HPLC法测定冠心丹参胶囊中丹酚酸B的含量
【摘要】 用HPLC法测定冠心丹参胶囊中丹酚酸B的含量。方法 采用Kromasil100—5 C18柱（250mm×4.6mm, 5μm），以乙腈—甲醇—1％甲酸溶液（10：30：60）为流动相，检测波长为286nm。结果 丹酚酸B在0.08～1.64μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为97.9%,RSD为2.0%（n=6）。结论 本法简便、快速，结果准确可靠。
【Abstract】 Objective To establish a method for the determination of salvianolic acid B in Guanxindanshen capsules by HPLC.Methods Kromasil100—5 C18 column （250×4.6mm,5um） was used with a mobile phase of acetonitrile—methanol—1%formic acid solution （10:30:60）. The flow rate was 1.0 ml.min—1 and the detection wavelength was 286nm.Results There was good linearity in the range of 0.08—1.64μg （r=0.9999）. The average recovery was 97.9% with RSD2.0%（n=6）.Conclusion The method is simple, accurate ,reproducible and can be used to control the quality of the preparation.
【Key words】 HPLC; Guanxindanshen capsules; salvianolic acid B。
冠心丹参胶囊是由丹参、三七、降香油三味中药组成的复方制剂，具有活血化瘀、理气止痛之功效，用于气滞血瘀所致的胸闷、胸痹、心悸气短；冠心病见上述症候者。丹参为方中君药，其主要水溶性有效成分丹酚酸B具有抗心绞痛、增加冠脉血流量及抗血小板凝集作用。而此药品质量标准中未对该成分进行质量控制。本实验采用HPLC法测定冠心丹参胶囊中丹酚酸B的含量，可用于冠心丹参胶囊的质量控制。
1 仪器与试药。
1.1 仪器 LC—10ATVP高效液相色谱仪（日本岛津）。华南HN—1006型超声清洗仪（广州华南超声设备厂）。BP211D电子天平（德国赛多利斯）。
1.2 试剂 乙腈为色谱纯；乙醇、甲酸均为分析纯；水为Millipore 去离子水。对照品：丹酚酸B（批号：111562 —200302，中国药品生物制品检定所）。冠心丹参胶囊（国药控股深圳中药有限公司出品，批号：070302、070401、070501）。
2 色谱条件。
色谱柱：Kromasil100—5 C18柱（250mm×4.6mm, 5μm）。流动相：乙腈—甲醇—1％甲酸溶液（10：30：60）。检测波长：286nm。柱温：30℃。流速：1.0ml/min。外标法定量。
3 线性关系标准。
溶液制备：精密称取丹酚酸B对照品适量，分别加甲醇制成每1ml含丹酚酸B 0.08mg、0.24mg、0.4mg、0.8mg、1.2mg、1.6mg的溶液；分别进样10μl，记录峰面积，取峰面积及进样量进行线性回归。结果见表1、图1。表1 丹酚酸B校正曲线计算表图1 丹酚酸B校正曲线 结果表明：丹酚酸B的进样量在0.08 ~1.64μg范围内与峰面积线性关系良好。
4 供试品。
测定供试品溶液的制备：取本品适量，研细，取约0.2g，精密称定，置20ml量瓶中，加75％乙醇近刻度，超声（300W,45kHz）处理15min，放冷，加75％乙醇至刻度，摇匀，静置，滤过，取续滤液，用微孔滤膜滤过，即得。测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定。测得3批样品含量结果见表2。表2 冠心丹参胶囊中丹酚酸B含量测定结果所测3批冠心丹参胶囊样品，丹酚酸B的含量在6.59~8.56mg/g之间。