贵州余庆栽培吴茱萸的质量对比研究
作者：罗君 张丽艳，杨玉琴 杨家林 李健 谢宇 朱京祎。
【摘要】 目的对贵州余庆不同品种、不同采收期及不同加工方法栽培的吴茱萸进行质量对比研究，为吴茱萸GAP规范化种植提供科学依据。方法采用高效液相色谱法， Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为乙腈—水(56∶44)；流速为1.0 ml·min—1；检测波长为225 nm。 结果不同品种质量差异不大,不同采收期及不同加工方法的栽培吴茱萸质量存在较大差异。结论 能为贵州余庆栽培吴茱萸的品质优劣及GAP规范化种植和种植标准操作规程的制定提供一定的科学依据。
【关键词】 吴茱萸； 吴茱萸碱； 吴茱萸次碱； 高效液相色谱。
Abstract：ObjectiveThe comparative research of the quality of Rutaecarpine for differrent sorts of Rutaecarpines at different adopting periods in different approaches in Guizhou could be used as scientific ground to the regular planting of Rutaecaopine GAP. MethodsThe samples were determined by HPLC. Diamonsil C18 column (250 mm ×4.6 mm, 5 μ m) was used, the mobile phase consisted of acetonitrile — water (56∶44) with flow rate at 1.0 ml·min—1 , and the detection wavelength was set at 225 nm. ResultsLittle difference was found in the quality of different varieties, but there was large difference in the quality of different harvest periods and different processing methods of cultivation.ConclusionThis can provide scientific ground for quality ,GAP regular planting and standard planting ways of Evodia Rutaecarpa in Yuqing Guizhou Province.
Key words：Evodia rutaecarpa; Evodiamine ; Rutaecarpine; HPLC 吴茱萸始载于《神农本草经》，主产于贵州、湖南、陕西、浙江、四川等地。为贵州著名道地药材、常用苗药，占全国总产量的30%左右。具有疏肝下气、温中散寒、开郁止痛、燥湿助阳功能［1］。目前，贵州余庆已按照GAP要求建立了具有一定规模的吴茱萸生产基地。因此，解决吴茱萸药材质量控制问题，对贵州余庆不同品种、不同采收期及不同加工方法栽培的吴茱萸进行质量对比研究，能为吴茱萸品质优劣及其GAP规范化种植和种植标准操作规程的制定提供科学依据。
1 仪器与试药。
1.1 仪器Agilent1100高效液相色谱仪；AG135 型电子天平(梅特勒—托利多公司)；CH—250 型超声波清洗机（天津恒奥科技公司，功率250W，频率33kHz）。
1.2 试药乙腈为色谱纯(天津市科密欧化学试剂开发中心)，水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。 吴茱萸样品采自贵州余庆吴茱萸GAP基地，经贵阳中医学院何顺志研究员鉴定为芸香科植物吴茱萸Evodia rutaecarpa（Juss.）Benth.,疏毛吴茱萸Evodia rutaecarpa（Juss.）Benth.var.bodinieri（Dode）Huang。 吴茱萸碱（批号：11802－200504，供含量测定用）、吴茱萸次碱（批号：110801－200505，供含量测定用）均购于中国药品生物制品检定所。
2 方法与结果。
2.1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈—水(56∶44)；检测波长为225 nm ；柱温：25℃，流速：1.0 ml·min—1；进样量为5μl；理论板数以吴茱萸碱峰计算应不低于3 000。
2.2 对照品溶液 分别精密称取干燥至恒重的吴茱萸碱和吴茱萸次碱对照品适量，用甲醇制成浓度分别为0.025 6，0.0295 mg·ml—1的混合对照品溶液。
2.3 供试品溶液 精密称取吴茱萸药材(粉碎，过60目)0.2 g，置50 ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，称重，超声处理20 min，放冷，补重，滤过，过0.45 μm微孔滤膜，即得。 对照品、样品色谱图如图1～3。
2.4 线性关系考察 精密吸取混合对照品溶液2，4，6，8，10，12，14μl进样，于225 nm处分别测定吴茱萸碱和吴茱萸次碱的峰面积。以进样量（μg）为横坐标（X），以峰面积（A）为纵坐标（Y）计算回归方程：吴茱萸碱：Y=8 863.8 X+ 8.047 9，r=1.000 0，吴茱萸次碱：Y=4 596.5X—2.512 6，r= 0.999 95。结果表明，吴茱萸碱、吴茱萸次碱在0.051 2～0.358 4 μg，0.059～0.413 μg范围内线性关系良好。
2.5 精密度实验精密吸取混合对照品溶液5 μl，连续进样6次，在上述色谱条件下测定峰面积，结果吴茱萸碱和吴茱萸次碱峰面积RSD分别为0.34%，0.23%，表明精密度良好。
2.6 重复性实验精密称取同一样品6份，按上述供试品溶液的制备方法和色谱条件测定，结果吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量RSD分别为1.30%，2.81%，表明该方法的重复性良好。