４种方法筛查血红蛋白病的探讨

作者：张玲　胡朝晖　吴鹏　方菊　朱庆义。

[摘要] 目的 比较4种方法（电泳法、wHPLC、MCV法、一管法）筛查Hb病的检出效能及其准确性，为临床寻求一种较理想的筛查方法，提高实验诊断率。 方法 选择2007—2008年间在我中心进行婚检、孕检、产检及体检标本9203例，同时采用电泳法、wHPLC（弱阳离子交换色谱法）、MCV法(平均红细胞体积测定)、红细胞脆性实验（一管法）进行检测，对1523例疑为Hb病筛查实验结果进行回顾性分析。 结果 4种方法筛查Hb病的检出率分别为16.5%、16.5%、16.8%、8.3%。准确率分别为90%、92%、96%、52%，4种筛查方法检出率及准确率经统计学分析，差异有统计学意义（P0.01）。电泳法、wHPLC法、MCV法对筛查Hb病检出率明显高于一管法。 结论 联合应用电泳法、wHPLC（弱阳离子交换色谱法）及MCV法，能有效地检出Hb病患者。红细胞脆性实验（一管法）存在一定的漏检率，筛查效能差，不具备单独应用的临床价植。 　　[关键词]血红蛋白病；电泳法；弱阳离子交换色谱法；MCV法；红细胞脆性实验 　　【Abstract】 Objective The purpose of the study was to look for an optimal screening method to improve the diagnostic rate for hemoglobinopathies. To achieve this goal, four methods including Hemoglobin(Hb) electrophoresis, weak cation exchange HPLC (wHPLC), red cell mean corpuscular volume (MCV) test and red cell osmotic fragitity ( one tube method) are compared in the study for the diagnosis of hemoglobinopathies, Antenatal examination.Methods9203 samples for pre—marital check—ups, maternal screening, and health exams during 2007 — 2008 in KingMed center were compared with Hb electrophoresis, wHPLC, MCV, red cell osmotic fragitity (one tube method) test at the same time. 1523 samples with suspended hemoglobinopathies were analysed with regression.Results The positive rate of four methods in screening hemoglobinopathies were 16.5%, 16.5%, 16.8% and 8.3%,, while accuracy rate were 90%, 92%, 96% and 52%, respectively. The positive rate and accuracy were different significantly (P0.01) Positive rate in electrophoresis, wHPLC, and MCV are higher than one tube method. Conclusion Combination with electrophoresis, wHPLC and MCV 　　methods are effectively to screen hemoglobinopathies patients. red cell osmotic fragility test (One tube method) consists in higher false negative rate and is limited in independent use in screening hemoglobinopathies. 　　 【Key words】 Hemoglobinopathies;Electrophoresis;Weak cation exchange HPLC; MCV, red cell osmotic fragility test 　　血红蛋白病是由于珠蛋白基因编码突变造成的一种珠蛋白肽链结构异常性疾病，如HbE、HbG、HbQ、HbS等，地中海贫血是珠蛋白基因内部或其旁侧序列的突变，使受累基因表达下降，珠蛋白α和非α肽链比例失衡所致的溶血性贫血，简称地贫，这是两种常见的遗传性疾病[1]。近年来，分子生物学研究表明，不管是Hb病，还是地贫，其分子基础是共同的，都是由于珠蛋白基因的突变所致[2]。地贫是危害公共健康的一种主要疾病，我国华南地区是地贫的高发区。目前，国内外已较普遍应用MCV[3]和红细胞渗透脆性试验[4]低于正常值来初筛地贫携带者。地贫携带者的筛查方法有很多[5]，但各有利弊，目前临床上应用最为广泛的还是红细胞指数分析法。临床上重要的Hb变种通常是用常规的血液学方法初步筛查发现的。Hb水平过低、小红细胞症、血红蛋白过多、网织细胞增多、胆红素血症和融珠蛋白血症等症状表示可能有α或β地贫，或严重的不稳定Hb类型存在。轻型地中海贫血患者的临床症状和体征常不明显，部分可能仅有伴有轻度贫血，现有的Hb电泳、红细胞脆性试验等实验，往往不能满足其诊断要求[6]。目前国际上明确诊断地贫主要是采用聚合酶链技术（PCR）结合其他分子生物学手段检查[7，8]。但因其技术要求及费用成本高，往往不能用于临床筛查。因此，我们必须寻找一种检出效能较好的Hb病筛查方法，为临床提供可靠数据，以便可疑Hb病患者的进一步确诊，也是预防地中海贫血患儿出生的关键措施，综合分析报告如下。 　　1．材料与方法 　　1.1对象：2007年12月至2008年6月来自我中心血液室进行孕前，产前，婚检及体检的标本（包括广东省珠三角，粤北，粤东，粤西,广州市，深圳特区）9203例，每例标本同时进行血常规、Hb电泳、wHPLC、红细胞脆性试验检测。部分筛查阳性标本用PCR、RDB技术进行α和β地贫基因检测。对照组100例血样采自我体检中心4种方法检测正常者。