可逆高效液相色谱法测定水杨酸软膏中水杨酸含量
【摘要】 目的：建立水杨酸软膏中水杨酸含量的可逆高效液相色谱法。方法：选择合适的溶剂，在229 nm波长处测定水杨酸软膏中水杨酸的含量。结果：在此方法下能排除敷料的干扰，测得水杨酸线形范围为0.5~2.5 mg/ml，回收率为99.08％。RSD为0.49％。结论：此法能简便、快速、准确地测定制剂中主要成分的含量，使用价值较高。
水杨酸是皮肤科制剂中常用药物，具有杀菌抑菌、软化角质层的作用。水杨酸软膏以水杨酸为主成分，配以皮肤渗透剂月桂氮酮、甘油等药物。以卡波莫940为基质，制成涂展性好，渗透力强，不污染衣物，无油腻感的制剂，在临床上应用理想。但由于所采用的基质干扰，造成含量测定不易[1]，为此建立的高效液相色谱法能快速简便地测定制剂中的水杨酸含量，使用价值较高。
1 仪器与试剂。
VARIN9012—9050高效液相色谱仪；紫外可见分光光度仪。水杨酸对照品(中国药品生物制品检定所)。5批水杨酸软膏，由南通大学附属医院提供。乙腈、甲醇(色谱纯)、重蒸水、醋酸铵、三乙胺、氯仿(分析纯)。
2 方法与结果。
2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：C18（150 mm×4．6 mm，5 μm）。流动相：乙腈—甲醇—2％醋酸铵（14∶43∶43）1000 ml加三乙胺0.2 ml。检测波长：229 nm流速：1.0 ml/min，柱温：30℃进样量：10 μ1。外标法峰面积定量，对照品A、样品B色谱图见图l。在该色谱条件下，水杨酸的保留时间为6.3 min，理论塔板数为4904。
2.2 线形关系 精密称取干燥至恒重的水杨酸对照品100 mg，分别置10 ml 量瓶中，用氯仿—甲醇(1∶1)溶解并稀释至刻度，制成10 mg/ml的溶液。分别精密量取该溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml置10 ml量瓶中，用氯仿—甲醇(1∶1)稀释至刻度。在上述色谱条件下，分别精密进样10 μl，测定峰面积，对结果进行回归分析，(色谱图见图1)。结果表明：进样量在0.5~2.5 mg/ml峰面积和对照品的浓度线性关系良好，经统计学处理求得回归方程为：y=7x+778(n=5) r=0.9998。
2.3 精密度实验 取同一对照品溶液，1天内连续测定5次和每天取样测定连续测定5天，进行日内、日间精密度测定。结果水杨酸日内RSD为0.91％(n=5)，日间RSD为0.98％(n=5)。结果表明：精密度良好。
2.4 重复性试验 按对照品溶液配制方法平行配制5份溶液，每份连续进样5次，记录峰面积。测得水杨酸的RSD为0.24％。结果表明：重复性良好。