复方当归注射液中羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量测定
【摘要】 目的运用高效液相色谱法测定复方当归注射液中的羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量。方法色谱柱为依利特Hypersic ODS2（4.6 mm×200 mm，5 μm），测定阿魏酸的流动相为甲醇—0.4%醋酸水（30∶70），其检测波长322 nm；测定羟基红花黄色素A所用流动相为甲醇—0.6%醋酸水（15∶85），其检测波长403 nm。柱温25℃，流速1 ml/min。结果阿魏酸在4.44～ 266.4 μg/ml之间与峰面积呈线性关系;羟基红花黄色素A在4.508～ 360.64 μg/ml之间与峰面积呈线性关系;测得阿魏酸平均回收率为104.34%，RSD为2.77%；羟基红花黄色素A平均回收率为99.26%，RSD为2.20%。结论该方法简便快捷，重复性好，可用于复方当归注射液中羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量测定。
【关键词】 复方当归注射液； 羟基红花黄色素A； 阿魏酸； 高效液相色谱法。
Abstract：ObjectiveTo make the determination of compound angelica injection in the quality standard more perfectly.MethodsUsing HPLC with Hypersic ODS2 Column，the mobile phase of ferulic was composed of a mixture of methanol—water with acetic acid ，which the concentration was 0.4%，and the oxhydryl —safflower yellow Element A was composed of a mixture of methanol—water with acetic acid ，which the concentration was 0.6%.The flow rate was 1ml/min，the UV detection wavelength was set at 322nm and 403nm，and the tempetature was at 25℃.ResultsFerulic and the oxhydryl—safflower yellow Element A showed linear relationship with peak areas in the range of 4.44～266.4 μg/ml and 4.508～360.64 μg/ml respectively.The average recovery were 104.34% and 99.26% and the RSD were 2.77% and 2.20% respectively.ConclusionThe method is simple，convinent and repeatable，and can be applied to the qualification control of theoxhydryl—safflower yellow Element A and Ferulic.
Key words： Compound angelica injection； Oxhydryl—safflower yellow Element A； Ferulic 复方当归注射液系以当归、川芎、红花3味中药为原料。临床上主要用于治疗痛经、经闭、跌扑损伤等。《中国药典》2005版规定采用高效液相色谱法测定阿魏酸的含量，本文通过高效液相法不仅对《中国药典》规定成分阿魏酸进行了含量测定，同时还对红花当中的羟基红花黄色素A也进行了定量研究和方法学考察，便于更全面地控制复方当归注射液的质量。现报道如下。
1 仪器与材料。
Agilent1200色谱系统(DAD检测器)，阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110773—200611），羟基红花黄色素A(中国药品生物制品检定所，批号：111637－200503)，复方当归注射液（桔都制药厂），甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果［1～3］。
2.1 色谱条件的选择。
2.1.1 流动相的选择分别考察了甲醇—水、乙腈—水和甲醇—醋酸水几种系统，发现阿魏酸和羟基红花黄色素A未加酸梯度洗脱时，分离效果都不理想，峰形拖尾严重，无法达到基线分离；使用甲醇—醋酸水体系梯度洗脱，可使各色谱峰达到较好的分离，峰形较好。
2.1.2 检测波长的选择结合相关文献及DAD图谱，选择322 nm为阿魏酸，403 nm为羟基红花黄色素A的检测波长。
2.1.3 色谱条件的确定 阿魏酸选定的色谱条件：色谱柱为依利特Hypersic ODS2（4.6 mm×200 mm，5 μm），流动相为甲醇—0.4%醋酸水（30∶70），检测波长322 nm，柱温25℃，流速1 ml/min，进样量10 μl。
羟基红花黄色素A选定的色谱条件：色谱柱为依利特Hypersic ODS2（4.6 mm×200 mm，5 μm），流动相为甲醇—0.6%醋酸水（15∶85），检测波长403 nm，柱温25℃，流速1 ml/min，进样量10 μl。
2.2 溶液的制备。
2.2.1 对照品溶液的配制 称取阿魏酸对照品适量，精密称定，用甲醇制成每毫升含栀子苷44 μg的溶液，得阿魏酸对照品溶液，同样条件下制成每毫升含羟基红花黄色素A 45 μg的溶液，得羟基红花黄色素A对照品溶液。