Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｃａｓｐａｓｅ－３在胃间质瘤中的表达及意义

【摘要】 目的 研究Survivin和Caspase—3在胃间质瘤中表达情况及临床意义。

方法 用免疫组化法检测57例胃间质瘤和相应的56例光镜下阴性切缘组织及10例正常胃组织的Survivin和Caspase—3的表达情况，并进行相关的研究。

结果 胃间质瘤中Survivin表达呈核型和核浆型，阳性率为75．4％，胃间质瘤的光镜下阴性切缘组织为3．6％，正常胃组织无表达; 胃间质瘤中Caspase—3表达呈浆型，阳性率为33．3％，胃间质瘤的光镜下阴性切缘组织为82．1％，正常胃组织为 80．0％。

结论 Survivin在胃间质瘤中表达明显高于正常组织，与核分裂象和危险度正相关，可望作为一预后因素； Caspase—3在胃间质瘤中的表达明显低于正常组织； Survivin可能通过抑制Caspase—3的表达，从而抑制胃间质瘤的凋亡，这可能在胃间质瘤的发生发展过程中起了作用。

 　　【关键词】 Survivin；Caspase—3；胃间质瘤 　　【Abstract】 Objective To investigate the relationship between the expression of Survivin and Caspase—3 in Gastric Stromal Tumors(GST) and its significance. Methods Immunohistochemical technique was used to detect the expression of Survivin and Caspase—3 in 57 cases of Gastric Stromal Tumors, 56 cases of adjacent normal gastric tissues of Gastric Stromal Tumors and 10 cases of normal gastric tissues. Their relationship and significance were investigated. Results The positive rates of Survivin and Caspase—3 in Gastric Stromal Tumors were 75．4％ and 33．3％ respectively; whereas in adjacent normal gastric tissues of Gastric Stromal Tumors, the rates were 3.6％ and 82．1%respectively; and in normal gastric tissues the rates were 0 and 80.0% respectively. Conclusions The positive expression rates of Survivin in Gastric Stromal Tumors was higher than normal tissues ; the positive expression rate of Caspase—3 in Gastric Stromal Tumors was lower than normal tissues; the abnormal expression ofSurvivin and Caspase—3 in Gastric Stromal Tumors and their relationship suggested that Survivin could decrease the apoptosis of Gastric Stromal Tumors by depress the expression of Caspase—3,which may play an important role in the onset and development of Gastric Stromal Tumors.  　　【Key words】 Survivin；Caspase—3；Gastric Stromal Tumors 　　 　　胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）是当今肿瘤界研究的热点之一。

c—kit基因突变在GIST的发生发展中的重要作用已得到公认，但是否有其他机制起作用尚值得研究。

所有的GIST都是有恶变潜能的肿瘤，但所有的GIST都对常规化疗无效，其中的原因也值得探讨。

 　　1 材料和方法 　　1．1 材料 　　1．1．1 石蜡标本 收集广东医学院附属医院2002年1月至2006年10月手术切除的胃间质瘤57例(C组)及相应的光镜下阴性切缘组织56例(B组)（1例无正常切缘）的病理蜡块，另取同期因消化性溃疡行胃大部切除的正常胃组织10例(A组)的病理蜡块。

胃间质瘤病例术前均未行放疗或化疗，按NIH分类法[1]，极低危险度3例，低危险度14例，中危险度19例，高危险度21例。

 　　1．1．2 Survivin染色试剂 ①兔抗人Survivin多克隆抗体工作液（编号 ZA—0458）。

②PV—9000二步法免疫组化检测试剂盒，试剂盒内容：试剂1：3%H2O2去离子水；试剂2：Polymer Helper(即用型)；试剂3：Polyperoxidase—anti—mouse/rabbit IgG（即用型）。

均购自北京中衫金桥生物技术有限公司。

 　　1．1．3 Caspase—3染色试剂 ①鼠抗人Caspase—3多克隆抗体工作液（编号PR2285）。

②即用型SABC免疫组化染色试剂盒：试剂盒内容：试剂1：5%BSA封闭液，用于组织切片的封闭。

试剂2：二抗，亲和纯化抗体，标记长臂生物素，山羊抗小鼠IgG。

试剂3：SABC：链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物。

购自武汉博士德生物工程有限公司。

 　　1．2 方法 　　取存档的石蜡块，连续 4 μm厚度切片。

采用二步法检测Survivin，SABC法检测Caspase—3,均按说明书操作。

Survivin的染色用已知阳性染色的胃癌组织切片作阳性对照，结果阳性；以 PBS 代替一抗作阴性对照，结果阴性。

Caspase—3染色用已知的阳性染色扁桃体组织切片作阳性对照，结果阳性；PBS 代替一抗作阴性对照，结果阴性。

 　　1．3 结果判断 　　胃间质瘤中Survivin呈核型或核浆型，阳性判断标准是：胞浆或胞核出现棕黄色颗粒；Caspase—3呈浆型，阳性判断标准是：胞浆出现棕黄色颗粒。

对每张切片随机选取并计数10个高倍视野的阳性细胞百分比：阳性细胞≤10％为阴性，＞10％为阳性，并且11％～25％为弱阳性（＋），26％~50％为中等阳性（＋＋），＞50%为强阳性（＋＋＋）。