肿瘤相关糖蛋白72抗原在原发性乳腺癌组织中的表达及其临床意义

作者：王守满, 毛杰, 李波, 唐利立。

【摘要】 目的: 探讨抗肿瘤相关糖蛋白（TAG72）抗原的表达与原发性乳腺癌病理特征及预后的关系。方法: 随机选取原发性乳腺癌患者118例, 应用SABC免疫组化方法检测TAG72抗原的表达。并对其中的92例原发性乳腺癌患者中作术后为期5年的随访, 分析TAG72抗原与原发性乳腺癌患者预后的相关性。结果: TAG72抗原在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率为78.81% (93/118), 并与原发性乳腺癌组织的临床病理学特征及患者的预后均有密切的关系。在直径较大(P0.05)、 TNM分期较高(P0.05)、 淋巴结转移(P0.01)及组织学分级低(P0.01)的肿瘤组织中, TAG72抗原高表达。此外, TAG72抗原阳性表达的原发性乳腺癌患者的生存率明显低于阴性表达的患者 (P0.01)。结论: TAG72抗原的表达可能与原发性乳腺癌的发生、 浸润、 转移有关; TAG72抗原可以作为一个肿瘤标志物在临床中应用, 检测其在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率, 并结合临床病理学分级, 可提高对患者预后判断的准确性。

【关键词】 肿瘤相关糖蛋白抗原; 原发性乳腺癌; 临床病理学。

原发性乳腺癌是危害女性健康的常见恶性肿瘤之一, 其浸润和转移的程度是影响预后的主要因素［1］。因此, 寻找原发性乳腺癌侵袭转移的相关因子, 对于指导治疗、 提高术后生存率均有十分重要的意义。肿瘤相关糖蛋白72（TAG72）抗原是一种高分子量糖蛋白复合物, 属Lewis 血型抗原物质范畴［2］。已有研究应用免疫组织化学技术证明, TAG72 在绝大多数正常成人组织中不表达, 仅在睾丸Leydig 细胞、 结肠Goblet 细胞及胃部Parietel 细胞中有微弱的表达, 而在胃、 结直肠、 胰腺及肺等腺癌组织中呈强势的表达［3］。但其与原发性乳腺癌的关系, 国内外研究尚少。我们运用免疫组织化学染色技术观察TAG72抗原在正常乳腺组织和原发性乳腺癌组织中的表达, 探讨其与原发性乳腺癌临床病理学特征及预后的相关性。

1 材料和方法。

1.1 材料 2000—07/2002—07经病理确诊为原发性乳腺癌患者118例, 年龄49.3±3.8 (26～72)岁, 排除原位癌。患者术前均未行化放疗。其中TNMⅠ期45例, TNM Ⅱ期40例, TNMⅢ期33例。病理类型: 浸润性导管癌49例, 单纯癌43例, 导管内癌15例, 黏液腺癌11例。对于有完整临床及随访资料的92例患者进行为期五年的随访研究。对照组标本20例, 为非肿瘤组织中的正常乳腺组织。鼠源性抗人TAG72 mAb（工作浓度1∶100）和免疫组织化学染色采用SABC法试剂盒均购自上海生工生物技术有限公司。生物素化二抗、 辣根酶标记链酶卵白素复合物均购自福州迈新生物技术开发公司。

1.2 方法 采用免疫组织化学染色SABC法。标本依次进行以下处理: 多聚甲醛固定, 石蜡包埋, 4 μm连续切片, 于70℃烤片15 min后, 依次进行脱蜡、 水化、 梯度乙醇脱水, 30 mL/L H2O2灭活内源酶, PBS 漂洗5 min×3次。正常山羊血清室温孵育15 min。滴加20～30 μL PBS 稀释的一抗4℃过夜。PBS 漂洗5 min ×3 次。生物素化二抗、 辣根酶标记链酶卵白素复合物依次在37℃下, 孵育45 min, PBS 漂洗5 min×3次。DAB显色5～10 min, 自来水充分洗涤, 苏木素复染5 min, 稀盐酸淡化30 s, 冲洗5 min。脱水、 透明、 封片, 镜检。设TAG72抗原表达阳性的结肠癌组织为阳性对照, 用PBS替代第一抗体作阴性对照。TAG72抗原表达阳性为癌细胞的细胞质出现棕黄色颗粒, 不出现者为阴性。在400×光镜下观察10个视野, 每个视野计数100个细胞, 阳性细胞率小于10%为阴性, 阳性细胞率大于等于10%为阳性［4］（此处的标准设定依据: 参照参考文献中的TAG72蛋白在其他种类肿瘤中阳性表达判定的标准; 经预实验结果进行进一步确定）。

统计学分析: 所有数据用SPSS13.0处理, 计数资料采用χ2检验。生存分析用KaplanMeier法。P0.05为差异具有统计学意义。

2 结果。

2.1 TAG72抗原表达及其与原发性乳腺癌临床病理参数的关系 免疫组织化学染色结果显示, 原发性乳腺癌组织中, TAG72抗原的阳性表达主要定位于癌细胞的细胞质, 呈弥漫分布的棕黄色颗粒, 强弱不等。TAG72抗原的阳性表达率为78.81% (93/118), 而在正常乳腺组织中不表达。TAG72抗原在原发性乳腺癌组织中的表达情况与患者临床病理参数之间的关系见表1。经统计学分析可知, TAG72抗原的表达与患者性别、 年龄及肿瘤发生部位均无相关性(P0.05); 而与原发性乳腺癌组织的癌肿大小、 组织学分级、 TNM分期、 有无淋巴结转移有关。癌肿直径≥5 cm、 组织学分级III级及存在淋巴级转移的乳腺癌组织中, TAG72抗原的阳性表达率高于瘤体直径5 cm(P0.05)、 组织学分级I～II级(P0.01)及未发生淋巴级转移（P0.01）者; TNM I～II期的原发性乳腺癌组织中TAG72抗原的阳性表达率明显低于TNM III期的原发性乳腺癌组织 (P0.05)。

2.2 TAG72抗原表达与原发性乳腺癌患者预后的关系 本研究对92例原发性乳腺癌患者进行为期5年的术后随访。TAG72抗原表达情况与患者术后生存率的关系分析如表2, 图1所示。对于不同癌肿大小及TNM分期的患者, TAG72抗原的表达情况与其生存率无关（P0.05）; 而根据组织学分级和淋巴结转移情况分组的原发性乳腺癌患者中, 有TAG72抗原阳性表达的患者, 其生存率则明显低于阴性表达者。从生存分析结果看, 当TAG72抗原阴性表达时, 原发性乳腺癌患者的生存率高于TAG72抗原阳性表达的患者。表1 TAG72抗原表达与原发性乳腺癌临床病理参数的关系表2 TAG72抗原表达与原发性乳腺癌患者术后生存率的关系。