织，随着组织学分级的增高，阳性率逐渐降低，淋巴结转移组中的表达率明显低于淋巴结非转移组，与cerbB2的表达呈负相关。CD44v6在乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于正常乳腺组织，随着组织学分期的增加, CD44v6的阳性表达率亦增高, 但差异无显著性，淋巴结转移组的阳性率略高于无淋巴结转移组，差异也无显著性，与cerbB2表达无相关性。结论 p53和bcl2蛋白可作为预测乳腺癌转移的指标, CD44v6的阳性表达可能与乳腺癌的发生、进展有一定关系，但尚不能把它作为预测乳腺癌转移的稳定的生物学指标。
【关键词】 乳腺肿瘤 p53 bcl2 CD44v6。
0 引言。
乳腺癌为女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁妇女的身体健康，寻找与乳腺癌转移相关的生物标志物对指导临床治疗具有重要的意义。p53、bcl2和CD44v6蛋白在多种癌的发生、发展中起重要作用，本研究采用免疫组化方法观察了这三种标志物在乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织中的表达情况，并分析其与淋巴结转移和cerbB2表达状态的相关性，从而探讨这些指标在预测乳腺癌转移方面的价值。
1 材料与方法。
1.1 材料。
随机抽取我院乳腺浸润性导管癌根治手术标本96例，均为女性患者，年龄26～51岁，平均36.9岁。每例均有详细的临床资料、手术记录，术前均未接受化、放疗，无远处转移，其中有淋巴结转移者56例。根据ElstonEllis改良的SBR分级系统对乳腺癌组织进行分级[1]，Ⅰ级(低度恶性)28例，Ⅱ级(中度恶性)32例，Ⅲ级(高度恶性)36例。
1.2 方法。
对标本中的乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织进行p53、 bcl2、CD44v6和cerbB2蛋白表达检测， 检测方法为免疫组化染色法（Envision法）。 Envision试剂盒购自Dako公司。 p53抗体为鼠抗人单抗DO7， bcl2抗体为鼠抗人单抗124, CD44v6抗体为鼠抗人单抗DF1485, 及cerbB2检测试剂盒均购自DAKO公司。 一抗稀释浓度为1∶100。 检测步骤参照Sabsttini的方法[2]。 PBS代替一抗作为阴性对照， 阳性对照为试剂盒提供的阳性乳癌切片。
1.3 结果判断。
随机选择10个高倍视野，对免疫组化结果进行评估。p53蛋白染色的判断标准为[3]：细胞核未见染色颗粒为阴性；阳性细胞数30%为弱阳性；阳性细胞数占30%～70%者为中度阳性；阳性细胞数70%为强阳性。CD44v6蛋白染色的判断标准为[4]：阳性物质棕黄色位于细胞膜，以阳性细胞数量占细胞数的15%以上为阳性，阳性细胞数低于细胞总数的15%或全部不着色为阴性。bcl2蛋白染色的判断标准为[5]：阳性细胞占全部细胞的25%以下为弱阳性，25%～50%为中度阳性，50%以上为强阳性。cerbB2蛋白染色的判断标准[6]为：根据FDA推荐的Hercep Test结果评分：0～3分。0～1分判为阴性；2分判为弱阳性；2～3分为中度阳性；3分为强阳性。
1.4 统计学处理。
根据资料性质，应用SPSS10.0软件进行χ2检验及Pearson相关分析，以P0.05作为具有统计学意义。
2 结果。
2.1 p53、CD44v6和bcl2的表达情况。
p53在正常乳腺组织中表达阴性，在乳腺癌组织中阳性表达为细胞核出现棕黄色颗粒或团块状沉积, 阳性表达率为65.63%。在不同组织学分级中的表达水平有显著差异, 见表1。
bcl2蛋白在细胞的胞浆、 胞膜和核膜上呈现棕黄色颗粒， 以胞浆为主， 在乳腺癌组织中的阳性表达率为39.58%, 明显低于周围正常乳腺组织， 在不同组织学分级中的表达水平也有显著差异, 见表1。
CD44v6在乳腺癌组织中阳性表达部位主要位于细胞膜上，呈棕色颗粒，在乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于正常乳腺组织，但在不同组织学分级中的表达水平无显著差异, 见表1。
2.2 cerbB2的表达情况。
cerbB2在癌组织中的表达阳性率为68.75%, 明显高于正常乳腺组织；在有无淋巴结转移和不同组织学分级中的表达水平有显著差异, 见表2。
2.3 p53、CD44v6和bcl2的表达与cerbB2表达及淋巴结转移的相关性表1 p53、CD44v6和bcl2的表达情况 p53在淋巴结转移组中的表达率明显高于淋巴结非转移组，与cerbB2的表达呈正相关；bcl2在淋巴结转移组中的表达率明显低于淋巴结非转移组，与cerbB2的表达呈负相关；CD44v6在淋巴结转移组和非转移组中的表达率无明显差异，与cerbB2的表达也无相关性, 见表3。表2 cerbB2表达情况。