维药雪莲前列栓的质量标准研究
作者：希尔艾力·吐尔逊，斯拉甫·艾白，曼尔丹·尼牙孜，吐尔洪，薛梅。
【摘要】 目的建立雪莲前列栓的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)鉴别处方中的雪莲，用高效液相色谱(HPLC)法测定雪莲前列栓中绿原酸的含量。使用Waters RpC18 (150 mm×4.6 mm，5 μm) ;检测波长：327 nm;流动相：乙腈—0.4%磷酸溶液(10∶90);流速：1.0 ml·min—1;柱温：35℃。结果在TLC图谱中可检出雪莲的特征斑点，HPLC法在绿原酸26.68 ～293.48 μg(r=0.999 8，n=6)范围内，有良好的线性关系，平均加样回收率为97.86%(n=9)，RSD为1.89%。结论所采用的方法准确、可靠,可行性及重复性良好，能有效控制该制剂的质量。
【关键词】 雪莲前列栓; 绿原酸; 高效液相色谱; 薄层色谱。
维药雪莲前列栓是雪莲、红花、没药等多味维吾尔药材组成，具有消炎、消肿、通淋，用于慢性前列腺炎及前列腺增生等疾病。为了更好地控制其质量,保证临床疗效,本实验采用薄层色谱(TLC)法对其进行了定性鉴别研究,建立了制剂雪莲的薄层定性鉴别方法,并采用高效液相色谱(HPLC)法测定了制剂中绿原酸的含量,为本品质量标准的制订提供了依据。
1 仪器与试药。
Waters 600型高效液相色谱仪(美国Waters公司)，包括Waters 2487紫外检测器;METTLER AE200型电子天平，Sartorius BP211D型电子天平，KT—1000W超声波清洗器。乙腈为色谱级，其它试剂均为分析纯;硅胶G(青岛海洋化工有限公司生产);绿原酸对照品(批号0753—200111)，芦丁对照品(批号0753—200111)，雪莲对照药材(121205—0101)(中国药品生物制品检定所提供);雪莲前列栓中试样品由新疆奇康哈博维药有限公司生产，批号为040402，040405，040410。
2 方法与结果。
2.1 雪莲的薄层色谱鉴别取供试品3粒，断碎，称取约2.2 g，置索氏提取器中，加氯仿适量，回流脱脂5 h以上，弃去氯仿溶液，滤渣连同滤纸挥尽氯仿;加入甲醇适量，回流提取至近无色，水浴蒸至近干，加70%甲醇2 ml溶解，作为供试品溶液。另取雪莲对照药材1 g，加甲醇20 ml，超声提取30 min，水浴浓缩至1 ml，作为对照药材溶液;取芦丁、绿原酸对照品，甲醇溶解，分别制成每毫升含4 mg的溶液，作为对照品溶液。取不含雪莲的阴性样品3g,按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法[《中国药典》2005年版，Ⅰ部(附录VI B)]试验，吸取供试品溶液10μl，对照药材、对照品溶液5 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯—丁酮—甲酸—水(10∶6∶1∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%亚硝酸钠的1%的甲醇溶液，加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。阴性无干扰。结果见图1。
1.阴性对照 2～4.供试品(批号：040402，040405，040410)。
2.2 含量测定。
2.2.1 色谱条件色谱柱为Waters RpC18 (150 mm×4.6 mm，5μm) ，加保护柱;检测波长：327 nm;流动相：乙腈—0.4%磷酸溶液(10∶90);流速：1.0 ml·min—1;柱温：35℃。理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于1 000。流速为1.0 ml·min—1时，在此条件下，绿原酸保留时间、分离度、理论板数等色谱参数均符合要求。
2.2.2 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品7.6 mg，置10 ml量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品储备液(0.76 mg·ml—1);精密量取对照品储备液1 ml置50 ml量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含绿原酸15.2μg)。